Name: El uso de diacetato de carboxifluoresceína Ester succinimidil (CFSE) para controlar la proliferación de linfocitos (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2010-10-12T17:00:00.000+00:00
Duration: 4 min 10 s
Description: Aprende a marcar linfocitos con CFSE para monitorear su proliferación mediante citometría de flujo. Este método permite rastrear divisiones celulares en respuestas inmunitarias in vitro e in vivo.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

El trabajo presentado en este artículo fue apoyado por un Nacional de Salud y Consejo de Investigación Médica (NHMRC) de Australia Grant Program (CRP) y un proyecto NHMRC Grant (CRP y BJCQ). También BJCQ es un NHMRC Peter Doherty Postdoctoral Fellow.

1) El reactivo de configuración 1.1) CFSE solución madre El tinte CFSE se compra como diacetato de carboxifluoresceína éster de succinimidilo (CFDA, SE) (MW 557,47 g / mol), por lo general en viales de 25 mg. Disolver la dosis de 25 mg en 8,96 ml de DMSO para una solución de reserva final de 5 mM (50-100 almacenar alícuotas a -20 ° C durante varios meses). CFDA, SE va a reaccionar con una solución acuosa por lo que es fundamental que dicha exposición evitarse durante el almacenamiento. 1.2) Los linfocitos Aislar linfocitos de bazo y los ganglios linfáticos o de los ratones y resuspender en 1 ml de medio de cultivo (por ejemplo RPMI) con 5% inactivado por calor (HI) de suero fetal bovino (FCS), con una concentración celular de 0,5 x 10 06 al 10 x 10 7 / ml. 2) CFSE etiquetado 2.1) de rutina método: <ol class="lalpha"><li> Bien volver a suspender las células en el volumen de 1 ml de medio y colocar cuidadosamente en el fondo de un fresco (no mojado) tubo cónico de 10 ml. </li><li> Coloque el tubo en posición horizontal (utilizando un tubo que no impedirá que el contacto con el medio 1 ml de células de suspensión de movimiento y mezcla antes de tiempo con el CFDA soluciones, SE). </li><li> Añadir con cuidado 110 l de PBS a la porción no-en contacto con el plástico en la parte superior del tubo de modo que no pueda hacer contacto con la solución de células. </li><li> Resuspender 1,1 l de la población de 5 mm de CFDA, SE en el PBS 110 mL. </li><li> Rápidamente tapar el tubo e invierta y agite bien para conseguir uniformes rápida mezcla de las soluciones. Tenga en cuenta que el tinte CFSE se encuentra en una concentración final de 5 mM, sin embargo, la concentración óptima puede tener que ser determinado para cada lote preparado, y luego cada 6 meses para asegurar que sea efectivo. </li><li> Se incuban las células durante 5 minutos a temperatura ambiente. Tenga en cuenta que la conversión de la CFDA, SE CFSE (véase la discusión) se convierte en el tinte fluorescente y por tanto, susceptibles de alterarse por la exposición excesiva a la luz. Por lo tanto, es recomendable proteger el tubo de la luz a partir de ahora, por ejemplo, cubriéndola con papel de aluminio. </li><li> Lavar las células mediante la dilución en 10 volúmenes de 20 ° C PBS con 5% FCS HI, sedimentación por centrifugación a 300 xg durante 5 min a 20 º C y desechar el sobrenadante. Repetir el lavado dos veces más. </li></ol> 2.2) Método alternativo, que también es apropiado para el número de células más alta (10 - 30 x 10 7): <ol class="lalpha"><li> Preparar un 2 x (10 M) CFDA, la solución de la SE por la adición de 2 l de la población de 5 mM a 1 ml de PBS y añadir rápidamente esta a 1 ml de células resuspendidas a fondo, y rápidamente se tapa el tubo e invierta y agite bien para conseguir uniforme de la mezcla rápida. </li><li> Se incuban las células durante 5 minutos a temperatura ambiente y se lava como en los pasos 2.1 (f) y 2.1 (g). </li></ol> 2.3) Las células se pueden aplicar a un protocolo de interés para la inducción de la división celular. Células marcadas se pueden utilizar en los estudios in vitro y en ensayos in vivo. 2.4) A la finalización del ensayo de proliferación, las células se recogen y se analizan por citometría de flujo (ver más abajo para los ejemplos representativos). 3) Resultados de Representante Para evaluar la proliferación de linfocitos por dilución CFSE, es útil conocer la fluorescencia de las células indivisas (es decir, el máximo de fluorescencia) y no marcado células (fluorescencia es decir, como mínimo). Por lo tanto, el diseño experimental debe tomar en cuenta estos controles. A continuación se muestran ejemplos de ensayos in vitro y en ensayos in vivo utilizando CFSE para medir CD8 + división de las células T por citometría de flujo. 