Name: Evaluación de las vocalizaciones de ultrasonidos durante autoadministración de drogas en ratas (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2010-07-22T17:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 25 s
Description: Aprende a evaluar vocalizaciones ultrasónicas en ratas durante autoadministración de cocaína. Este método permite medir respuestas emocionales en tiempo real mediante grabación y análisis espectrográfico de USVs.

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Este trabajo ha sido financiado por el NIH subvenciones RO1DA014640 y 3R01DA014640 05S1-, la Universidad de Texas VP Oficina de Investigación (CLD), el NIDA Programa de Suministro de Medicamentos y la Universidad de Texas Waggoner Centro de Investigación de Alcohol y Adicción Bruce-Jones Graduate Fellowship (Eym) . Damos las gracias a Leah McAleer, Abdalla Mohamed, Thakore Neha, Byron Barksdale, Nguyen Tiffany, Tian Tian, ​​Owen Hunter, Phongsawad Proy, Helen Reed, Chavana Rachel, Ju Linda y Maddox Rosie por su ayuda en USV análisis de datos.

*= Puntos importantes <ol><li> Bien manejada masculino ratas Sprague-Dawley están capacitados para la palanca de prensa con el premio de comida (45 mg de sacarosa pellets; Bio-Serv, Frenchtown, NJ). </li><li> Catéteres intravenosos * se construyen a partir de cánula de acero inoxidable (plásticos Uno, VA) y el tubo de Silastic. Ratas someterse a un procedimiento de cateterismo yugular quirúrgica para permitir la auto-administración de drogas. Después de la cirugía, la permeabilidad del catéter se mantiene al día el lavado con 0,1 ml de una solución salina al 0,9%, la heparina y solución Timentin. </li><li> Cocaína (NIDA inventario y suministro de medicamentos y el Programa de Control, RTI International, Research Triangle Park, Carolina del Norte) que se utiliza en este experimento se disolvió en solución salina isotónica (0,9%) en las concentraciones de la dosis apropiada de acuerdo a los pesos de los animales (0,75 mg / kg / inyección ), de modo que cada inyección fue de 0,1 ml. Los controles recibieron solución salina en el mismo volumen de inyección /. </li><li> * El aparato utilizado para la autoadministración de drogas se compone de una sola palanca cámara operante (28 x 22 x 21 cm) equipado con luces de la casa y el estímulo y 3 juegos de fotorayos. La cámara operante se encuentra dentro de una más grande que atenúan el sonido de la cámara (Med Asociados, St. Albans, VT) para limitar el ruido exterior y de la luz. Durante las sesiones de la administración, los animales fueron conectados por vía intravenosa a través de tubos a una jeringa montada en una bomba de motor (Instrumentos Razel Científico, el Modelo A, St. Albans, VT) que contienen una solución de cocaína (0,75 mg / kg / inyección) o solución salina estéril . Después de cada pulsación de la palanca, una luz de estímulo por encima de la palanca se ilumina y la cocaína o la solución salina se administra en un tiempo de infusión de 6 seg. La actividad locomotora se evaluó como el número de interrupciones de haz de luz. La droga de auto-administración del programa está controlado, y las respuestas conductuales (por ejemplo, las respuestas de la palanca y la actividad locomotora) se registran utilizando un ordenador equipado con Pentium Med Med de software para PC (Med Associates). </li><li> * Para detectar y registrar USVs, micrófonos de ultrasonidos, el hardware de adquisición de datos, software de grabación (Bioacústica Avisoft, Berlín, Alemania) y los sistemas de PC de la computadora se necesitan. Para el experimento, los micrófonos de ultrasonidos (rango de frecuencia de respuesta = 10-100-kHz) están bien sujetos en el centro de las cámaras de condicionamiento operante. Los micrófonos se conectan al hardware de adquisición de datos (Avisoft-Ultrasoundgate) situadas fuera de la cámara operante y las grabaciones se recogen en un sistema informático PC (Dell Optiplex GX270, Windows XP Professional, Intel (R) Pentium (R) 4 CPU, 2.60 GHz, 1 GB de RAM) con grabador multi-canal de software de grabación (Bioacústica Avisoft). </li><li> * Cada medicamento self-administration/USV procede sesión de grabación de la siguiente manera: <ol class="lalpha"><li> Los animales son cuidadosamente sacados de su jaula y su catéter intravenoso permanente es lavado con 0,05 ml de una solución salina heparinizada para detectar un posible mal funcionamiento del catéter. </li><li> * Las ratas están conectados a un pivote montado en la cámara