Name: Supervisión efectiva de laboratorio integral y costo del VIH / SIDA: un modelo a seguir de África (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2010-10-31T17:00:00.000+00:00
Duration: 23 min 56 s
Description: Aprenda a implementar citometría de flujo para monitorear terapia antirretroviral en Sudáfrica. Este método integra ensayos de CD4, CD45 y carga viral para mejorar el diagnóstico en entornos con recursos limitados.

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Un agradecimiento especial para el Servicio Nacional de Salud Laboratorio (NHLS) de la República de Sudáfrica para la organización nacional de los servicios de flujo de diagnóstico del VIH relacionadas (http: \ \ www.nhls.ac.za y http://www.plgcd4 . net). Los estudios se han realizado destacados en el Departamento de Hematología y Medicina Molecular, Universidad de Witwatersrand (Johannesburgo, Sudáfrica, con el apoyo del Jefe de Departamento, el profesor Wendy Stevens). Los autores no han recibido subvenciones para la publicación de las sociedades comerciales o las agencias de financiamiento. Las opiniones expresadas son las de los autores no necesariamente reflejan las opiniones de las instituciones de la Universidad de Witwatersrand o el NHLS de Sudáfrica.

<ol><li>UNAIDS Report on the global HIV/AIDS epidemic. , Available from:
 <a target="_blank" href="http://www.unaids.org/en/ KnowledgeCentre/HIVData/GlobalReport/2008/2008_Global_report.asp">http://www.unaids.org/en/ KnowledgeCentre/HIVData/GlobalReport/2008/2008_Global_report.asp</a> (2008).</li>
<li>World Health Organization Rapid advice: Antiretroviral therapy for HIV infection in adults and adolescents. , Available from:
 <a target="_blank" href="http://www.who.int/hiv/pub/arv/rapid_advice_art.pdf">http://www.who.int/hiv/pub/arv/rapid_advice_art.pdf</a> (2009).</li>
<li>Mugyenyi, P. DART Trial Team. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Routine+versus+clinically+driven+laboratory+monitoring+of+HIV+antiretroviral+therapy+in+Africa+%28DART%29%3A+a+randomized+non-inferiority+trial%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Routine versus clinically driven laboratory monitoring of HIV antiretroviral therapy in Africa (DART): a randomized non-inferiority trial.</a> Lancet. 375, 123-131 (2009).</li>
<li>Donnell, D., Kiarie, J., Thomas, K., Baeten, J., Lingappa, J., Cohen, C., Celum, C. ART and risk of heterosexual HIV-1 transmission in HIV-1 serodiscordant African couples: A Multinational Prospective Study. 17th Conference on Retroviruses and Opportunistic Infections, , (2010).</li>
<li>Montaner, J., Wood, E., Kerr, T., Yip, B., Lima, V., Shannon, K., Harrigan, R., Hogg, R. Association of Expanded HAART Coverage with a Decrease in New HIV Diagnoses, Particularly among Injection Drug Users in British Columbia, Canada. 17th Conference on Retroviruses and Opportunistic Infections, , (2010).</li>
<li>Petti, C. A., Polage, C. R., Quinn, T. C., Ronald, A. R., Sande, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Laboratory+medicine+in+Africa%3A+a+barrier+to+effective+health+care%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Infect+Dis%22%5BJournal%5D)">Laboratory medicine in Africa: a barrier to effective health care.</a> Clin Infect Dis. 42, 377-382 (2006).</li>
<li>Brown, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Global+health%3A+Great+expectations%5BTitle%5D)+AND+%22BMJ%22%5BJournal%5D)">Global health: Great expectations.</a> BMJ. 334, 874-876 (2007).</li>
<li>Crisp, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Turning+the+World+Upside+Down%5BTitle%5D)+AND+%22Royal+Society+of+Medicine+Press%22%5BJournal%5D)">Turning the World Upside Down.</a> Royal Society of Medicine Press. , (2009).</li>
<li>Hecht, R., Bollinger, L., Stover, J., McGreevey, W., Muhib, F., Madavo, C. E., de Ferranti, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Critical+choices+in+financing+the+response+to+the+global+HIV%2FAIDS+pandemic%5BTitle%5D)+AND+%22Health+Aff%22%5BJournal%5D)">Critical choices in financing the response to the global HIV/AIDS pandemic.</a> Health Aff. 28, 1591-1605 (2009).</li>
<li>Lawrie, D., Coetzee, L. M., Glencross, D. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+model+for+continuous+quality+control+incorporating+sample-to+sample+assessment+of+optical+alignment%2C+fluorescence+sensitivity+and+volumetric+operation+fo+flow+cytometers%5BTitle%5D)+AND+%22Cytometry+B+Clin+Cytom%22%5BJournal%5D)">A model for continuous quality control incorporating sample-to sample assessment of optical alignment, fluorescence sensitivity and volumetric operation fo flow cytometers.</a> Cytometry B Clin Cytom. 78, 201-208 (2010).</li>
<li>Loken, M. R., Brosnan, J. M., Bach, B. A., Ault, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Establishing+optimal+lymphocyte+gates+for+immunophenotyping+by+flow+cytometry%5BTitle%5D)+AND+%22Cytometry%22%5BJournal%5D)">Establishing optimal lymphocyte gates for immunophenotyping by flow cytometry.</a> Cytometry. 11, 453-459 (1990).</li>
<li>Glencross, D., Scott, L. E., Jani, I. V., Barnett, D., Janossy, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CD45-assisted+PanLeucogating+for+accurate%2C+cost-effective+dual-platform+CD4%2B+T-cell+enumeration%5BTitle%5D)+AND+%22Cytometry%22%5BJournal%5D)">CD45-assisted PanLeucogating for accurate, cost-effective dual-platform CD4+ T-cell enumeration.</a> Cytometry. 50, 69-77 (2002).</li>
