Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Microbiología
0 visualizaciones • 1:33 min. • January 30th, 2026
Tomemos cultivos de células de riñón de cerdo, con un cultivo pretratado con un inhibidor que aumenta el pH lisosomal, afectando la degradación autofágico-lisosomal.
Añade bacterias patógenas y centrifuga para mejorar el contacto huésped-patógeno.
Incubar para permitir la invasión bacteriana e internalización en las vesículas endocíticas.
Las bacterias internalizadas consumen nutrientes del huésped para replicarse, lo que desencadena estrés metabólico.
Este estrés activa la autofagia, donde una membrana autofágica se expande alrededor de la vesícula, formando un autofagosoma.
En las células no tratadas, el autofagosoma se dirige a las bacterias para su degradación lisosomal.
En las células tratadas con inhibidor, la depuración autofágica se ve afectada, lo que conduce a cargas bacterianas más elevadas.
Después de la infección, lava las células y aplica un antibiótico para eliminar las bacterias extracelulares.
Añade una enzima para digerir la matriz extracelular y desalojar las células.
Lisa mecánicamente las células para liberar las bacterias intracelulares.
Placar los lisados para permitir el crecimiento bacteriano.
Menos colonias de células no tratadas confirman el papel de la vía de degradación autofagia-lisosomal en la eliminación de bacterias intracelulares.