operante que permite la administración de cualquier fármaco o de un vehículo durante las sesiones de auto-administración. Los animales se coloca suavemente dentro de la cámara operante y las puertas están cerradas en silencio. La droga de auto-administración del programa (Med PC) y el software de grabación USV (grabadora) se encuentran en dos sistemas informáticos diferentes. Por lo tanto, con el fin de ser capaces de vincular las conductas dentro de la cámara operante con la detección de USV, ambos programas deben iniciarse simultáneamente (por ejemplo, puede necesitar dos personas dependiendo de la ubicación de los ordenadores). </li><li> * El USVs individuales se registran y una marca de tiempo-continuo durante toda la sesión. El programa MedPC control y registro de eventos dentro de la cámara operante se puede escribir a cualquier especificación. El programa se cierra automáticamente MedPC al final de la sesión. La grabación USV tiene que ser detenido manualmente en el sistema de grabación dedicado USV equipo. </li><li> Al final de la sesión, los animales son cuidadosamente sacados de la cámara operante, desconectado de la rótula y se lavó con solución salina heparinizada 0,05 ml para limpiar la sonda de residuos de medicamentos. </li></ol></li><li> * Por razones logísticas, se utilizó un sistema informático para el análisis por separado USV (Dell Optiplex 745, Windows XP Professional, Intel (R) Core (TM), 2 CPU, 2.40 GHz, 2 GB de RAM), pero el software de análisis puede ser también instalado en el sistema mismo equipo que el software de grabación. USV análisis debe ser realizado cuidadosamente para garantizar la precisión: <ol class="lalpha"><li> * SASLab Pro software de análisis (Bioacústica Avisoft, Berlín, Alemania) permite la USVs registrada para ser visibles y audibles para los experimentadores humanos muestran en un espectrograma. </li><li> * Uso de las opciones de configuración disponibles, el espectrograma resultantes pueden ser modificados según las preferencias individuales. Además, los ruidos de fondo en las bajas frecuencias (por ejemplo, generado por el ventilador de las cámaras de condicionamiento operante) se puede cortar para que el software para detectar automáticamente los sonidos por encima de esa frecuencia en el espectrograma. Estas funciones ayudar en el análisis de los datoscomo por lo que los archivos de sonido más corto y más rápido para evaluar. </li><li> Los ruidos de fondo en las mismas frecuencias que USVs se pueden descubrir en el espectrograma. Dado que los archivos de sonido se registran como. Wav, el investigador tiene que escuchar los archivos de sonido durante la evaluación para confirmar y diferenciar USVs del ruido de fondo. </li><li> * El software de análisis puede crear archivos de Excel con parámetros como la frecuencia de llamadas, ancho de banda, la duración y la hora exacta de la USV emitida. Este último permite la correlación de USVs a la hora exacta antes o después de las drogas es auto-administrado. Esto permite USVs para ser utilizados como mediciones en tiempo real de la respuesta emocional de la rata en casos específicos durante el procedimiento experimental. </li></ol></li></ol> Los resultados representativos: <img src="/files/ftp_upload/2041/2041fig1.jpg" alt="Figura 1" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Figura 1"> Figura 1:. Mostrar espectrograma de un rango de 22 USV-kHz llamadas de larga en el rango de 22 kHz se suscitó en conjunto con estímulos negativos y se cree que reflejan un estado emocional negativo. <img src="/files/ftp_upload/2041/2041fig2.jpg" alt="Figura 2" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Figura 2"> Figura 2: Pantalla espectrograma de USVs de 50 kHz corto "plana" y "frecuencia modulada" de 50 kHz USVs se suscitó en la anticipación y la cocaína durante la autoadministración.. Están asociados con el afecto positivo. <img src="/files/ftp_upload/2041/2041fig3.jpg" alt="Figura 3" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Figura 3"> Figura 3:. Inducido por cocaína de 50 kHz USVs gama gráfico muestra USVs (10-sec cubos) obtuvo antes y después de las inyecciones de cocaína auto-administrados (0,75 mg / kg / les) en una rata representante el día 5 de cocaína auto-administración sesiones. Inmediatamente después de la colocación dentro de la cámara operante y antes de la disponibilidad de la cocaína, de anticipación a la cocaína USVs se suscitó y en la auto-administración, inducidas por la cocaína USVs fueron emitidos.