<li>Glencross, D. K., Janossy, G., Coetzee, L. M., Lawrie, D., Aggett, H. M., Scott, L. E., Sanne, I., McIntyre, J. A., Stevens, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Large-scale+affordable+PanLeucogated+CD4%2B+testing+with+proactive+internal+and+external+quality+assessment%3A+in+support+of+the+South+African+national+comprehensive+care%2C+treatment+and+management+programme+for+HIV+and+AIDS%5BTitle%5D)+AND+%22Cytometry+B+Clin+Cytom%22%5BJournal%5D)">Large-scale affordable PanLeucogated CD4+ testing with proactive internal and external quality assessment: in support of the South African national comprehensive care, treatment and management programme for HIV and AIDS.</a> Cytometry B Clin Cytom. 74, Suppl 1. S40-S51 (2008).</li>
<li>Dalgleish, A. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+CD4+%28T4%29+antigen+is+an+essential+component+of+the+receptor+for+the+AIDS+retrovirus%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">The CD4 (T4) antigen is an essential component of the receptor for the AIDS retrovirus.</a> Nature. 312, 763-767 (1984).</li>
<li>Liu, Z., Cumberland, W. G., Hultin, L. E., Prince, H. E., Detels, R., Giorgi, J. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Elevated+CD38+antigen+expression+on+CD8%2B+T+cells+is+a+stronger+marker+for+the+risk+of+chronic+HIV+disease+progression+to+AIDS+and+death+in+the+Multicenter+AIDS+Cohort+Study+than+CD4%2B+cell+count%5BTitle%5D)+AND+%22J+Acquir+Immune+Defic+Syndr+Hum+Retrovirol%22%5BJournal%5D)">Elevated CD38 antigen expression on CD8+ T cells is a stronger marker for the risk of chronic HIV disease progression to AIDS and death in the Multicenter AIDS Cohort Study than CD4+ cell count.</a> J Acquir Immune Defic Syndr Hum Retrovirol. 16, 83-92 (1997).</li>
<li>Glencross, D. K., Janossy, G., Coetzee, L. M., Lawrie, D., Scott, L. E., Sanne, I., McIntyre, J. A., Stevens, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CD8%2FCD38+activation+yields+important+clinical+information+of+effective+antiretroviral+therapy%3A+findings+from+the+first+year+of+the+CIPRA-SA+cohort%5BTitle%5D)+AND+%22Cytometry+B+Clin+Cytom%22%5BJournal%5D)">CD8/CD38 activation yields important clinical information of effective antiretroviral therapy: findings from the first year of the CIPRA-SA cohort.</a> Cytometry B Clin Cytom. 74, Suppl 1. S131-S140 (2008).</li>
<li>Coetzee, L. M., Tay, S. S., Lawrie, D., Janossy, G., Glencross, D. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((From+research+tool+to+routine+test%3A+CD38+monitoring+in+HIV+patients%5BTitle%5D)+AND+%22Cytometry+B+Clin+Cytom%22%5BJournal%5D)">From research tool to routine test: CD38 monitoring in HIV patients.</a> Cytometry B Clin Cytom. 76, 375-384 (2009).</li>
<li>Larsen, C. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+fragile+environments+of+inexpensive+CD4%2B+T-cell+enumeration+in+the+least+developed+countries%3A+strategies+for+accessible+support%5BTitle%5D)+AND+%22Cytometry+B+Clin+Cytom%22%5BJournal%5D)">The fragile environments of inexpensive CD4+ T-cell enumeration in the least developed countries: strategies for accessible support.</a> Cytometry B Clin Cytom. 74, Suppl 1. S107-S116 (2008).</li>
<li>Glencross, D. K., Coetzee, L. M., Lawrie, D., Sanne, I., McIntyre, J. A., Janossy, G., Stevens, W. Longitudinal monitoring of CD38 activation can obviate costly viral load testing in 60% of patients on ART. 11th IUSTI World Congress, , (2009).</li>
<li>Bergeron, M., Lustyik, G., Phaneuf, S., Ding, T., Nicholson, J. K., Janossy, G., Shapiro, H., Barnett, D., Mandy, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stability+of+currently+used+cytometers+facilitates+the+identification+of+pipetting+errors+and+their+volumetric+operation%3A+%22time%22+can+tell+all%5BTitle%5D)+AND+%22Cytometry+B+Clin+Cytom%22%5BJournal%5D)">Stability of currently used cytometers facilitates the identification of pipetting errors and their volumetric operation: "time" can tell all.</a> Cytometry B Clin Cytom. 52, 37-39 (2003).</li>
<li>Coulter, B. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aCoulter%2C+B+%22Flow+Cytometer+Alignment+Verification+Package+insert+of+Flow-CheckTM+Fluorospheres.+Volume+PN+4276179-LA%22">Flow Cytometer Alignment Verification Package insert of Flow-CheckTM Fluorospheres. Volume PN 4276179-LA</a>. , Beckman Coulter USA. Galway. (2008).</li>
<li>Coulter, B. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aCoulter%2C+B+%22Flow-SetTM+Fluorospheres+%28Flow+Cytometer+Standardization+Fluorospheres%29.+Package+insert+of+Flow-SetTM+Fluorospheres.+Volume+PN+6607007%22">Flow-SetTM Fluorospheres (Flow Cytometer Standardization Fluorospheres). Package insert of Flow-SetTM Fluorospheres. Volume PN 6607007</a>. , Beckman Coulter USA. Galway. (2007).</li>
<li>Coulter, B. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aCoulter%2C+B+%22Immuno-TrolTM+Cells.+Package+insert+of+Immuno-TrolTM+Cells.+Volume+PN+6607077%22">Immuno-TrolTM Cells. Package insert of Immuno-TrolTM Cells. Volume PN 6607077</a>. , Beckman Coulter USA. Galway. (2007).</li>
<li>Beckman Coulter Hematology IQAP program. , Available from:
 <a target="_blank" href="https://www.beckmancoulter.com/wsrportal/wsr/support/quality-assurance-programs/interlaboratory-quality-assurance-program-iqap/index.htm">https://www.beckmancoulter.com/wsrportal/wsr/support/quality-assurance-programs/interlaboratory-quality-assurance-program-iqap/index.htm</a> (2009).</li>
<li>UKNEQAS. United Kingdom National External Quality Assessment Service. , Available from:
 <a target="_blank" href="http://www.ukneqas.org.uk">http://www.ukneqas.org.uk</a> (2009).</li>
<li>Glencross, D. K., Aggett, H. M., Stevens, W. S., Mandy, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((African+regional+external+quality+assessment+for+CD4+T-cell+enumeration%3A+development%2C+outcomes%2C+and+performance+of+laboratories%5BTitle%5D)+AND+%22Cytometry+B+Clin+Cytom%22%5BJournal%5D)">African regional external quality assessment for CD4 T-cell enumeration: development, outcomes, and performance of laboratories.</a> Cytometry B Clin Cytom. 74, Suppl 1. S69-S79 (2008).</li>
