In vitro Modelo de cultivo por lotes para imitar la fermentación del colon por microbiota intestinal humana

Comienza con un tubo colocado dentro de una cámara anaeróbica que contiene un medio rico en nutrientes y una fibra fermentable prehidratada.

Las condiciones de privación de oxígeno dentro del tubo imitan el ambiente anaeróbico del colon humano.

A continuación, añade una muestra hecesal diluida y homogeneizada que contenga microbios intestinales al tubo e incubala.

Invierte regularmente el tubo para mezclar los microbios con la fibra.

Durante la incubación, los microbios metabolizan y fermentan la fibra de forma anaeróbica, produciendo ácidos grasos de cadena corta y otros metabolitos, lo que reduce el pH del medio.

Recoge alícuotas de la mezcla fermentada a intervalos regulares para monitorizar la producción de metabolitos y comprobar su pH.

Centrifuga las alicuotas a bajas temperaturas para separar la biomasa microbiana en un pellet.

Transfiere el sobrenadante que contiene los metabolitos y los ácidos grasos de cadena corta a un tubo nuevo.

Congelar tanto la biomasa microbiana como el sobrenadante en nitrógeno líquido.

Finalmente, almacenar las muestras a baja temperatura para su análisis posterior.

Mantén los tubos inoculados a 37 grados Celsius dentro de la cámara anaeróbica, e invierte s