<ol><li>Brudzynski, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Communication+of+adult+rats+by+ultrasonic+vocalization%3A+biological%2C+sociobiological%2C+and+neuroscience+approaches%5BTitle%5D)+AND+%22ILAR+J%22%5BJournal%5D)">Communication of adult rats by ultrasonic vocalization: biological, sociobiological, and neuroscience approaches.</a> ILAR J. 50 (1), 43-43 (2009).</li>
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<li>Flagel, S. B., Robinson, T. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantifying+the+psychomotor+activating+effects+of+cocaine+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Behav+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Quantifying the psychomotor activating effects of cocaine in the rat.</a> Behav Pharmacol. 18 (4), 297-297 (2007).</li>
<li>Pierce, R. C., Kalivas, P. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Locomotor+behavior%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Protoc+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Locomotor behavior.</a> Curr Protoc Neurosci. Chapter 8 (Unit 8), 1-1 (2007).</li>
</ol>

Ratas vocalizar en frecuencias ultrasónicas que tienen una función social y comunicativa y expresar estados emocionales subjetivos 1,2. 22-kHz USVs son provocados por los eventos que causan ansiedad y angustia, tales como señales estímulo eléctrico plantar, la presencia de depredadores, las drogas y la derrota de aversión sociales 2,3. Por lo tanto, estos USVs típicamente de largo (&gt; 0,3 s) se cree que representan un estado de afecto negativo de los animales. Por el contrario, menor de 50 kHz USVs (&gt; 0,3 s) se emiten durante y en previsión de encuentros positivos, tales como la alimentación, el apareamiento y el juego social, por lo que han sido relacionados con un estado emocional positivo de los animales 2,4. Estas llamadas se han asociado también con el refuerzo de los eventos relacionados con la activación del sistema dopaminérgico 5. Por ejemplo, un aumento de 50 kHz USVs han sido provocados por inyecciones sistémicas de cocaína 6 o 7 d-anfetamina y entornos vinculado anteriormente con las drogas de abuso 8.10. Se ha propuesto que el aumento en la actividad locomotora en roedores se relacionan con la motivación y mejora el comportamiento apetitivo 11-14. Sin embargo, esta relación es indirecta, como la mejor. Mediante el estudio de la aparición y persistencia de USVs de frecuencias particular, es posible comprender mejor a los efectos emocionales de los diversos aspectos de la experiencia de la droga. En este montaje experimental, se recogieron grabaciones USV inmediatamente antes y durante la administración de medicamentos auto-sesiones. Esto nos ha permitido estudiar la evolución de las expectativas de drogas durante el intervalo sin medicamentos justo antes del inicio de la sesión y para evaluar los efectos directos de la cocaína en USVs. La autoadministración de drogas método permite que las ratas de control directo de sus propios niveles de consumo de drogas animales y desarrollar expectativas precisas del tiempo y la frecuencia de administración del fármaco. Como resultado, USVs detectados durante estas sesiones reflejan las expectativas exacta de entrega de la droga. Además, USVs se puede evaluar durante los intervalos antes de la disponibilidad de drogas (USVs por ejemplo, de anticipación), en ratas que recibieron experimentador de los fármacos administrados, y durante los ensayos de extinción de drogas. Por lo tanto, los cambios en el afecto asociado con, la anticipación de drogas administración de la droga no contingente y la abstinencia de drogas también puede ser determinado. Los análisis de los cambios USV en el transcurso de la exposición al fármaco a corto y largo plazo podría ser una interpretación más detallada de los efectos de la exposición al fármaco en el funcionamiento afectivo. Además de la administración de medicamentos auto-experimentos, las grabaciones en cámaras USV operante también puede ser utilizado para una variedad de otras manipulaciones de comportamiento asociadas con la recompensa o la aversión, como beber alcohol, el refuerzo de los alimentos, y el condicionamiento del miedo y los procedimientos de extinción. Importantes detalles metodológicos Puesto que el software MedPC puede ser usada para manipular con precisión las condiciones experimentales, como la disponibilidad de palanca y las condiciones de iluminación, su uso en combinación con la grabación de USV y análisis permite que los efectos emocionales de las presentaciones de medicamentos asociados de referencia (es decir, presentaciones de luz u otros estímulos sensoriales) y los efectos directos del consumo de drogas que se determine. Por lo tanto, para garantizar la superposición de los plazos de los procedimientos de auto-administración y las grabaciones de USV, es fundamental que tanto los programas de software (por ejemplo, MedPC y grabadora) se activan de forma simultánea al inicio de cada sesión. Debido a la enorme cantidad de espacio digital necesario para almacenar datos USV (por ejemplo, un archivo de sonido de 10 minutos requiere aproximadamente 250 MB), debe tener cuidado cuando los animales se ejecutan múltiples en un solo sistema de computación, al mismo tiempo. Para evitar errores de grabación, el tamaño de la RAM del sistema informático de registro de las necesidades de ser considerable (1-2 GB). Otras formas de reducir los errores de grabación incluyen la reducción de la resolución USV durante la grabación y / o reducir el número de animales de ejecutar a la vez. Además, es importante que el investigador esté atento a todos los aspectos de recolección de datos durante todo el procedimiento experimental. Por ejemplo, la acumulación de una gran cantidad de datos grabados en el disco duro puede provocar que el programa de grabación de USV para hacer una pausa. En este caso, el programa de grabación que es necesario reiniciar de inmediato para evitar pérdida de datos y USV de sincronización de USVs con otras medidas de comportamiento. Las condiciones ambientales pueden influir en llamar USV. Por ejemplo, el toque de un ser humano desconocido puede causar que el animal emite negativo de 22 kHz-llamadas, lo que podría ser confundido como una aversión a las condiciones experimentales. Por lo tanto, el manejo intensivo antes de la manipulación experimental es un aspecto importante de los experimentos conductuales. Además, desde ambientes de la novela también puede provocar no específicas llamadas USV, los animales deben estar habituados al entorno de prueba, si es posible.