<li>Tilling, R., Kinloch, S., Goh, L. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Parallel+decline+of+CD8%2B%2FCD38%2B%2B+T+cells+and+viraemia+in+response+to+quadruple+highly+active+antiretroviral+therapy+in+primary+HIV+infection%5BTitle%5D)+AND+%22AIDS%22%5BJournal%5D)">Parallel decline of CD8+/CD38++ T cells and viraemia in response to quadruple highly active antiretroviral therapy in primary HIV infection.</a> AIDS. 16, 589-596 (2002).</li>
<li>Coulter, B. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aCoulter%2C+B+%22FLOWCARETM+PLG+CD4+Reagent+%28CD45-FITC%2FCD4-PE%29.+Package+insert+of+FLOWCARETM+PLG+CD4+Reagent%22">FLOWCARETM PLG CD4 Reagent (CD45-FITC/CD4-PE). Package insert of FLOWCARETM PLG CD4 Reagent</a>. , Beckman Coulter USA. Galway. (2004).</li>
<li>Coulter, B. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aCoulter%2C+B+%22Flow-CountTM+Fluorospheres.+PN+7507992-M%22">Flow-CountTM Fluorospheres. PN 7507992-M</a>. , Beckman Coulter USA. Galway. (2007).</li>
<li>Scott, L. E., Glencross, D. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Monitoring+reproducibility+of+single+analysis%2C+single+platform+CD4+cell+counts+in+a+high+volume%2C+low+resource+laboratory+setting+using+sequential+bead+count+rates%5BTitle%5D)+AND+%22Cytometry+B+Clin+Cytom%22%5BJournal%5D)">Monitoring reproducibility of single analysis, single platform CD4 cell counts in a high volume, low resource laboratory setting using sequential bead count rates.</a> Cytometry B Clin Cytom. 67, 31-32 (2005).</li>
<li>Storie, I., Sawle, A., Goodfellow, K., Whitby, L., Granger, V., Reilly, J. T., Barnett, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Flow+rate+calibration%3A+a+new+approach+for+performing+absolute+cell+counts%5BTitle%5D)+AND+%22Cytometry+B+Clin+Cytom%22%5BJournal%5D)">Flow rate calibration: a new approach for performing absolute cell counts.</a> Cytometry B Clin Cytom. 55, 1-7 (2003).</li>
<li>Coetzee, L., Lawrie, D., Stevens, W., Glencross, D. K. Evaluation of pipetting methodology to assess precision and accuracy of single platform PLG/CD4 enumeration. 2nd SA-AIDS Congress, Durban, South Africa, , (2006).</li>
<li>NHLS Training Manual, PLG/CD4 Workshop. , Available from:
 <a target="_blank" href="http://www.plgcd4.net/">http://www.plgcd4.net/</a> (2008).</li>
<li>Borowitz, M. J., Guenther, K. L., Shults, K. E., Stelzer, G. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immunophenotyping+of+acute+leukemia+by+flow+cytometric+analysis.+Use+of+CD45+and+right-angle+light+scatter+to+gate+on+leukemic+blasts+in+three-color+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Clin+Pathol%22%5BJournal%5D)">Immunophenotyping of acute leukemia by flow cytometric analysis. Use of CD45 and right-angle light scatter to gate on leukemic blasts in three-color analysis.</a> Am J Clin Pathol. 100, 534-540 (1993).</li>
<li>Mokone, G. N., Lawrie, D., Coetzee, L., Glencross, D. K. Interpretation of CD45 patterns in the PanLeucoGating CD4 test can be used for diagnosis of white cell abnormalities. Poster presentation. , (2007).</li>
<li>Lawrie, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+wide-spread+clinical+uses+of+PanLeucoGating+technology+in+the+HIV+diagnosis+oriented+immunohaematology+laboratory%5BTitle%5D)+AND+%22PhD+Thesis%2C+in+preparation%22%5BJournal%5D)">The wide-spread clinical uses of PanLeucoGating technology in the HIV diagnosis oriented immunohaematology laboratory.</a> PhD Thesis, in preparation. , (2010).</li>
<li>Badri, M., Lawn, S. D., Wood, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Utility+of+CD4+cell+counts+for+early+prediction+of+virological+failure+during+antiretroviral+therapy+in+a+resource-limited+setting%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Infect+Dis%22%5BJournal%5D)">Utility of CD4 cell counts for early prediction of virological failure during antiretroviral therapy in a resource-limited setting.</a> BMC Infect Dis. 8, 89(2008).</li>
<li>Peter, T., Badrichani, A., Wu, E., Freeman, R., Ncube, B., Ariki, F., Daily, J., Shimada, Y., Murtagh, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Challenges+in+implementing+CD4+testing+in+resource-limited+settings%5BTitle%5D)+AND+%22Cytometry+B+Clin+Cytom%22%5BJournal%5D)">Challenges in implementing CD4 testing in resource-limited settings.</a> Cytometry B Clin Cytom. 74, Suppl 1. S123-S130 (2008).</li>
<li>Denny, T. N., Gelman, R., Bergeron, M., Landay, A., Lam, L., Louzao, R., Mandy, F. F., Schmitz, J., Spira, T., Wilkening, C., Glencross, D. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+North+American+multilaboratory+study+of+CD4+counts+using+flow+cytometric+panLeukogating+%28PLG%29%3A+a+NIAID-DAIDS+Immunology+Quality+Assessment+Program+Study%5BTitle%5D)+AND+%22Cytometry+B+Clin+Cytom%22%5BJournal%5D)">A North American multilaboratory study of CD4 counts using flow cytometric panLeukogating (PLG): a NIAID-DAIDS Immunology Quality Assessment Program Study.</a> Cytometry B Clin Cytom. 74, Suppl 1. S52-S64 (2008).</li>
<li>Janossy, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+changing+pattern+of+%22smart%22+flow+cytometry+%28S-FC%29+to+assist+the+cost-effective+diagnosis+of+HIV%2C+tuberculosis%2C+and+leukemias+in+resource-restricted+conditions%5BTitle%5D)+AND+%22Biotechnol+J%22%5BJournal%5D)">The changing pattern of "smart" flow cytometry (S-FC) to assist the cost-effective diagnosis of HIV, tuberculosis, and leukemias in resource-restricted conditions.</a> Biotechnol J. 3, 32-42 (2008).</li>
</ol>

