Name: En la inyección intraventricular Utero y electroporación de embriones de ratón E15 (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2007-07-19T00:00:00.000+00:00
Duration: 26 min 17 s
Description: Aprende a realizar inyecciones intrauterinas y electroporación en embriones de ratón E15 para manipulación génica cerebral. Esta técnica permite estudiar desarrollo neural y expresión de genes in vivo.

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en la inyección intraventricular utero y electroporación de embriones de ratón e15

In Utero Intraventricular Injection and Electroporation of E15 Mouse Embryos

En el útero in-vivo de la inyección y la electroporación de la corteza cerebral de embriones de ratón proporciona una poderosa herramienta para la manipulación de los progenitores individuales que cubren las paredes del ventrículo lateral. Esta técnica es ampliamente utilizada para estudiar los procesos involucrados en corticogenesis por la sobre-expresión o derribar los genes y observar los efectos sobre la proliferación celular, la migración y la diferenciación. En comparación con las estrategias tradicionales de octavos de final, en el útero de la electroporación proporciona un medio rápido para manipular a una población de células durante una ventana temporal específica. En este protocolo de vídeo que resumen la metodología experimental para la preparación de los ratones para la cirugía, la exposición de los cuernos uterinos a través de laporatomy, la inyección de ADN en los ventrículos laterales del embrión en desarrollo, electroporating ADN en los progenitores que recubre la pared lateral, y el cuidado de los animales después de la cirugía . Nuestro laboratorio utiliza este protocolo para las cirugías de E13-E16 ratones, sin embargo, se realiza con mayor frecuencia en E15, como se muestra en este video.

En la inyección intraventricular Utero y electroporación de embriones de ratón E15

La inyección in vivo in utero y la electroporación del neocórtex embrionario de ratón proporcionan una herramienta poderosa para la manipulación de progenitores individuales...

Hola, soy William Tis del Laboratorio Krete. Hoy, yo y otros vamos a mostrarles inyecciones intrauterinas de embriones de ratón E15. Hola, mi nombre es Laura Elias.Hoy les mostraré cómo preparar las pipetas de microinyección y cargarlas para las inyecciones intraventriculares y la electroporación que realizaremos. Mi nombre es David Castaneda y hoy estaré ayudando con inyecciones in vivo in utero en embriones de ratón. Inyectaremos ADN plasmídico en el ventrículo lateral de embriones de ratón en desarrollo.Dirigimos la corteza CE de estos embriones para obtener la expresión de diferentes moléculas por parte de las células gliales, las cuales se convertirán en neuronas más adelante durante el desarrollo. Al realizar estas inyecciones intrauterinas, hay algunas herramientas importantes que necesitará utilizar y se las mostraré ahora. Utilizamos un freer, un par de fórceps adin.Uno, un par que está dentado y otro par que tiene un pequeño diente en el extremo. Utilizamos un par de hemostatos. Este es un par de tijeras.Luego utilizamos estas dos grapadoras. Esta es la más grande, que usamos para ratas. Esta es la más pequeña, que usamos para ratones.Utiliza una grapa tamaño siete, y est

in-utero-intraventricular-injection-electroporation-e15-mouse

Research

Investigación

JoVE Journal

Biology

Biología

En la inyección intraventricular Utero y electroporación de embriones de rata E16

En la cirugía de la supervivencia en ratones in utero permite la manipulación molecular de la expresión génica durante el desarrollo. A continuación se describe el uso de alta frecuencia, la ecografía para guiar la inyección de vectores retrovirales en el cerebro del ratón en el día embrionario (E) 9.5.

Guiada por ultrasonido microinyección en el cerebro anterior Ratón In Utero En E9.5

En el útero de la electroporación permite la entrega rápida de genes en un espacio-temporal y controlado de manera en el desarrollo del sistema nervioso central (SNC). Aquí se describe una muy adaptable en el protocolo de electroporación in utero que puede ser utilizado para entregar las construcciones de expresión en múltiples dominios del SNC embrionario, incluyendo el telencéfalo, diencéfalo y la retina.

Entrega génica eficaz en los territorios del SNC múltiples utilizando In Utero La electroporación

Un método de transferencia de genes en el cerebro del ratón en desarrollo se describe mediante el uso de un método único quirúrgica y la forma especial de los electrodos. Esta técnica única permite la transfección de ADN de plásmido temporal y espacialmente, lo que ayudará a muchos neurocientíficos en el estudio de desarrollo del cerebro.

Del ratón en el útero de electroporación: Transefection controlada Gene espacio-temporal

El control de la expansión de células madre somáticas es un factor importante que impide su estudio y uso en terapia. Aquí se describe un sistema para controlar temporalmente madre neural expansión células durante el desarrollo y la edad adulta, que se puede utilizar para aumentar el número de neuronas generadas en el cerebro de ratón.

La expansión de las células madre embrionarias y adultas neurales por<em&gt; In Utero</em&gt; La electroporación o inyección estereotáxica Viral

Este video demuestra la entrega de ADN plasmídico en células neuronales cerebelosas de embriones murinos utilizando electroporación en el útero. Este método es útil para comprender la función in vivo de los genes en el desarrollo normal del cerebro y los cambios en la expresión génica de las células neuronales durante la progresión tumoral.

Entrega de genes basada en electroporación en el útero: una técnica para inyectar ADN plasmídico en células cerebelosas embrionarias de embriones murinos

A pesar de la importancia clínica y funcional del...

La manipulación genética del ratón en desarrollo a través de Hipotálamo<em&gt; En el útero</em&gt; La electroporación

Este protocolo describe en detalle cómo transfectar específicamente diferentes regiones en el sistema nervioso central C57BL/6 a través de la electroporación en el útero. En este protocolo se incluyen instrucciones detalladas para las transfecciones de regiones que se desarrollan en la corteza, el hipocampo, el tálamo, el hipotálamo, el núcleo septal lateral y el cuerpo estriado.

Específica Striatum Cortex, hipocampo, Thalamus-, hipotálamo, núcleo-septal lateral y<em&gt; In Utero</em&gt; Electroporación en el ratón C57BL / 6

La electroporación doble en el útero permite apuntar a las poblaciones celulares que están separadas espacial y temporalmente. Esta técnica es útil para visualizar las interacciones entre las poblaciones celulares que utilizan proteínas fluorescentes en condiciones normales, pero también después de experimentos funcionales para perturbar los genes de interés.

Doble en electroporación de utero para apuntar a poblaciones celulares separadas temporal y espacialmente

En este protocolo, describimos cómo inyectar lentivirus la cavidad amniótica del ratón en E7.5, lo que lleva a una transducción uniforme de toda la placa neural, con efectos perjudiciales mínimos sobre la supervivencia o el desarrollo embrionario.

Focalización de la placa neural murina mediante nanoinyección in utero (NEPTUNE) en el día embrionario 7.5

Aprende a realizar inyecciones intrauterinas y electroporación en embriones de ratón E15 para manipulación génica cerebral. Esta técnica permite estudiar desarrollo neural y expresión de genes in vivo.

En la inyección intraventricular Utero y electroporación de embriones de ratón E15

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