<table><tbody><tr><td>Paquete de prueba de comportamiento de condicionamiento operante (autoadministración de fármacos) para ratas</td><td><a href="http://www.med-associates.com/" target="_blank"><img src="/img/new_window.png"> Med Associates, Inc.</a></td><td>MED-008-CT-B1</td><td></td></tr><tr><td>Fuente y detector de infrarrojos (fotobeam)</td><td><a href="http://www.med-associates.com/" target="_blank"><img src="/img/new_window.png"> Med Associates, Inc.</a></td><td>ENV-253SD ENV-253</td><td></td></tr><tr><td>Software Med PC</td><td><a href="http://www.med-associates.com/" target="_blank"><img src="/img/new_window.png"> Med Associates, Inc.</a></td><td>SOF-735</td><td></td></tr><tr><td>Bomba de jeringa de velocidad única</td><td>Razel Scientific Instruments</td><td>Model R-E</td><td></td></tr><tr><td>Pelets de sacarosa de 45 mg</td><td>Bio-Serv</td><td>F0042</td><td></td></tr><tr><td>Cánula de catéter</td><td>Plastics One</td><td>C313G-5UP</td><td></td></tr><tr><td>Avisoft-UltraSoundGate 416H</td><td>Avisoft BioAcoustics</td><td>Part #34163</td><td></td></tr><tr><td>Microfónos ultrasónicos</td><td>Avisoft BioAcoustics</td><td>Part #40011</td><td></td></tr><tr><td>Software Avisoft-RECORDER</td><td>Avisoft BioAcoustics</td><td>Part #10302</td><td></td></tr><tr><td>Software Avisoft-SASLab</td><td>Avisoft BioAcoustics</td><td>Part #10101</td><td></td></tr><tr><td>Computadora PC para grabación de USV</td><td>Dell</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Computadora PC para análisis de datos de USV</td><td>Dell</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Cocaína</td><td>RTI International</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

evaluación de las vocalizaciones de ultrasonidos durante autoadministración de drogas en ratas