Los derechos de patentes internacionales para el método de CD4 se describe aquí se llevan a cabo por el NHLS de Sudáfrica y en la actualidad bajo la licencia de BCI, Miami, Fl, EE.UU..

En los últimos años los programas impulsados ​​por la caridad y la subvención concedida, han ayudado a la creación de unas excelentes prácticas clínicas en áreas de recursos limitados del planeta con alta carga de VIH. Los programas de arte han tenido éxito en la reducción de la mortalidad y ahora se están iniciando en el recuento de CD4 superior 2,3. Ya hay indicios de que estas nuevas medidas será disminuir la propagación de la infección por VIH 4,5, a pesar de la falta de una vacuna específica contra el VIH. En el video se documenta que al seguimiento de los pacientes en tratamiento antirretroviral, estas técnicas pueden ser mejor enfocado y ser más rentable que la observada en la práctica de rutina en los laboratorios occidentales (Lista 1). Tal enfoque dirigida por África y puede ser esencial para apoyar la modernización de los servicios de laboratorio en un momento en que la infección por VIH, tratados con ART, se está convirtiendo en una enfermedad crónica. Como un seguimiento de la terapia antirretroviral requiere CD4 preciso contar y de carga viral relacionados con la tecnología, una tarea más exigente que para llevar a cabo un simple recuento de CD4-para colocar a los pacientes en grupos arbitrarios con el fin de ayudar a una decisión sobre el inicio ART 16. Con la ayuda de estos diagnósticos, es decir, mediante la prueba de CD8/CD38, es posible reducir los costos de supervisión VL-relacionados en&gt; 60% de los pacientes en tratamiento antirretroviral 16,19. También es importante destacar que es la prueba de CD8/CD38 16,17, y no el recuento de CD4 de 37 años, que es probable que recoger los primeros signos de rebotes VL y / o la falta de cumplimiento del paciente en la toma de la medicación. Un elemento esencial de una estrategia coordinada rentable servicio central es la disponibilidad de una red a gran escala nacional o regional con el apoyo de expertos y asesores académicos que están familiarizados con los aspectos técnicos y médicos de la operación. Esto se demuestra por las actividades de la red de Sudáfrica NHLS y los programas de formación CD4-PLG.net 33, 36, que proporcionan el estímulo, la educación y la evaluación de la calidad de los centros más pequeños y estos también pueden ser &quot;el punto de atención&quot; de servicios. Es importante destacar que las operaciones de los laboratorios centrales y puntos de atención son complementarias. Mientras que el primero tiene la doble función de proporcionar una solución rentable operación a gran escala de servicios, así como la formación básica / avanzada para el periférico laboratorios de 33,38, en que éste contribuye a contener la propagación de la terapia antirretroviral mediante el reclutamiento de los pacientes VIH + que son elegibles para ART a partir de una base más amplia, incluyendo las clínicas rurales. Aquí cierta cautela es necesaria porque el punto de atención de diagnóstico puede ser mucho más costoso y no garantiza automáticamente la precisión 38. Por tanto, es razonable mantener el sistema de dos niveles y para facilitar la coordinación entre los dos niveles sin permitir que ninguno de los brazos a disminuir. En conclusión, en el ámbito del control diagnóstico del manejo clínico de las enfermedades infecciosas es necesario un ahorro de costes se puede lograr por los servicios de apt que utilizan la tecnología moderna más barato y mejor coordinados con una calidad mucho mejor 13,39. Bien organizados nacionales (y regionales) las disposiciones de diagnóstico de servicio debe recibir un mayor apoyo por 6-8 evitar un escenario en que prácticamente todo el apoyo de subvención se pierde en los métodos caros y / o no probadas tan pronto como éstos son importados de los países ricos sin un cuidado pre- escrutinio constructivo preventivo. Del mismo modo, un diseño más flexible de los ensayos clínicos terapéuticos con la plena participación de los médicos locales y el personal sanitario debe conducir a la reducción de la frecuencia innecesariamente y / o demasiado ambiciosos pruebas de laboratorio 3. Esta política le daría más oportunidad de un mejor aprovechamiento de los resultados disponibles de diagnóstico preciso en una evaluación coordinada clínica / laboratorio de los pacientes en tratamiento antirretroviral. Estos diagnósticos inteligentes también puede ser iniciado por los países de escasos recursos-8 en las áreas de la tuberculosis y las leucemias con una plataforma existente flujo de citometría de 40 familiares.

