Transducción de embriones fertilizados de rata mediante vectores lentivirales
Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Microbiología
0 visualizaciones • 3:07 min. • August 31st, 2026
Tomar un plato de microinyección con una gota de medio de cultivo de embriones en el centro, cubierto con aceite mineral para prevenir la evaporación.
Coloque el plato bajo un microscopio invertido.
Coloque una capilar de microinyección y una pipeta de sujeción en un sistema de micromanipulador bajo el microscopio.
La micropipeta de inyección se carga con una suspensión de vectores lentivirales que portan el transgén.
Luego, transfiera embriones de rata fertilizados al medio.
Sujete un embrión utilizando la pipeta de sujeción aplicando succión.
Bajo mayor aumento, inserte la capilar de microinyección a través de la cubierta de glucoproteínas extracelulares del embrión, la zona pelúcida, e inyecte la suspensión de lentivirus en el espacio perivitelino.
Luego, transfiera los embriones inyectados a un plato de cultivo e incube.
El virus ingresa al embrión y libera su genoma que contiene el transgén en el citoplasma.
Posteriormente, se transcribe inversamente a ADN e integra en el genoma del embrión, incorporando el transgén.
Los embriones transducidos ya están listos para su procesamiento.
Para la microinyección de vectores lentivirales bajo la zona pelúcida de embriones en estadio de una sola c
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