Assessment of Ultrasonic Vocalizations During Drug Self-administration in Rats

La administración del fármaco procedimientos de auto-son comúnmente utilizados para estudiar los cambios conductuales y neuroquímicos asociados con el abuso humano de drogas, la adicción y la recaída. Diversos tipos de actividades de comportamiento se utilizan comúnmente como medidas de motivación de drogas en los animales. Sin embargo, un componente crucial de la recaída del abuso de drogas en los consumidores de cocaína es la abstinencia &quot;ansia por la droga&quot;, que es difícil de modelar en los animales, como ocurre a menudo en ausencia de conductas manifiestas. Sin embargo, es posible que una clase de vocalización ultrasónica (USV) en ratas puede ser un marcador útil para las respuestas afectivas a la administración del fármaco, la anticipación de drogas e incluso ansia por la droga. Ratas vocalizar en frecuencias ultrasónicas que sirven como una función comunicativa y expresar estados emocionales subjetivos. Varios estudios han demostrado que los diferentes rangos de frecuencia de llamada se asocian con estados emocionales negativos y positivos. Por ejemplo, las llamadas de alta frecuencia (&quot;50 kHz&quot;) se asocian con el afecto positivo, mientras que las llamadas de baja frecuencia (&quot;22-kHz&quot;) representan un estado emocional negativo. En este artículo se describe un procedimiento para evaluar USVs rata asociados a la cocaína todos los días de auto-administración. Para este procedimiento, se utilizó estándar de una sola palanca operante cámaras alojadas en cajas que atenúan el sonido de la cocaína de auto-administración sesiones y se utilizan micrófonos de ultrasonidos, multi-canal de grabación de hardware y los programas de software especializado para detectar y analizar USVs. Mediciones reflejan USVs emotividad de las ratas antes, durante y después de la disponibilidad de medicamentos y puede estar relacionada con las drogas se suele evaluar la auto administración de datos de las respuestas de comportamiento como la palanca, entre los intervalos de respuesta y la actividad locomotora. Desde USVs se puede evaluar durante los intervalos antes de la disponibilidad de drogas (USVs por ejemplo, de anticipación) y durante los ensayos de extinción de drogas, cambios en el afecto asociado con la anticipación de drogas y la abstinencia de drogas también puede ser determinado. Además, la determinación de cambios USV en el transcurso de corto y la exposición al fármaco a largo plazo puede ofrecer una interpretación más detallada de los efectos de la exposición al fármaco en el funcionamiento afectivo.

Autoadministración de drogas y la vocalización ultrasónica (USV) se utilizan como la evaluación del comportamiento en la investigación con animales, pero rara vez en combinación. El propósito de este artículo es describir las ventajas de la grabación USVs durante la administración de medicamentos auto-procedimientos para evaluar las respuestas afectivas a la experiencia de la droga.

Evaluación de las vocalizaciones de ultrasonidos durante autoadministración de drogas en ratas

Los procedimientos de autoadministración de fármacos se utilizan habitualmente para estudiar los cambios conductuales y neuroquímicos asociados con el abuso de drogas, la adicción y...