supervisión efectiva de laboratorio integral y costo del vih / sida: un modelo a seguir de África

Comprehensive &amp; Cost Effective Laboratory Monitoring of HIV/AIDS: an African Role Model

Presentamos el video de ayudar a la terapia antirretroviral (ART) por un servicio de laboratorio apt - lo que representa un modelo sudafricano para las pruebas de diagnóstico de gran escala económica. En los países de bajos ingresos económicos ART ha transformado las perspectivas para la supervivencia de los pacientes seropositivos al VIH, pero existen dudas sobre si es necesario para la vigilancia de laboratorio de arte y en lo que los costos - en situaciones en las que la calidad general de los servicios de patología todavía puede ser muy bajo. La respuesta adecuada es el establecimiento de servicios económicamente viables, con una mejor coordinación y más estricta evaluación de la calidad interna que se ve en los países occidentales. Este video, fotografiado en el lugar de los Servicios de Laboratorio Nacional de Salud (NHLS-SA) en la Universidad de Witwatersrand, Johannesburgo, Sudáfrica, proporciona un esquema coordinado ampliación de la original de dos colores CD4-CD45 estrategia PanLeucoGating (PLG). Así, los seis módulos de la presentación del vídeo revelan la sencillez de un ensayo de flujo de 4 colores citometría de combinar pruebas hematológicas, inmunológicas y virológicas relacionadas en un solo tubo. Estos módulos de vídeo son los siguientes: (i) la puesta en marcha de instrumentos, (ii) la preparación de la muestra, (iii) pruebas de recuentos absolutos y monitoreo de la calidad de cada muestra de cordón-cuenta-tasa, (iv) la prueba de heamatological CD45 de células blancas cuenta las diferencias y, (v) el recuento de células CD4, y (vi) la activación de células T CD8 + CD38 medido por la pantalla, un parámetro relacionado con la carga viral. El potencial de ahorro de costes es notable. Este acuerdo es un claro ejemplo de la factibilidad de realizar&gt; 800-1000 pruebas por día, con un control de calidad más estrictas que las aplicadas en los laboratorios occidentales, y también con la transferencia de tecnología a otros laboratorios dentro de una red NHLS-SA. Expertos asesores, directores de laboratorios y responsables de las políticas que llevan a la obligación de tomar decisiones sobre la introducción de la tecnología médica moderna no suele estar en condiciones para ver los últimos detalles técnicos que lleva a cabo en los grandes laboratorios regionales con enormes cargas de trabajo. Por lo tanto, este video muestra los detalles de estos nuevos desarrollos.

La terapia antirretroviral para tratar el VIH / SIDA se controla en el sur de África a gran escala. La citometría de flujo se combina para hematología (CD45), la inmunología (CD4) y ​​carga viral ensayo relacionado CD38. Grabado en NHLS-SA laboratorios, Johannesburgo, estos métodos modernos son costo-eficientes, con mayor control local de calidad interno, que sirven como modelos a imitar por los limitados recursos de diagnóstico.

Supervisión efectiva de laboratorio integral y costo del VIH / SIDA: un modelo a seguir de África

Presentamos el video sobre el apoyo a la terapia antirretroviral (TAR) mediante un servicio de laboratorio adecuado, que representa un modelo sudafricano para la economía...