3.1) En la estimulación in vitro La figura 1 muestra los perfiles de los CFSE CFSE marcado con ovoalbúmina (OVA) específicos de las células T CD8 + receptor transgénicos OT-I las células T después de la cultura 3 días con células dendríticas pulsadas con diversas cantidades de OVA. Células T CD8 + purificados de los ganglios linfáticos y el bazo de los ratones OT-I fueron marcadas con CFSE y 1 x 10 5 células en cultivo con 3,3 x 10 4 DC. DC, donde pulsada con OVA durante 1 hora a 37 º C y lavado dos veces antes de la cultura. Después de 3 días, las células donde se cosechan y se marcaron con anti-CD8-APC anticuerpos y Hoechst 33258 y luego analizadas por citometría de flujo (50.000 eventos recopilados). Live (Hoechst 33258 -) las células CD8 + se muestran. Como los controles, las células CD8 + T cultivadas solas, muestra la intensidad de la CFSE no dividen las células, mientras que las células no llevan la etiqueta muestra la autofluorescencia de las células y los límites de las divisiones celulares detectables. Tenga en cuenta que cuatro picos CFSE se puede ver en cada uno de los paneles en este ejemplo, lo que indica que las células han sido sometidos a un máximo de 3 divisiones. 3.2) En la estimulación in vivo La figura 2 muestra los perfiles de la CFSE CFSE marcado con OVA-específico de los receptores de células T CD8 + transgénicos OT-I las células T después de 3 días en vivo in la presencia de OVA 20 mg. Células T CD8 + purificados de los ganglios linfáticos y el bazo de CD45.1 congenic OT-I ratones fueron marcadas con CFSE y 5 x 10 6 células inyectadas iv en la vena lateral de la cola de C56BL/6J (CD45.2 +) ratones. Después de 2 horas los ratones fueron inyectados iv con 20 mg de OVA. Después de 3 días, el bazo de los ratones han sido recogidos, hecho en una única suspensión de células, etiquetados con anti-B220-PerCP, anti-CD8-APC-Cy7 y anti-CD45.1-PE-Cy7 anticuerpos y Hoechst 33258 y se analizan por citometría de flujo (1.000.000 sucesos recogidos). Live (Hoechst 33258 -) B220-las células se muestran en el panel de la izquierda y cerrado CD8 + células CD45.1 + muestra en el panel derecho. Como controles, sin estimular CFSE marcado con células T CD8 +, muestra la intensidad de la CFSE no dividen las células, mientras que los no etiquetados células muestra la autofluorescencia de las células y los límites de las divisiones celulares detectables. Tenga en cuenta que el uso de la diferencia CD45 alotípicos es vital en la resolución del transferido células T CD8 + de acogida, ya que son un subconjunto menor de edad del total de células T CD8 + (panel izquierdo). Tenga en cuenta que la mayoría de las células caen dentro de los 7 picos CFSE en este ejemplo (panel derecho), lo que indica que las células han sido sometidos a un máximo de 6 divisiones. <img src="/files/ftp_upload/2259/2259fig1.jpg" alt="Figura 1" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Figura 1"> Figura 1. Capacidad de los CFSE marcado con ovoalbúmina (OVA) específicos de las células T del receptor de transgénicos CD8 + OT-I las células T para responder in vitro para DC pulsado con diferentes concentraciones de OVA, los datos muestran que después de 3 días de cultivo. Tenga en cuenta que no divide la población de linfocitos T CD8 + las células en ausencia de antígeno (la luz histograma gris) y auto-fluorescencia de la población no etiquetados (histograma de color gris oscuro). La figura muestra células T CD8 + que han dividido a 1-3 veces sobre la base de los picos de dilución CFSE, constituido por células T que divide a las concentraciones de antígeno superior. <img src="/files/ftp_upload/2259/2259fig2.jpg" alt="Figura 2" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Figura 2"> Figura 2. Capacidad de los CFSE marcado con ovoalbúmina (OVA) específicos de las células T del receptor de transgénicos CD8 + OT-I las células T, cuando adoptively transferido en ratones C57BL / 6 para responder a OVA, datos que se muestran tres días después de la transferencia adoptiva Panel izquierdo:. CD8 +, CD45. 1 + OT-1 de células T en ratones receptores. Panel de la derecha: el perfil de CFSE proliferación. Tenga en cuenta que no divide la población de células T CD8 + en los ratones receptores no reciben el antígeno (la luz histograma gris) y auto-fluorescencia de los no etiquetados linfocitos (histograma de color gris oscuro). La figura muestra las células CD8 + T que han dividido a 1.6 veces sobre la base de los picos de dilución CFSE. <img src="/files/ftp_upload/2259/2259fig3.jpg" alt="Figura 3" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Figura 3"> Figura 3. Una representación de los diversos eventos moleculares que ocurren durante el etiquetado de las células de diacetato de carboxifluoresceína éster de succinimidilo (CFDA, SE). Para más detalles sobre el proceso de ver el texto de discusión. Nota: "CFSE" El acrónimo genérico, no CFDA, SE, se utiliza para describir el reactivo de marcaje y el procedimiento de etiquetado en general. Figura basada en la parroquia 4.

