November 10th, 2010
En este protocolo se describe un método de aprendizaje operante con estímulos sensoriales como un refuerzo en el ratón. Que no requiere formación previa o la restricción de alimentos, y que permite el estudio de la conducta motivada, sin el uso de un reforzador farmacológico o naturales, tales como los alimentos.
El objetivo general de este procedimiento es estudiar el comportamiento motivado en ratones entrenándolos para realizar una respuesta operante para un reforzador sensorial. Esto se logra escribiendo un programa para entregar estímulos sensoriales variables. Cuando el animal realiza una tarea operante, es muy importante que los animales se mantengan tranquilos durante la manipulación, por lo que el experimentador debe habituar a los ratones antes de la prueba.
Una vez que los ratones están habituados, el siguiente paso es realizar sesiones diarias de prueba operante en una proporción fija de un horario. Finalmente, el programa de refuerzo se puede avanzar a un programa diferente, como pruebas de relación progresiva, razón aleatoria o relación de intervalo variable. El esquema de búsqueda de sensaciones operantes se puede utilizar para mostrar cambios en la respuesta operante como resultado de una manipulación genética o farmacológica.
La principal ventaja de esta técnica frente a los métodos existentes, como la autoadministración intravenosa de fármacos en ratón, es que no requiere formación quirúrgica ni restricción alimentaria. Además de proporcionar información sobre el comportamiento motivado. La búsqueda de sensaciones operante también se puede aplicar a sistemas como la adicción a las drogas.
Antes de que el experimento pueda comenzar, los animales deben habituarse a la manipulación y el transporte. Experimentarán que la habitación se lleva a cabo durante un período de tres días. Después de que los ratones se hayan aclimatado a la instalación de animales en el primer día de habituación, coloque las manos enguantadas en la jaula y déjelas reposar durante 90 segundos.
Si ninguno de los ratones ha investigado sus manos en ese tiempo, mueva suavemente las manos hacia cada ratón y espere a que olfateen o entren en contacto con sus manos antes de continuar. A continuación, levante con cuidado cada ratón por la base de la cola y colóquelo en su mano. Levanta rápidamente la mano y vuelve a bajarla para permitir que el ratón se aleje de ella y regrese a la jaula.
Repita esta maniobra para cada ratón. Dependiendo de su comportamiento, es posible que se necesiten de cinco a 10 repeticiones hasta que el ratón permanezca tranquilo. La última vez, levante la mano más alto y mantenga presionado el mouse durante cinco segundos.
El ratón debe permanecer en la mano todo el tiempo para cumplir con los criterios del día. Repita este procedimiento para cada jaula, cambiando los guantes entre jaulas el primer día de habituación. Regrese a las instalaciones al día siguiente para completar la segunda ronda de habitación.
Manipule cada ratón como el día anterior colocándolos en su mano y permitiéndoles volver a entrar en la jaula. El levantamiento final debe mantenerse durante 10 segundos. A continuación, coloca el animal en tu mano y acarícialo.
Su espalda. Además, a partir del segundo día, pese a cada animal y marque su cola con un rotulador para indicar el número de sujeto. En el tercer día de habituación, repita los pasos demostrados en los días uno y dos, sosteniendo el animal en alto en la mano durante 15 segundos. Para el levantamiento final, pesa cada ratón y observa sus colas.
Después de que todos los ratones hayan cumplido con sus criterios del día, están habituados y listos para las pruebas. Primero deberá escribir el programa que se utilizará para la búsqueda de sensaciones de ópera o el programa OSS. Sesiones de relación fija o FR de una hora de duración.
Las sesiones de relación progresiva o PR deben programarse para que duren dos. Extienda ambas palancas y contrarreste las palancas para determinar qué palanca se designa activa frente a inactiva en todos los animales. La asignación de la palanca para cada animal nunca cambia.
Codifique el programa para que los reforzadores auditivos y visuales sean variados. La duración de cada uno se elige al azar y dura 2, 4, 6 u ocho segundos. Las velocidades de destello de la lámpara también se eligen al azar y varían entre 0,6, 2, 5, 1, 0,25, 2,5 o cinco hercios, cada una con un ciclo de trabajo del 50%.