El anticuerpo monoclonal utilizado en estos ensayos se denomina CD cuatro. Este es el reactivo básico para detectar linfocitos ERT. Sirve para medir el número de linfocitos positivos para CD cuatro en la sangre, los cuales están siendo destruidos progresivamente por el VIH.Y así, el número de células CD4 está relacionado con la inmunodeficiencia del paciente. Otro reactivo, CD45, se utiliza para contar todos los glóbulos blancos, lo cual también es un ensayo de rutina útil. Una prueba adicional para los llamados marcadores de activación reduce el costo de los ensayos de carga viral, que puede ser muy elevado.Estos estudios se han llevado a cabo en la Universidad de Witwatersrand en Johannesburgo, Sudáfrica, bajo la dirección de la profesora Deborah Glen Cross y la profesora Wendy Stevens. El objetivo de este video es doble. En la primera parte, verá cómo un laboratorio bien equipado realiza un ensayo relacionado con CD4, CD45 y carga viral.Esto consta de seis módulos. Estos pasos técnicos se implementan luego en 70 laboratorios repartidos por toda Sudáfrica. En la segunda parte, se analiza la relación entre un gran laboratorio central que realiza miles de pruebas cada día y los laboratorios más periféricos que están cerca del punto de atención al paciente.La discusión aquí se centra en cómo facilitar el apoyo para el tratamiento de más pacientes infectados con VIH mediante medicamentos antirretrovirales. Mi nombre es Neil Ney. Trabajo, soy un sec.Soy tecnólogo en citometría de flujo. Trabajo en el Hospital General de Johannesburgo, Sudáfrica. Este es el ciclo de flujo.Esto es, utilizamos la citometría de flujo. Beckman colocó el escape. Básicamente lo que ocurre es que la biblioteca funciona en ritmo de desecho.Nosotros, la suma que realizamos diariamente, como la verificación del recuento de células en uso y los controles del instrumento de flujo. Hay tareas que realizamos semanalmente, como el archivado de los resultados. Y hay algunos trabajos que realizamos mensualmente, como el mantenimiento.Una vez finalizado el ciclo de limpieza, inicializamos la máquina. Presionamos el botón de ejecución. Ejecutamos dos tiras de tierra, dos tubos de cuchilla, o bien puede ejecutar dos tubos de principio y dos tubos de agua destilada.Después de haber completado toda la limpieza, lo primero que ejecutamos es la verificación de fondo para comprobar la alineación del láser y monitorear el voltaje, de modo que asegure que el voltaje permanezca constante. Si ejecuta la verificación de fondo por la mañana y esta falla, debe intentarlo nuevamente. Si aún presenta problemas, entonces debemos llamar al servicio principal de emisiones FA para que venga a revisar la máquina.porque podría haber algún problema con la alineación del láser o con los voltajes. Realizamos pruebas inmuno, la normal y la alta, todas las mañanas. Pueden realizarse al menos durante el turno de ocho horas.Ahora estamos realizando el inmuno alto cho. Voy a verificar si nuestros recuentos celulares están dentro de los rangos. Mi nombre es Denise Dory.Soy el encargado del laboratorio en la ciudad para el laboratorio del Hospital de Johannesburgo. Desempeño una función a nivel nacional en ese ámbito. He participado en la implementación de procedimientos de aseguramiento de la calidad para garantizar la precisión y la confiabilidad de los conteos de CD4, no solo en nuestro propio laboratorio, sino también a nivel nacional en Sudáfrica.La preparación de muestras de CD cuatro es muy sencilla. Utilizamos dos anticuerpos monoclonales de diferentes colores, CD cuatro y CD 45. Estos generalmente vienen premezclados en un frasco marrón que contiene ambos anticuerpos.Para comenzar, prepararíamos 10 microlitros del anticuerpo CD45 CD4 en el fondo de un tubo limpio. A continuación, el siguiente paso sería añadir la sangre. Para este método estamos utilizando cien microlitros de sangre.Debe prepararse con precisión. A continuación, se mezclarían la sangre y el anticuerpo. Así, la última etapa de esta preparación implicaría agregar el reactivo eising.El, y como puede ver, una vez que se añade el reactivo LY, la sangre cambia de una solución opaca a una solución hemolizada a través de la cual realmente se puede ver por el tubo. Este es un método muy sencillo, que puede realizarse manualmente, pero si se están procesando grandes volúmenes de muestras, como ocurre en la mayoría de los laboratorios, se utilizaría un sistema automatizado como este, que realizaría la preparación de pipetas por usted. Sin embargo, la preparación no necesariamente debe realizarse mediante un sistema automatizado si se utiliza la tasa de recuento de glóbulos, ya que los recuentos de glóbulos, los glóbulos que añadimos, nos indicarán si alguien ha preparado correctamente la muestra.La última etapa antes de colocar esta muestra en un analizador consiste en añadir cien microlitros de las perlas que vienen en un tubo como este. La muestra entonces estaría lista para cargarse en el citómetro de flujo. Mi nombre es sit MoFA y soy el oficial de aseguramiento de calidad en este laboratorio de citometría de flujo, y me encanta la citometría de flujo.Tenemos máquinas muy avanzadas aquí, que son las EPICS Excel, y son muy estables. De hecho, añadimos nuestros propios controles, que también nos indican la estabilidad de los instrumentos. Entonces, ¿cómo monitorizamos nuestra tasa de recuento de flujo?La tasa baja de cuentas se relaciona completamente con el equipo. Más recientemente, hemos comenzado la preparación automatizada de nuestros instrumentos y de nuestras muestras, pero aún así, el monitoreo de la tasa de cuentas de flujo sigue siendo el control de calidad relevante. Nuestro conteo de flujo mostrará esta línea recta, que indica lo perfecta que es la tasa de conteo de flujo, pero aún así persisten desviaciones.Aún hay algunos valores atípicos, por lo que estos valores atípicos pueden deberse a un error de pipeteo, pero si descartamos la posibilidad de un error de pipeteo, entonces podemos verificar nuestro instrumento para ver si está funcionando correctamente, y luego podemos llamar a los ingenieros para que vengan a repararlo, de modo que pueda continuar con el portamuestras. Este es Zo ly de Beckman Ter. Él es nuestro