Trasplante de intestino delgado en ratones
20 de agosto de 2007
El pequeño ratón modelo de trasplante de intestino ha sido reconocido como una herramienta importante para estudiar mechanismes de rechazo inmunológico y la pantalla de nuevos fármacos inmunosupresores. Sin embargo, este modelo se limita al uso porque las técnicas en cuestión es un desafío muy técnico. Ahora se introduce la técnica modificada.
Mi nombre es, trabajo en el Laboratorio del Dr. K del Departamento de Cirugía de la Universidad de California, San Francisco. Hoy les mostraré las técnicas para trasplantes pequeños en ratones. Como probablemente sepan, en comparación con los trasplantes de órganos sólidos, existe un número limitado de trasplantes de SM exitosos.
Esto probablemente se deba a características intestinales distintivas, como una alta inmunogenicidad y una elevada presencia de bacterias permitida, lo que conduce a una alta tasa de complicaciones posoperatorias. Este es un excelente modelo quirúrgico para estudiar estas complicaciones. Acabo de mostrarle el procedimiento para el trasplante de intestino delgado en ratones.
Los pasos más importantes en este procedimiento son mantener la luz del intestino delgado del donante libre y el tiempo quirúrgico lo más corto posible. Este modelo de trasplante es extremadamente útil para el estudio de agentes inmunosupresores y de los mecanismos de rechazo en el trasplante de intestino delgado. Espero que ahora puedan llevar a cabo este procedimiento en sus propios laboratorios.
Gracias.
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Descripción general
El modelo de trasplante de intestino delgado en ratón es una herramienta fundamental para estudiar los mecanismos de rechazo inmune y probar nuevos fármacos inmunosupresores. Esta presentación introduce una técnica modificada para mejorar la viabilidad de este modelo.
Componentes Clave del Estudio
Área de la ciencia
- Biología del trasplante
- Inmunología
- Técnicas quirúrgicas
Antecedentes
- El trasplante de intestino delgado es menos exitoso que el trasplante de órganos sólidos.
- Las características intestinales distintivas contribuyen a una alta inmunogenicidad.
- Las complicaciones posoperatorias son comunes debido a la presencia bacteriana.
- Este modelo es valioso para estudiar estas complicaciones.
Objetivo del estudio
- Demostrar una técnica modificada para el trasplante de intestino delgado en ratones.
- Mejorar la tasa de éxito de los trasplantes de intestino delgado.
- Facilitar la investigación sobre el rechazo inmunitario y las estrategias inmunosupresoras.
Métodos Utilizados
- Demostración de técnicas quirúrgicas para el trasplante de intestino delgado.
- Uso de un modelo murino para estudiar los resultados del trasplante.
- Evaluación de complicaciones posoperatorias.
- Evaluación de las respuestas inmunogénicas.
Resultados principales
- Demostración exitosa de la técnica de trasplante modificada.
- Identificación de los factores clave que afectan el éxito del trasplante.
- Conocimientos sobre la inmunogenicidad del intestino delgado.
- Potencial para mejorar el cribado de fármacos inmunosupresores.
Conclusiones
- La técnica modificada mejora la viabilidad del trasplante de intestino delgado en ratones.
- Este modelo puede contribuir significativamente a la comprensión del rechazo inmune.
- Las investigaciones futuras pueden aprovechar este modelo para desarrollar estrategias inmunosupresoras más eficaces.
Preguntas frecuentes
Relevancia Ejecutiva para la Industria
El modelo de trasplante de intestino delgado en ratón aborda un vacío crítico en la investigación inmunológica preclínica al permitir el estudio mecanicista del rechazo del injerto y la eficacia de fármacos inmunosupresores. Este modelo permite la validación de dianas y la reducción mecanicista de riesgos para terapéuticos gastrointestinales en situaciones donde los modelos de órganos sólidos no logran reproducir respuestas inmunitarias específicas del intestino. La mayor factibilidad quirúrgica incrementa el rendimiento para la identificación de compuestos prometedores y la confianza predictiva en las fases iniciales del descubrimiento.
Aplicaciones Estratégicas en I+D de Biotecnología Farmacéutica
Descubrimiento Temprano y Validación de Blancos
- Valor científico: Permite la exploración de vías inmunogénicas específicas del intestino y mecanismos de rechazo.
- Valor operativo: Proporciona un sistema reproducible para validar dianas terapéuticas en la inmunidad mucosal.
- Valor predictivo: Apoya la reducción de riesgos en fases preclínicas mediante la modelización de complicaciones posoperatorias y respuestas inmunitarias similares a las humanas.
Desarrollo de ensayos y cribado
- Valor científico: Facilita la evaluación estandarizada de agentes inmunosupresores en un contexto clínicamente relevante de injerto contra huésped.
- Valor operativo: La técnica de sutura modificada reduce el fallo del procedimiento, mejorando la consistencia y escalabilidad del ensayo.
- Valor predictivo: Genera lecturas cuantitativas de engraftamiento y rechazo para la selección de compuestos y la optimización de fármacos prometedores.
Investigación Traductacional y Preclínica
- Valor científico: Modela la inmunología del trasplante intestinal humano, permitiendo el descubrimiento traslacional de biomarcadores.
- Valor operativo: Permite el monitoreo longitudinal de la función del injerto y la infiltración inmunitaria.
