Medición de Coordinación motora en ratones

El objetivo general de este procedimiento es medir la coordinación motora en ratones. Esto se logra probando primero en la varilla del rotor de aceleración. A continuación, se prueba la coordinación motora en la barra onal.

El animal también puede ser probado en varillas estáticas. Por último, se puede medir el rendimiento en las barras paralelas. En última instancia, se pueden obtener resultados que muestran si el ratón tiene algún deterioro en la coordinación motora.

Por lo general, las personas nuevas en esta técnica tendrán dificultades debido a la dificultad de colocar correctamente el mouse en el aparato para todas las siguientes pruebas. Lleve a los ratones a la sala experimental de cinco a 20 minutos antes de la prueba para asegurarse de que estén completamente despiertos. La escena de la barra del rotor aquí fue construida en la Universidad de Oxford.

La varilla tiene tres centímetros de diámetro con una serie de crestas paralelas en su superficie, que ayudan a los ratones a agarrarla con mayor eficacia. Una brida a cada lado evita que el ratón se salga de la caña. Tienen 30 centímetros de diámetro y seis centímetros de distancia.

La varilla se asegura a 30 centímetros de la base del aparato. Se coloca una superficie acolchada suave en la base para amortiguar cualquier caída antes de comenzar la prueba. Prepare la varilla del rotor ajustando una velocidad de inicio de cuatro rotaciones por minuto y una tasa de aceleración de 20 rotaciones por minuto.

Para comenzar, sostenga el mouse por la cola y llévelo hacia la varilla en un ángulo de 45 grados por debajo de la horizontal. Suelta rápidamente al animal cuando esté casi tocando la varilla. Alternativamente, el ratón se puede bajar sobre una clavija y la clavija se utilizará para transferir el animal a la varilla.

Inicie la aceleración 10 segundos después de colocar el mouse en la varilla y observe la velocidad a la que se cae el mouse. Si el ratón se cae antes de los cinco segundos y es probable que se deba a una mala colocación por parte del experimentador, no se debe registrar el resultado y se debe reiniciar la prueba si el ratón se cae antes de los 10 segundos. Anote el tiempo y permita que el animal lo intente dos veces más.

En el caso de los animales que permanecen encendidos más de 10 segundos, registre la velocidad a la que cae el animal. De vez en cuando, el ratón puede dejar de caminar y, en consecuencia, algunos atacan alrededor de la vara antes de caer. Es útil notar la velocidad de este suceso.

El rendimiento se calcula como la velocidad media entre ensayos. Por ejemplo, un ratón que cae antes de 10 segundos una vez y luego permanece encendido hasta 12 rotaciones por minuto. El segundo tiempo anota cuatro más 12 dividido por dos, lo que equivale a ocho rotaciones por minuto.

La barra horizontal mide la caída, la fuerza y la coordinación de las extremidades, mientras que una barra de dos milímetros de diámetro es la más común. Las barras de mayor diámetro pueden proporcionar puntuaciones de rendimiento más refinadas. Las barras de latón de 38 centímetros de largo se mantienen a 49 centímetros sobre la superficie del banco mediante una columna de soporte de madera.

Las barras se mantienen bajo tensión cuando se colocan en las muescas de los soportes que se juntan ligeramente. Comience la prueba con la barra de dos milímetros. Sostenga el mouse por la cola y colóquelo en el banco frente al aparato.

Deslízalo rápidamente. Retrocede unos 20 centímetros para alinear su cuerpo perpendicular a la barra rápidamente. Levante al animal permitiéndole agarrar la barra horizontal en el centro con solo sus cuatro poros.

Suelte la cola mientras simultáneamente inicia un reloj de parada. Si el ratón no logra agarrar la barra y la colocación del experimentador puede ser la causa. No registre la caída y vuelva a examinar al animal después de un breve descanso.

Si el ratón cae antes de los cinco segundos, y esto aparentemente no se debe a una mala colocación por parte del experimentador, repita hasta tres veces en un intento de obtener una puntuación superior a cinco segundos. Registre el tiempo que cae el mouse o el tiempo hasta que un cuatro mal toca una columna con un tiempo máximo de prueba de 30 segundos, tome la mejor puntuación como el datu derecho para anotar la barra horizontal. Si la masa cae entre uno y cinco segundos, anota uno entre seis segundos y 10 segundos.