técnico.Vengo siempre que hay un problema y, sí, también vengo cada seis meses para realizar mantenimiento mientras nuestros muestras son analizadas mediante los instrumentos. Como responsable de control de calidad, mi deber es verificar siempre esta pantalla, que monitorea nuestra tasa de flujo. De modo que inmediatamente detecto si hay un valor atípico.Soy capaz de ver que hay un valor atípico. En realidad hay cinco instrumentos funcionando en este momento porque nuestra carga de trabajo es extremadamente alta, y estos dos aquí simplemente muestran que no son las muestras las que se adquieren. Es solo la prueba que realizamos al final de cada carrusel, pero aún así seguimos observando algunos valores atípicos.Por ejemplo, este en este instrumento, que es el Epic Excel cuatro. Este definitivamente necesitará reparación inmediata antes de que los resultados sean enviados desde todo el carrusel y, tras el restablecimiento, deberá ejecutarse inmediatamente antes de la finalización. Para recapitular, hemos establecido que nuestras máquinas están funcionando de forma óptima.Hemos verificado la reproducibilidad del conteo de las cuentas para asegurar que los conteos de CD4, que se realizarán a continuación, sean precisos. Hemos comprobado que los láseres estén correctamente alineados en nuestros instrumentos y hemos verificado la precisión de los conteos mediante la ejecución de dos niveles de controles. Esta muestra, sin contenido, de CD4 y CD45, y necesito describirle por qué CD45 es tan importante en nuestro análisis.CD 45 es un marcador celular que identifica todos los glóbulos blancos en una muestra. Esto es importante para nosotros en este contexto porque nos permite comparar el recuento de células blancas que obtenemos utilizando CD 45 con el recuento de células blancas proveniente de un analizador de hemograma completo. Como se observa en estos ejemplos aquí, este es un impreso de hemograma completo de un analizador Beckman Coulter LH 750 y podemos ver que tenemos un recuento de células blancas de 7,1 en el citómetro de flujo utilizando CD 45, donde se tiñen todas las células blancas totales.Tenemos un recuento de células por peso de CD muy similar de 7.175. Aceptaríamos un valor, una diferencia en los conos de células por peso menor al 5%. La otra ventaja adicional de la inclusión de CD45 es la tinción diferencial de CD45 en los glóbulos blancos. En el citómetro de flujo, podemos utilizar tres parámetros: dispersión, dispersión directa y CD45.Si observamos este histograma aquí, los linfocitos están claramente definidos. Suelen ser las células con mayor tinción con CD 45 y tienen la menor complejidad, son las células más simples y las más abundantes con CD 45. El siguiente grupo de células son nuestros monocitos.Nuestros monocitos tienen una expresión ligeramente menor de CD45, pero son más complejos que los linfocitos. Luego, el siguiente grupo principal de células, que en una muestra normal sería el grupo más grande, son nuestras células granulares. Estas poblaciones son las células sanguíneas más comunes observadas en la sangre periférica.La ventaja de utilizar la tinción de CD45 en un citómetro de flujo es que uno. Podemos realizar un conteo de CD4, un conteo absoluto de glóbulos blancos y un conteo diferencial automatizado en el citómetro de flujo. La tinción de CD45 nos permite realizar conteos diferenciales durante períodos más largos de tiempo.Podemos realizarlos hasta 48 horas. Si estamos utilizando la expresión de CD45. Los recuentos diferenciales realizados con este método son menos objetivos que con otros métodos.Por ejemplo, el estándar de oro para realizar un recuento diferencial manual nos permite identificar poblaciones leucémicas y también constituye la base para el marcador panleucocitario CD, que se muestra en la pantalla aquí. Hasta ahora, la ventaja de la expresión de CD45 en los glóbulos blancos no se ha aprovechado plenamente en los laboratorios de hematología. Disponemos de una variedad de analizadores diferentes de hemograma completo que utilizan distintas técnicas para obtener recuentos diferenciales de células blancas.Utilizar CD45 en un piso. El citómetro sería una manera excelente de estandarizar los conos diferenciales entre diferentes analizadores hematológicos, ya que sería un método con el que podrían compararse todos los demás analizadores hematológicos. Hola, mi nombre es Dra. Linda Sier.Participo activamente en investigaciones sobre el VIH que incluyen pruebas tanto para CD cuatro como para CD ocho. Los linfocitos T pueden dividirse en células positivas para CD cuatro y células positivas para CD ocho, y las células positivas para CD cuatro se utilizan para monitorear el VIH en pacientes en tratamiento. El problema, sin embargo, con CD cuatro es que no se expresa exclusivamente en linfocitos, sino que también expresan CD cuatro.En el protocolo PLG, analizamos tres aspectos diferentes para discriminar eficazmente entre los monocitos y los linfocitos. En primer lugar, utilizamos la complejidad o granularidad, donde se puede observar que, si se considera la complejidad, los linfocitos y los monocitos pueden separarse con ese fin. También utilizamos CD45 C, mediante el cual se puede distinguir la población de linfocitos de la población de monocitos.La expresión de CD cuatro es intensa en los linfocitos y moderada en los monocitos, utilizada junto con la complejidad. Es bastante fácil distinguir entre los linfocitos CD cuatro intensos y los monocitos CD cuatro débiles, y le mostraré un ejemplo de una muestra de un paciente normal en la que puede observar los linfocitos y los monocitos; este paciente tenía una cuenta de CD cuatro superior a 700. Si observamos un paciente con una cuenta de CD cuatro de 53, puede ver que, aunque tiene una cuenta baja de CD cuatro, la discriminación entre los linfocitos positivos y los monocitos positivos para CD cuatro sigue siendo muy clara.Mediante el método PLG, somos capaces de realizar un gran número de análisis por día. En nuestro laboratorio, actualmente procesamos aproximadamente mil muestras por día, lo que equivale a 5.000 muestras por semana. Dos semanas de nuestro trabajo equivalen aproximadamente al trabajo realizado en un año completo.En un hospital de