Tratamiento activado por luz de biopelículas bacterianas utilizando un precursor fotosensibilizante
Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Microbiología
0 visualizaciones • 2:59 min. • March 31st, 2026
Comienza con pozos de microplacas que contienen biopelículas de una bacteria patógena, divididos en cuatro grupos experimentales.
Aspira suavemente el medio y enjuaga con un tampón para eliminar las células no adherentes.
Añadir un búfer que contenga un precursor fotosensibilizador a dos grupos, mientras que los dos restantes reciben solo el búfer.
Incubar todos los grupos en la oscuridad para permitir que el precursor se difunda a través de la biopelícula, entre en las células bacterianas y se metabolice en un fotosensibilizador que se acumula dentro del citoplasma y las membranas.
Tras la incubación, expone un grupo tratado con precursor y otro solo con tampón a la irradiación luminosa.
En el grupo tratado con precursores, la luz excita el fotosensibilizador, que transfiere energía al ogénito molecular y genera especies reactivas de oxígeno (ROS).
Los ROS alteran las membranas, degradan proteínas y fragmentan el ADN, lo que provoca la muerte celular bacteriana.
Las otras tres condiciones no producen ROS, ya que el precursor o la luz están ausentes, dejando la biopelícula intacta.
Para generar un biofilm en una placa de 96 pozos, primero se inoculó uno menos 80 grados Celsius en una desco
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