Anota dos entre 11 y 20 segundos. Anota tres entre 21 y 30 segundos. Anota cuatro cayendo después de 30 segundos o simplemente permaneciendo en la barra hasta 30 segundos.

Puntúa cinco, y el ratón también puntúa cinco si toca un extremo. Soporte con sus cuatro puertos en cualquier momento durante las pruebas. Si se obtiene una puntuación de cinco en la barra de dos milímetros, el animal puede ser probado en barras más gruesas después de un breve descanso.

El sistema de puntuación para las barras de cuatro y seis milímetros es el mismo que para la barra de dos milímetros, y la puntuación final es el total acumulado. Por lo tanto, un mouse que anota cinco en la barra de dos milímetros pero cae de la barra de cuatro milímetros después de 13 segundos. Puntúa cinco más igual a ocho.

En esta prueba de coordinación motora, se colocaron varillas o varillas de madera de espesor variable, de 35, 28, 22, 15 y nueve milímetros de diámetro, cada una de 60 centímetros de largo, fijadas por una abrazadera G a un estante de laboratorio a 60 centímetros del suelo. Se hace una marca a 10 centímetros del extremo cerca del banco para denotar la línea de meta. Para empezar, coloque el ratón en el extremo más alejado de la varilla más ancha, en dirección opuesta a la estantería, registre el tiempo que tarda el animal en orientarse hacia la estantería y ese tiempo total de tránsito.

Si el ratón se pone boca abajo y se aferra por debajo de la varilla durante la orientación, asígnelo arbitrariamente a la puntuación máxima de 120 segundos. El animal no se prueba en las otras cañas y también recibe un valor de tránsito máximo. Si el mouse se cae o alcanza el tiempo máximo de prueba de 120 segundos después de orientarse, no lo pruebe en varillas más estrechas.

También se asigna una puntuación máxima si el ratón se pone boca abajo mientras atraviesa la varilla después de la orientación, devuelve el ratón a la jaula de inicio y lo deja descansar antes de la prueba. La siguiente caña más pequeña. Coloque al animal en la vara más pequeña como se muestra anteriormente.

Si el mouse se cae antes de cinco segundos, reemplácelo y permita hasta dos intentos más. Registre el tiempo para invertir la varilla o hasta que el mouse se caiga. Para montar las barras paralelas soportan dos barras, de un metro de longitud y cuatro milímetros de diámetro, separadas 30 milímetros sobre un soporte de madera.

Columnas a 60 centímetros del suelo. Coloque el ratón en el centro de las dos barras con su eje longitudinal perpendicular a las barras. Ambos poros frontales deben estar en una barra y ambos poros traseros en la otra barra.

La ranura es similar a la de las varillas estáticas. Se toman dos medidas: el tiempo hasta que el ratón se orienta 90 grados a la posición inicial y el tiempo hasta que llega a uno de los soportes finales. Del mismo modo, la orientación y el tránsito deben lograrse sin que el animal se dé la vuelta, de lo contrario, se asigna el tiempo máximo.

Si el animal se cae antes de los cinco segundos, probablemente se deba a una mala colocación y el animal debe volver a ser examinado. Originalmente se usó una varilla estática para monitorear el progreso de la enfermedad en ratones mutantes con o sin enriquecimiento ambiental en sus jaulas domésticas. El programa de enriquecimiento retrasó drásticamente la aparición de la disfunción motora en la caña, que fue paralela a un retraso en la aparición de un mal agarre posterior.

Un signo general de mentación neurológica: los ratones infectados con raspadura mostraron una disminución en el rendimiento de la barra horizontal desde la semana 16 después de la inyección en las pruebas de varillas del rotor de la semana 18 y en las barras estáticas desde al menos la semana 19. Las lesiones del hipocampo no tuvieron ningún efecto sobre ninguna medida de la capacidad motora, pero 1 2 9 s dos ratones SV se vieron alterados en relación con la deformación C 57 black six en la biela del rotor y las varillas estáticas después de su desarrollo. Esta técnica allanó el camino para que los investigadores de la enfermedad de Huntington estudiaran los efectos del enriquecimiento ambiental en ratones mutantes de la enfermedad de Huntington.