<ol><li>Lyons, A. B., Parish, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Determination+of+lymphocyte+division+by+flow+cytometry%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Immunol.+Methods%22%5BJournal%5D)">Determination of lymphocyte division by flow cytometry.</a> J. Immunol. Methods. 171, 131-137 (1994).</li>
<li>Parish, C. R., Glidden, M. H., Quah, B. J., Warren, H. S. Use of the intracellular fluorescent dye CFSE to monitor lymphocyte migration and proliferation. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aParish%2C+CR+%22Current+protocols+in+immunology%22">Current protocols in immunology</a>. Coligan, J. E. , (2009).</li>
<li>Quah, B. J., Warren, H. S., Parish, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Monitoring+lymphocyte+proliferation+in+vitro+and+in+vivo+with+the+intracellular+fluorescent+dye+carboxyfluorescein+diacetate+succinimidyl+ester%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Protocols%22%5BJournal%5D)">Monitoring lymphocyte proliferation in vitro and in vivo with the intracellular fluorescent dye carboxyfluorescein diacetate succinimidyl ester.</a> Nature Protocols. 2, 2049-2056 (2007).</li>
<li>Parish, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fluorescent+dyes+for+lymphocyte+migration+and+proliferation+studies%5BTitle%5D)+AND+%22Immunol+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Fluorescent dyes for lymphocyte migration and proliferation studies.</a> Immunol Cell Biol. 77, 499-508 (1999).</li>
</ol>

Con el fin de apreciar cómo funciona y por qué CFSE etiquetado uniforme, rápido se requiere para su uso en el análisis de la proliferación, es útil para entender la base molecular de la CFSE etiquetado de la célula. Esto puede ser dividido en dos fases, 1) entrada de celda y 2) el etiquetado de proteínas (Figura 3). 1) entrada a la célula: la entrada del colorante en la célula es mediado por la forma diacetilados del colorante, diacetato de carboxifluoresceína succinimidil éster (CFDA, SE). Los acetatos que el colorante permeable membrana que permite su flujo muy rápido a través de la membrana plasmática. Esterasas, presentes en la célula, unirá los acetatos de CFDA, SE y por lo tanto dar lugar a la forma de la CFSE tinte que es mucho menos permeable la membrana, lo que se concentra el medio de contraste dentro de la célula. 2) El etiquetado de proteínas: Mientras tanto CFDA, SE y CFSE han amino-reactiva cadenas laterales succinimidilo, sólo la CFSE es fluorescente. La alta concentración intracelular de la CFSE facilita el etiquetado rápido y de alto nivel intracelular de proteínas. CFSE etiquetado de las células debe realizarse rápidamente a fin de obtener una población homogénea de células etiquetadas, lo cual es fundamental para la resolución de las células que han sufrido varias divisiones como se muestra en los resultados representativos (Figura 1 y 2).