Este video demuestra un procedimiento para evaluar los efectos de la cocaína sobre las vocalizaciones ultrasónicas o USB. Durante la automedicación con drogas en ratas, se colocan ratas entrenadas en una cámara de automedicación donde presionan una palanca para recibir una recompensa de cocaína y se registran las USB en tiempo real. El archivo de sonido creado se convierte en un espectrograma, lo que permite que las USB registradas sean visibles y audibles para los experimentadores humanos.Los USB de rata se diferencian luego del ruido de fondo y se exportan a un archivo de Excel los parámetros individuales de los USB confirmados. De este modo, los USB pueden utilizarse como medidas en tiempo real de la respuesta emocional de la rata durante la automedicación con fármacos. Hola, soy Esta Meyer del laboratorio de la Dra. Christine Hel, en la división de farmacología o toxicología de la Facultad de Farmacia de la Universidad de Texas en Austin.Hoy les mostraremos el procedimiento para evaluar las vocalizaciones ultrasónicas de ratas durante la automedicación con fármacos. Utilizamos este procedimiento en el laboratorio para estudiar los efectos de la cocaína sobre las vocalizaciones de las ratas. Así que comencemos.El primer paso preparatorio para realizar experimentos combinados de automedicación con fármacos y vocalizaciones ultrasónicas, o USV, consiste en entrenar a las ratas para que presionen una palanca a cambio de una recompensa alimenticia. Una vez entrenadas, las ratas se someten a una intervención quirúrgica de cateterización yugular que permite la automedicación con fármacos. El aparato utilizado para la automedicación con fármacos consiste en una cámara operante con una sola palanca, equipada con luces ambientales y de estímulo, y tres conjuntos de haces fotoeléctricos.La cámara operante está ubicada dentro de una cámara atenuadora de sonido más grande para limitar el ruido y la luz externos. Los micrófonos ultrasónicos USPS se montan firmemente en el centro de las cámaras operantes. Los micrófonos están conectados a un hardware de adquisición de datos situado fuera de la cámara operante, y las grabaciones se recopilan en un sistema informático PC mediante software grabador de múltiples canales. Las respuestas conductuales del animal se registran utilizando un ordenador Med Pentium equipado con el software med PC; los programas med PC y el grabador suave AVA deben cargarse y estar listos antes de colocar a los animales en las cámaras operantes.En el menú de Med PC, cargue el procedimiento experimental para las ratas en sus cámaras operantes asignadas para iniciar el programa. Simultáneamente con la grabación de USV, el comando stark debe estar listo para ser emitido. Ahora los micrófonos deben asociarse con las ratas en sus cámaras operantes asignadas en la computadora de grabación de micrófonos, bajo la configuración del software grabador AVA, etiquetando el canal según los animales, estableciendo los vínculos de los intervalos de grabación y definiendo la tecla del teclado para iniciar o detener la grabación en el canal individual.Con todo preparado, veamos cómo realizar una sesión de grabación. Para comenzar una sesión de grabación, retire suavemente al animal de su jaula de alojamiento y lave el catéter intravenoso permanente con 0,05 mililitros de una solución salina heparinizada para detectar posibles disfunciones del catéter. A continuación, conecte al animal a un conmutador giratorio montado en la cámara operante que permite la administración de fármaco o vehículo durante las sesiones de automedicación.Ahora coloque suavemente al animal en la cámara de operación y cierre las puertas en silencio. Una vez que las puertas estén cerradas, comience la grabación. Dado que el programa de automedicación con fármacos y el software de grabación USB se encuentran en dos sistemas informáticos separados, es necesario iniciarlos simultáneamente.Si los sistemas informáticos están ubicados cerca uno del otro, esto puede realizarse por un solo experimentador. Los USPS individuales se registran y marcan con una marca de tiempo de forma continua durante toda la sesión. El programa Med PC que controla y registra los eventos dentro de la cámara operante puede configurarse según cualquier especificación para los primeros 10 minutos de cada sesión.Las ratas ocupan una cámara oscurecida sin acceso a la palanca. Después de exactamente 10 minutos, se enciende la luz de la cámara y la palanca se extiende hacia el interior de la cámara, indicando la disponibilidad de cocaína o vehículo. Tras cada respuesta en la palanca, esta se retrae mientras se administra la droga o el vehículo y la luz estímulo situada encima de la palanca se ilumina durante la duración de la infusión de la droga.Después de 20 segundos, la palanca se extiende nuevamente hacia la