Generación de protoplastos a partir de la bacteria grampositiva Bacillus megaterium

0 visualizaciones • 3:13 min. • September 26th, 2025

Tome un cultivo de Bacillus megaterium, una bacteria grampositiva.

Diluir el cultivo en medios frescos e incubarlo agitándolo para promover la división bacteriana.

Transfiera el cultivo a un tubo y centrífuzcalo para granular las bacterias.

Retire el sobrenadante y vuelva a suspender el gránulo en un medio que contenga estabilizadores osmóticos para evitar la lisis de los protoplastos.

Transfiera la solución resuspendida a un matraz, agregue lisozima e incube agitando.

Durante la incubación, la lisozima degrada la gruesa pared celular de peptidoglicano de la bacteria.

A medida que la pared celular se degrada, las bacterias cambian de una forma en forma de varilla a cuerpos esféricos limitados solo por la membrana plasmática, formando protoplastos.

Visualice la suspensión bajo un microscopio.

Las bacterias de forma redonda confirman la formación de protoplastos, mientras que las bacterias hinchadas en forma de varilla indican una digestión incompleta.

Transfiera la solución a un tubo y centrífuga para granular los protoplastos.

Retire el sobrenadante y vuelva a suspender los protoplastos en medios nuevos que contengan estabilizadores osmóticos para su posterior análisis.

Para preparar protopla

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