<table><tbody><tr><td>CFDA,SE</td><td>Molecular Probes, Life Technologies</td><td></td><td></td></tr><tr><td>DMSO</td><td>Cambridge Isotope Laboratories</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Linfocitos</td><td>por ejemplo, ratón o humano</td><td></td><td></td></tr><tr><td>RPMI</td><td>GIBCO, por Life Technologies</td><td></td><td></td></tr><tr><td>FCS</td><td>SAFC Global</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Tubos cónicos de 10-15 ml</td><td>Falcon BD</td><td></td><td></td></tr><tr><td>PBS</td><td>GIBCO, por Life Technologies</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Foil de aluminio</td><td>Capral Aluminium</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Vórtex</td><td>Scientific Industries Inc.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Centrífuga</td><td>Eppendorf</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Citómetro de flujo</td><td>BD Biosciences</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

el uso de diacetato de carboxifluoresceína ester succinimidil (cfse) para controlar la proliferación de linfocitos

The Use of Carboxyfluorescein Diacetate Succinimidyl Ester (CFSE) to Monitor Lymphocyte Proliferation

Carboxifluoresceína succinimidil ester (CFSE) es un medio eficaz y popular para controlar la división de linfocitos 1-3. CFSE etiquetas covalentemente moléculas de larga vida intracelular con el colorante fluorescente, carboxifluoresceína. Por lo tanto, cuando una célula se divide CFSE marcado, todos sus descendientes están dotados de la mitad del número de carboxifluoresceína etiquetados con las moléculas y por lo tanto cada división celular se puede evaluar midiendo la correspondiente disminución de la fluorescencia celular mediante citometría de flujo. La capacidad de la CFSE para etiquetar las poblaciones de linfocitos, con una alta intensidad de fluorescencia de la varianza excepcionalmente bajo, unido a su baja toxicidad celular, lo convierten en un medio de contraste ideal para medir la división celular. Ya que es un colorante de fluoresceína basado también es compatible con una amplia gama de fluorocromos otros por lo que es aplicable a la citometría de flujo multi-color. En este artículo se describen los procedimientos normalmente utilizados para el etiquetado de linfocitos de ratón con el propósito de monitorear hasta ocho divisiones celulares. Estas células marcadas se pueden utilizar tanto para la in vitro e in vivo.

CFSE etiquetas covalentemente moléculas de larga vida intracelular con el colorante fluorescente, carboxifluoresceína. Por lo tanto, cuando una célula se divide CFSE marcado, todos sus descendientes tienen la mitad de la cantidad de fluorescencia, que de ese modo se puede utilizar para evaluar la división celular. En este artículo se describen los procedimientos normalmente utilizados para el etiquetado de linfocitos de ratón con CFSE.

El uso de diacetato de carboxifluoresceína Ester succinimidil (CFSE) para controlar la proliferación de linfocitos

El éster succinimidílico de carboxifluoresceína (CFSE) es un medio eficaz y popular para monitorizar la división de los linfocitos1-3. El CFSE marca covalentemente [las células] de vida larga...