- Valor predictivo: Informa decisiones de avance ajustadas al riesgo mediante la predicción de las trayectorias de rechazo clínico.
Integración de la canalización y flujo de trabajo
El modelo se integra en el continuo de descubrimiento, desde la validación del blanco hasta la identificación de compuestos activos y las pruebas de eficacia preclínicas, especialmente para terapias inmunomoduladoras dirigidas a la inflamación gastrointestinal o al rechazo de trasplantes.
- Biología del Descubrimiento: Apoya la verificación de hipótesis sobre vías de puntos de control inmunitarios y señalización de citoquinas en el rechazo de injertos.
- Selección: Permite lecturas estandarizadas y cuantitativas de la supervivencia del injerto y de las puntuaciones histológicas de rechazo.
- Análisis: Proporciona puntos finales medibles, como el tiempo de reperfusión, la incidencia de trombosis y la infiltración de células inmunitarias, para análisis comparativo.
- Investigación Traducional: Conecta hallazgos mecanicistas con la validación preclínica de regímenes inmunosupresores.
- Reutilización Empresarial: Establece una plataforma quirúrgica reutilizable para pruebas iterativas de fármacos y estudios de mecanismo de acción.
Impacto Operativo y Empresarial
- Valor científico: Reduce la ambigüedad mecanicista en las respuestas inmunitarias intestinales y mejora la confianza en los objetivos.
- Valor operativo: Mejora la reproducibilidad mediante una anastomosis vascular simplificada y una técnica de sutura estandarizada.
- Valor estratégico: Aumenta la eficiencia del capital al mejorar las tasas de éxito del modelo y reducir el desperdicio experimental.
- Impacto en la cartera: Permite tomar decisiones basadas en datos sobre continuar o no con proyectos en las líneas de inmunomodulación, con una mejor estratificación de riesgos.
Consideraciones de Implementación
- Requiere experiencia en técnicas de microcirugía y anatomía de roedores.
- Depende de instrumental quirúrgico fino (10-0) y sistemas de magnificación para la anastomosis vascular.
- Exige protocolos estandarizados de cuidados posoperatorios para monitorear infecciones y la función del injerto.
- Las consideraciones de adaptación incluyen variaciones en la coincidencia de tamaño entre donante y receptor y el tiempo de isquemia.
- Las limitaciones prácticas incluyen la complejidad del modelo y la necesidad de una técnica aséptica rigurosa para prevenir la sepsis.
Preguntas frecuentes sobre biofármacos
Chapters in this video
8:09
10. locating inferior vena cava
35:32
Conclusion
11:57
20. harvesting donor small bowel
33:14
Sewing up Abdominal Cavity
8:15
11. injecting heparin into the inferior vena cava
17:15
6. suturing donor mesenteric artery to recipient aorta
27:50
3. cutting ileal end of donor small bowel
11:19
18. cutting away mesenteric tissue
12:09
Preparing Recipient Mouse for Small Bowel Transplantation
23:01
9. flipping donor small bowel in order to finish suture of mesenter
32:02
8. suturing jejunal end of donor small bowel to stoma
16:31
4. repeat procedure for aorta
1:18
Harvesting Small Bowel from Donor Mouse
8:36
12. cutting mesenteric artery
4:21
3. cleaning out small bowel contents before ligating ileum
25:56
12. releasing ligatures to open circulation to donor small bowel
2:46
2. clearing away tissue to allow ligation of small bowel
16:17
3. performing veinotomy on inferior vena cava
24:53
11. final suture for anastamosis of donor mesenteric artery to reci
1:20
1. performing Tail Pinch to Ensure Mouse is Anesthetized
4:50
4. ligating ileum
0:16
Introduction
5:20
5. exposing and ligating mesenteric vessels
13:29
2. clearing away tissue in order to apply ligatures
0:03
Title
27:20
1. clamping ileal end of donor small bowel
14:35
3. applying ligatures to inferior vena cava and inferior aorta
11:34
19. cutting portal vein
19:59
7. suturing donor portal vein to recipient inferior vena cava
26:47
Connecting Donor Small Bowel to Recipient Small Bowel
10:56
17. cutting ileal end of ligated small bowel
23:35
10. suturing donor mesenteric artery to other side of aorta
9:37
15. cutting away small bowel mesenteric tissue
7:28
8. ligating branch of portal vein
29:10
5. flipping small bowel clamps in order to suture other side of ana
30:20
6. removing clamps
6:18
6. exposing mesenteric artery which will be cut when small bowel is
15:15
1. placing donor small bowel in recipient mouse
10:27
16. cutting away mesenteric tissue until the portal vein is reached
31:14
7. creating stoma for jejunal end of donor small bowel
13:20
1. exposing inferior vena cava and aorta
15:03
Connecting Donor Small Bowel Circulation to Recipient Circulation
22:39
8. final suture for anastamosis of donor portal vein to recipient i
27:39
2. cutting recipient jejunum
9:23
14. cutting jejunal end of ligated small bowel
17:00
5. washing away blood from vessels with saline
6:42
7. exposing portal vein
7:58
9. exposing other side of mesenteric artery
15:56
puncturing inferior vena cava for veinotomy
8:54
13.clearing away tissue from mesentaric artery
28:04
4. suturing one side of donor ileum to recipient jejunum
32:40
9. cutting ligature to jejunal end of donor small bowel