cámara, indicando la disponibilidad de la droga. La sesión continúa de esta manera durante la duración deseada. Para este experimento, se programó que la autominiestración de la droga estuviera disponible durante 60 minutos.Al final de la sesión, las luces dentro de la cámara se apagan. La palanca se retrae y ya no hay disponibilidad de la droga al finalizar la sesión de automedicación. El programa de grabación USB debe finalizarse manualmente en el sistema informático dedicado a la grabación USB.Después de finalizar las sesiones de automedicación con fármacos y de grabación USB, retire suavemente al animal de la cámara operante, desconéctelo del conmutador giratorio y lave el catéter intravenoso con 0,05 mililitros de solución salina heparinizada para eliminar cualquier residuo de fármaco del catéter. El siguiente paso consiste en comenzar a analizar los datos. El análisis USB debe realizarse cuidadosamente para garantizar la precisión.El software de análisis SaaS lab pro convierte el archivo de onda de puntos en un espectrograma que permite que las US de los VS grabadas sean visibles y audibles para los experimentadores humanos. El espectrograma resultante puede modificarse según las preferencias individuales utilizando los ajustes de configuración disponibles. Los sonidos grabados se muestran en el rango de cero a 100 kilohercios, incluidas las US de los ratones.Y el ruido de fondo generado por el ventilador en la cámara atenuadora del sonido. Para filtrar este ruido de fondo, ajuste el paso alto del espectrograma a 10 kilohercios o más, ya que la mayor parte de este ruido se encuentra en el rango de cero a 10 kilohercios. Ahora active las mediciones automáticas y todos los sonidos por encima de la frecuencia de corte serán detectados automáticamente por el software AVA Soft.Utilice la herramienta para eliminar los espacios entre los elementos detectados del archivo de sonido. Se pueden borrar todas las partes del archivo dot wav original sin sonido. Ahora se puede guardar el archivo dot wav acortado y se puede utilizar un espectrograma nuevo más corto para un análisis más rápido.Dado que tanto el ruido de fondo como los USV de rata son detectados por el software, es necesario escuchar los sonidos detectados durante la evaluación. Para verificar y diferenciar los USV de rata del ruido de fondo, el ruido de fondo identificado debe eliminarse manualmente del espectrograma. La ventana de mediciones de parámetros automáticos ofrece una selección de mediciones.Por ejemplo, duración del tiempo, ancho de banda, frecuencia y amplitud. Para la USV individual que puede transferirse a un archivo de Excel tras el análisis, con el fin de exportar únicamente las USV confirmadas de rata a un archivo de Excel, debe actualizarse la lista de sonidos detectados generada por la ventana de mediciones automáticas de parámetros. Tras la evaluación, la lista creada puede exportarse a un archivo de Excel mediante la herramienta de exportación, seleccionando copiar encabezados de mediciones de parámetros y copiar valores de mediciones de parámetros para todo el archivo.El archivo de Excel creado contiene información sobre las propiedades de los USB y, lo más importante para este experimento, los momentos exactos en que se emitieron los USB. Esto permite correlacionar los USB con el instante preciso antes y después de que se administre la droga. De este modo, los USB pueden utilizarse como mediciones en tiempo real de la respuesta emocional de la rata en momentos específicos durante el procedimiento experimental.Se muestra aquí un espectrograma de una USV de 22 kilohercios. Las llamadas largas de 22 kilohercios son provocadas en conjunto con estímulos aversivos y se cree que reflejan un estado emocional negativo. Este espectrograma muestra USBs de 50 kilohercios, cortos, planos y modulados en frecuencia, provocados durante la anticipación y la autominiistración de cocaína.Están asociados con un efecto positivo. Se muestran aquí USB reales de 50 kilohercios en tiempo real. El gráfico representa USB provocados antes y después de inyecciones de autoadministración de cocaína en una rata representativa.En el día cinco de las sesiones de autominicistración de cocaína, antes de la disponibilidad de cocaína, se elicitaron conductas USB anticipatorias a la cocaína. Y durante la autominicistración, se emitieron conductas USB inducidas por la cocaína. Acabamos de mostrarle cómo registrar y evaluar las conductas USB rojas frente a.Provocado durante sesiones de autominicistración de cocaína. Al realizar este procedimiento, es importante recordar configurar correctamente los programas para que puedan iniciarse simultáneamente y ejecutarse sin errores. Eso es todo.Gracias por ver este video y mucha suerte con sus experimentos.

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