El objetivo general de este experimento es marcar los linfocitos con el colorante fluorescente intracelular CFSE, de modo que se pueda monitorear la división celular de los linfocitos mediante citometría de flujo. Esto se logra mezclando los linfocitos con CFDA se, que es la forma diacetilada del CFSE. Los dos grupos acetilo permiten que el colorante entre rápidamente en las células dentro de los linfocitos.Las esterasas eliminan los grupos acetilo del C-F-D-A-S-E, formando la forma CFSE del colorante. Sin los grupos acetilo, el CFSE se vuelve fluorescente y también es menos permeable a la membrana, lo que concentra el colorante dentro de las células. Luego, la cadena lateral reactiva con amino AL del CFSE se enlaza covalentemente al colorante con proteínas intracelulares, haciendo que las células sean casi permanentemente fluorescentes.El CFSE puede utilizarse para monitorear la división de linfocitos basándose en la disminución secuencial de la intensidad de fluorescencia de las células hijas. La principal ventaja de esta técnica frente a métodos existentes, como la incorporación de timidina tritiada, es que se pueden monitorear células individuales durante la división celular. Para demostrar el procedimiento, estará Ben Qua, un investigador asociado de mi laboratorio, con el fin de etiquetar las células.Comience con linfocitos recién aislados del bazo o de los ganglios linfáticos de ratones y agregue una concentración entre medio millón y 10 millones de células por mililitro de medio de cultivo, suplementado con 5 % de suero de ternero fetal inactivado por calor. Suspender bien las células y transferir cuidadosamente un mililitro al fondo de un tubo cónico nuevo de 10 mililitros. Coloque el tubo horizontalmente con cuidado.Añada 110 microlitros de PBS en la parte superior del tubo, en la sección no humedecida del plástico, asegurándose de que no entre en contacto con la solución celular. Añada una solución fresca de colorante compuesta por 1,1 microlitros del stock de cinco milimolar de C-F-D-A-S-E a los 110 microlitros de PBS. Tape rápidamente el tubo e inviértalo, luego vortexéelo bien para lograr una mezcla uniforme y rápida de las soluciones, ya que el colorante se vuelve fluorescente y, por lo tanto, propenso al blanqueo.Proteja el tubo de la luz cubriéndolo con papel de aluminio. Incube las células durante cinco minutos a temperatura ambiente, lave las células diluyendo en 10 volúmenes de PBS a 20 grados Celsius que contenga 5 % H-I-F-C-S, sedimentando por centrifugación a 300 Gs durante cinco minutos a 20 grados Celsius y descartando el sobrenadante. Repita el lavado otras dos veces.A continuación, las células pueden aplicarse a un protocolo de interés para la inducción de la división celular. Las células marcadas pueden utilizarse en ensayos tanto in vitro como in vivo. Al finalizar el ensayo de proliferación, las células se recolectan y analizan mediante citometría de flujo.En este ejemplo, la marcación con CFSE se utiliza in vitro para medir cómo las células T de ratones transgénicos modificados genéticamente responden a células dendríticas pulsadas con diferentes concentraciones de antígeno. Los picos de dilución de CFSE sin sombrear muestran células T transgénicas positivas para CD8 que se han dividido de una a tres veces. Puede observarse que un mayor número de células T se divide a concentraciones más altas del antígeno.El método de marcado con CFSE también es adecuado para ensayos in vivo, como experimentos de transferencia adoptiva. Aquí se utiliza fax para identificar la población de linfocitos T que son de interés en los ratones receptores. Un perfil posterior de proliferación con CFSE muestra linfocitos T positivos para CD8 que se han dividido de una a seis veces, según los picos de dilución del CFSE tras su desarrollo.Este procedimiento allanó el camino para que investigadores e inmunólogos exploraran la proliferación de linfocitos durante una respuesta inmunitaria.

the-use-carboxyfluorescein-diacetate-succinimidyl-ester-cfse-to

Research

Investigación

JoVE Journal

Immunology and Infection

Inmunología e Infección

Muchas infecciones provocan una respuesta CTL fuerte, pero de vez en cuando, la cantidad de células de respuesta no se correlaciona con el control del...

Antígeno Específico de la En Vivo Matar ensayo utilizando CFSE células diana marcadas

Este protocolo de video demuestra la aplicación de el colorante fluorescente carboxifluoresceína succinimidil éster (CFSE) para la identificación y separación de los diferentes sub-poblaciones de células de glioblastoma humano en base de la frecuencia de la división celular.