Londres en Sudáfrica, contamos con 70 laboratorios NNRS y, durante un año, estos laboratorios realizan aproximadamente 1,98 millones de pruebas de CD4 por año. Hola, soy Kni. Actualmente estoy en mi descanso para el té, pero cuando termine, les hablaré sobre CD38 y la carga viral.Entonces, básicamente todos sabemos que los citómetros de flujo pueden contar células, pero lo que también pueden hacer es cuantificar las moléculas de superficie, es decir, moléculas presentes en la superficie celular. Esto se realiza midiendo la intensidad de fluorescencia. Bajo condiciones estándar, ya mencionadas anteriormente, utilizamos CD4 y 45, conocido como el método PLG.Vamos un paso más allá al combinar dos pruebas en un solo tubo. Nombre del método de prueba CD 4 45 PLG. Vamos a combinar esto con una prueba de dos colores para un marcador de activación u otro parámetro relacionado con la carga viral, específicamente CD 38.Los estadounidenses utilizan inmunofluorescencia de cuatro colores. Utilizan CD4, CD45, CD8 y CD3. Nosotros utilizamos CD4, CD45, CD8, y reemplazamos el CD3 utilizando CD38.En primer lugar, es importante tener en cuenta que se debe obtener un valor basal de CD38 para cada paciente, ya que este valor basal de CD38 sirve como control específico para ese paciente en particular. Y eso ocurre cuando la carga viral es alta, ¿verdad? Sí. Eso sucede cuando un paciente ingresa con una carga viral elevada y un recuento bajo de CD4. Esto ocurre al inicio, antes de iniciar la terapia.También debemos prestar atención a los picos de CD38 donde hay un aumento en el CD38. Esto es evidente en esta paciente aquí, donde se observa un aumento repentino en la MFI de CD38 y, si se observa, también hay un aumento correspondiente en la carga viral. ¿Es posible que la paciente no estuviera tomando los medicamentos en ese momento?En este momento, sí, es posible que el paciente haya dejado de tomar la terapia porque los niveles regresan a la normalidad. Entonces, ¿por qué estamos tan satisfechos con esta prueba? En primer lugar, combina dos métodos de prueba en un solo tubo.En segundo lugar, es rentable, ya que nos proporciona un recuento de células blancas CD45, un recuento de CD4, así como un marcador de activación. Se utiliza en los instrumentos que actualmente están en nuestros laboratorios, por lo que no será necesario incorporar nuevos equipos y el personal puede capacitarse fácilmente en cómo realizar el gating y cómo preparar estas muestras. Los costos de la carga viral también disminuirán, porque actualmente cada vez que un paciente acude para un recuento de CD4, también se realizan pruebas de carga viral.Pero si monitoreamos el CD38 y observamos un aumento en la MFI del 38, entonces solo en ese caso podemos enviar las muestras del paciente para la prueba de carga viral. En cuanto al desempeño de nuestro programa nacional sudafricano, que es el programa nacional de CD4 NHLE que utiliza PLG, en el que brindamos un gran apoyo a nuestros laboratorios. Por ello, contamos con una instalación central que coordina todos los procedimientos estandarizados y todo el control de calidad que se descentraliza hacia los laboratorios remotos.Ellos operan su sistema y reportan nuevamente mediante EQA a través de nuestras Afrikas de regreso, con el apoyo del laboratorio central. Además, contamos con iniciativas de capacitación adicionales y continuas, así como servicios de apoyo. Y nuestro programa, como grupo, tiene un desempeño significativamente mejor que otros programas nacionales, de manera notable, más del 50 % en precisión, no solo dentro de los laboratorios, sino también entre laboratorios.Esto significa que un CD4 procedente de un laboratorio en Berley será muy similar a un CD4 procedente de un laboratorio en Durban, por ejemplo, utilizando nuestra superficie estandarizada. Así que toma ese concepto y lo descentralizas hacia el punto de atención. En segundo lugar, esto implica que el punto de atención estará facilitado a través de una única unidad coordinadora.Era evidente que estos esfuerzos, demostrados por estas personas dedicadas, representan avances conceptuales, no simplemente retroceder un cuarto de flujo citómetro, que puede producir estos resultados. Los mismos conceptos pueden utilizarse con otros instrumentos como máquinas Ton Dickinson o máquinas Partec o fabricadas por Accur o cualquier otra empresa. De hecho, desarrollos recientes de otros países, por ejemplo, India, están mostrando que deberían comenzar su propia industria de citometría de flujo, que utilizaría la misma tecnología.El único aspecto importante aquí fue la coordinación excepcional. Ahora, aquellas personas que piensan que los conteos de CD4 son los únicos objetivos están equivocadas, porque aquí estábamos trabajando con conteos completos de glóbulos blancos, números absolutos, diferencias en el conteo sanguíneo completo de glóbulos blancos. Estábamos trabajando con CD4 y también con marcadores de activación, lo que hace que los ensayos sean más económicos que los ensayos comparables de carga viral.Sin embargo, esto no es una competencia entre estos marcadores de activación y las cargas virales, sino un tipo de disposición complementaria que ahorra dinero en los ensayos de carga viral. Estas han sido investigaciones científicamente validadas, y los clínicos deberían buscar estos ensayos cuando exista duda sobre la adherencia del paciente al tratamiento, cuando se cuestione la eficacia del fármaco o cuando sea necesario cambiar la terapia porque el paciente comience a desarrollar resistencia. La conclusión esencial ha sido la buena garantía de calidad actual, lo que nos lleva al punto final, y es que es mucho mejor contar con excelentes laboratorios centrales, que puedan proporcionar citometría de flujo y garantía de calidad, evaluando para los laboratorios periféricos, y así los laboratorios periféricos serán capaces de incluir a más personas en los regímenes de terapia antirretroviral.Por lo tanto, aquí estamos presenciando un nuevo desarrollo surgido del suelo africano. Muchas gracias por su atención.

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Research

Investigación

JoVE Journal

Immunology and Infection

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