Los destellos de la lámpara de estímulo varían entre el lado izquierdo y derecho de la cámara. A continuación, programe un estímulo auditivo durante la duración del reforzador. Aquí, una bomba de infusión proporciona un sonido aproximadamente tres decibelios por encima del ruido de fondo en la cámara.
Asegúrese de que la cámara esté limpia y funcione correctamente antes de comenzar el experimento. Primero, lave la sartén inferior con agua caliente. A continuación, limpie la cámara operante, las paredes y los suelos con etanol al 30%.
Ejecute un programa de prueba que encienda el ventilador y las luces de la casa y del estímulo, así como que extienda y registre las presiones de la palanca. Una vez que se determine que todas las luces y ventiladores funcionan correctamente, pruebe el programa para asegurarse de que se registren todas las pulsaciones de palanca. Por último, las sesiones de ópera con palancas limpias con un 30% de etanol deben realizarse durante cinco o seis días a la semana a la misma hora todos los días.
En este ejemplo, los experimentos se llevan a cabo normalmente entre 800 y 1400 horas. Durante la fase oscura del ciclo de luz del animal, pesa cada ratón. Antes de realizar la prueba, cargue el programa para cada cámara y anote el experimento de manera adecuada.
Transporta cada ratón a su cámara designada, cierra la puerta e inicia la sesión. Una vez finalizada la sesión, retire rápidamente el mouse y observe la cola. Cámaras limpias Como se demostró anteriormente, analice los datos para el número de pulsaciones de palanca activas e inactivas.
También se puede informar el número de refuerzos y/o la precisión de la palanca. Todos los ratones deben cumplir con los criterios de adquisición si se van a evaluar el efecto de un tratamiento sobre el OSS: se deben obtener más de 20 prensas de palanca activas y más del 65% de prensas de palanca activas para las últimas tres sesiones de proporción fija antes de comenzar el tratamiento. Después de la adquisición de FR uno respondiendo, se puede cambiar el horario de refuerzo.
Por ejemplo, una relación fija más alta, una relación progresiva o una relación aleatoria. Aquí vemos un ejemplo de la adquisición de la conducta operante de búsqueda de sensaciones. En los ratones machos C 57, seis ratones negros J, los ratones OSS recibieron diversos estímulos visuales y auditivos después de cada palanca activa.
Mientras que las pulsaciones de palanca inactivas no tuvieron control de consecuencias, los ratones se sometieron a condiciones idénticas, excepto que no hubo consecuencias por presionar ninguna de las palancas. Con cada sesión sucesiva, la presión de la palanca activa por parte de los ratones OSS aumentó en relación con la palanca inactiva. Control de prensado.
Los ratones representados por las líneas grises no mostraron este aumento. En este ejemplo, un grupo de ratones recibió refuerzo de OSS. Mientras que otro grupo recibió un 10% como refuerzo alimentario cuando se le permitió el acceso a los alimentos, las tasas de respuesta para OSS y el refuerzo alimentario aumentaron de manera similar con el tiempo.
En el siguiente ejemplo, los ratones fueron avanzó a un programa de proporción progresiva de refuerzo durante cinco días. Los datos aquí presentados representan las medias de los valores de los días cuatro y cinco para cada animal. La relación final completada se informa en el eje Y a la derecha y se refiere al número de respuestas necesarias para obtener el reforzador correspondiente, como se demostró para la respuesta de relación fija.
Relación progresiva. Las tasas de respuesta fueron similares entre el OSS y los reforzadores alimentarios. Con este método, se puede comparar el efecto de una manipulación en dos tipos diferentes de refuerzo, sensorial y alimentario, sin las posibles confusiones resultantes del estado de hambre o las diferencias en la tasa de respuesta.
En conclusión, el comportamiento operante de búsqueda de sensaciones proporciona una herramienta única para estudiar los mecanismos moleculares que subyacen al refuerzo sensorial y, además, puede proporcionar una herramienta para estudiar la adicción a las drogas.
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Este protocolo describe un método para estudiar el comportamiento motivado en ratones utilizando estímulos sensoriales como refuerzos. Permite a los investigadores investigar el aprendizaje operante sin entrenamiento previo o restricción de alimentos.