La identificación y aislamiento de Slow división de las células de glioblastoma humano utilizando carboxi fluoresceína Succinimidyl Ester (CFSE)

El video muestra un ensayo basado en citometría de flujo para analizar la inmunodominancia en linfocitos T citotóxicos o respuestas CTL. Las células diana fluorescentes inyectadas exhiben una fluorescencia variable correspondiente a epítopos inmunogénicos. La recolección y clasificación posterior al bazo revela una reducción de las células fluorescentes de alta intensidad, lo que confirma la inmunodominancia en las respuestas a CTL.

Ensayo para evaluar la inmunodominancia en las respuestas citotóxicas de los linfocitos T

Este video muestra un ensayo in vitro para explorar la influencia inmunomoduladora de las células madre mesenquimales (MSC) en la proliferación de células T efectoras. El ensayo incluye el cocultivo de MSC con PBMC para inducir a la población de monocitos a adquirir un fenotipo inmunomodulador, lo que conduce a la secreción de interleucina-10 (IL-10). Después de la incubación con linfocitos T CD4+ activados, los monocitos inducidos suprimen eficazmente la proliferación de linfocitos T.

Ensayo in vitro para evaluar el impacto inmunomodulador de los monocitos en la proliferación de leucocitos

La capacidad de controlar las respuestas de células T en detalle en vivo es importante para el desarrollo de nuestra comprensión de la respuesta inmune. Aquí se describe el uso de conjuntos de blancos fluorescentes (TLC) en un ensayo in vivo de células T en el que evalúa&gt; 250 parámetros simultáneamente por citometría de flujo.

El uso de fluorescentes Arrays objetivo para la evaluación de las respuestas de células T<em&gt; En vivo</em

Los macrófagos son células plásticas del sistema hematopoyético que tienen un papel crucial en la inmunidad protectora y la homeostasis. En este informe se describen las técnicas in vitro optimizadas para caracterizar fenotípicamente y funcionalmente los macrófagos reguladores infiltrantes del injerto que se acumulan en el órgano trasplantado bajo condiciones tolerógenas.

Caracterización funcional de macrófagos reguladores que inhiben la inmunidad reactiva al injerto

Los linfocitos son los principales actores en las respuestas inmunitarias adaptativas. En este trabajo se presenta un protocolo de purificación de linfocitos para determinar las funciones fisiológicas de las moléculas deseadas en la activación de linfocitos in vitro e in vivo. Los procedimientos experimentales descritos son adecuados para comparar las capacidades funcionales entre linfocitos control y modificados genéticamente.

Aislamiento y activación de los linfocitos murinos

Las imágenes de células vivas de las células sanguíneas etiquetadas en la circulación ocular pueden proporcionar información sobre la inflamación y la isquemia en la retinopatía diabética y la degeneración macular relacionada con la edad. Se describe un protocolo para etiquetar células sanguíneas e imágenes de las células marcadas en la circulación retiniana.

Etiquetado de colorantes fluorescentes de eritrocitos y leucocitos para estudiar la dinámica de flujo en la circulación de la retina del ratón

Aquí se presenta un protocolo para medir las células CD4+ T proliferantes en respuesta a proteínas antigénicas o péptidos mediante dilución de tinte. Este ensayo es particularmente sensible a las células T específicas del antígeno poco frecuente y se puede modificar para facilitar la clonación de células específicas del antígeno.

Cuantificación de células CD4+ T específicas de antígenos humanos que utilizan éster de succinidilo de carboxifluoresceína

Un protocolo para evaluar la destrucción cuantitativa de células tumorales por células Jurkat que expresan el receptor de antígeno quimérico (CAR) dirigido a un solo antígeno tumoral. Este protocolo se puede utilizar como plataforma de cribado para la optimización rápida de las construcciones de bisagras de CAR antes de la confirmación en células T derivadas de sangre periférica.

Evaluación rápida de la citotoxicidad in vitro del receptor de antígeno quimérico que expresa jurkat mediante imágenes fluorescentes

Aprende a marcar linfocitos con CFSE para monitorear su proliferación mediante citometría de flujo. Este método permite rastrear divisiones celulares en respuestas inmunitarias in vitro e in vivo.

El uso de diacetato de carboxifluoresceína Ester succinimidil (CFSE) para controlar la proliferación de linfocitos

Explorar más videos