Name: Caracterización fisiológicas, morfológicas y neuroquímicas de las neuronas modulada por el Movimiento (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-04-21T11:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 4 s
Description: Aprende a registrar la respuesta fisiológica de neuronas mamíferas durante el movimiento mediante grabación intracelular in vivo. Este método preserva conexiones sinápticas y permite correlacionar actividad neuronal con morfología y neuroquímica.

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Doy las gracias a Anthony Taylor para la formación inicial en la grabación en vivo intracelular y un Maxwell y David Brown para ayudar con el desarrollo inicial de la técnica de tinción intracelular. Doy las gracias a M. de plata en busca de ayuda con el macro collocalization. Muchos estudiosos con los que he colaborado siempre en perspectiva el desarrollo de esta técnica como R. Donga, Moritani M., Luo P., R. Ambalavanar. Esta técnica fue desarrollada con un apoyo considerable de las subvenciones del NIH DE10132, DE15386 y RR017971.

1. Preparación de los animales <ol><li> Anestesiar a ratas con pentobarbital sódico (50mg/kg IP) y colocarlo en una manta eléctrica. Afeitarse la piel que recubre el cráneo posterior con máquinas de cortar el animal. Comprobar que el animal para asegurar que un nivel quirúrgico de nivel de anestesia que se haya obtenido mediante la prueba de la ausencia de un reflejo de retirada y vocalización cuando los dedos queden atrapados, así como la ausencia de reflejo palpebral. Comprobar el nivel de anestesia cada 15 minutos y mantener un nivel quirúrgico de anesthetisa por medio de inyecciones de 15mg/kg de pentobarbital de sodio cada 45 minutos. </li><li> Utilice una técnica aséptica y hacer una incisión en la región inguinal, inmediatamente distal al pliegue formado por el abdomen y la cara interna del muslo y la inserción de una cánula (1mm de diámetro, Clay Adams) en la vena femoral y arteria femoral. Hacer una incisión en la región submandibular, reflejan los músculos infrahioideos. Haga una pequeña incisión en la tráquea e insertar una cánula (2 mm de diámetro) para permitir la ventilación. Tye una sutura alrededor del trachael cannual para asegurarlo en place.Monitor la presión arterial sistémica sistólica y diastólica, a través de la cánula arterial. Además de supervisar la retirada y el reflejo palpebral ahora monitor de presión arterial para evaluar el nivel de anestesia. Administrar anestesia adicional cuando sea necesario a través de la cánula venosa. </li><li> Lugar a la rata en un marco estereotáxico y realizar una craneotomía para exponer el cerebelo. Conecte la cánula traqueal a un ventilador de roedores. Ventilar al animal con un volumen de 2 cm 3 a una velocidad de 100/min con aire húmedo. Una presión positiva al final de la espiración de 1 cm H 2 O se debe mantener para evitar el colapso pulmonar. Cada 15 minutos hyperinflate los pulmones para prevenir la atelectasia. Luego, cubra la superficie del cerebro con aceite mineral caliente (30 ° C). Tenga cuidado de evitar el gran seno venoso situado directamente debajo de la unión entre los huesos parietal y interparietal. </li><li> Aplique el pegamento de cianoacrilato a una barra junto a un vibrador electromagnético y adjuntar la barra en el diastema de la mandíbula. Mover la mandíbula con señales de comando para el vibrador, ya sea una salida A / D o equipo generador de señal. </li><li> Coloque un electrodo de cloruro de plata siliver tierra debajo de la piel adyacente a la craneotomía. </li></ol> 2. Preparación de electrodos <ol><li> Fabricar microelectrodos de vidrio de cuarzo o aluminosilicato con un extractor de microelectrodos horizontal. </li><li> Rellene el microelectrodo con biotinamide 5-10% disuelto en 0,25 M KCl y 0,5 M tampón Tris-HCl (pH 7,6) o el 2% tetramethlyrhodamine en solución salina (pH 6). Compruebe la impedancia del electrodo con un probador de los electrodos. Para grabar desde los axones de gran diámetro que los electrodos con una impedancia de 60 Ω de 80 millones, de los axones y pequeñas interneuronas hacer los electrodos con una impedancia de 80 150MΩ. </li><li> Coloque el microelectrodo en la etapa de la cabeza del electrómetro. Visualizar el electrodo a través de un telescopio pequeño (20 veces con una retícula cerrada) que se fija en la posición detrás de la cabeza del animal. Usando el telescopio es importante porque permite a los electrodos que se stereotaxically posición con gran precisión. </li></ol> 3. Registro electrofisiológico y tinción intracelular <ol><li> Hacer una pequeña abertura en la piamadre y compensar en exceso la capacidad de retroalimentación de manera que cuando el electrodo toca el cerebro una señal de retroalimentación se produce. Esto permite la localización precisa de la superficie del cerebro. </li><li> Producen repetidos desplazamientos mandibulares y avanzar en el electrodo en el cerebro con un motor paso a paso. </li><li> Reconocer impalements neuronal de descensos en el potencial DC e identificar intrasomatic impalements por la actividad sináptica neuronal en curso. Zumbando el electrodo con una compensación excesiva de la capacidad o tocando rara vez producen una penetración celular de éxito. Debido a la alta impedancia de los electrodos, las respuestas neuronales son raramente observadas antes de la penetración. </li><li> Después de atravesar una neurona y la penetración se considera estable, caracterizar la respuesta neuronal utilizando la rampa, tenencia y movimiento de la mandíbula sinusoidal. 5 Mapa del campo receptivo de la neurona mediante el sondeo de la piel alrededor de la cabeza y la cavidad oral dentro de una sonda no conductores como un palo de madera. Si es relevante para el estudio, examinar la respuesta de la neurona a otros estímulos funcionalmente relevantes como la contracción muscular y los estímulos nocivos. 6 aferentes primarias nociceptivas receptores neuronales para responder a los estímulos nociceptivos. Anesthesetics generales, tales como el pentobarbital sódico no bloquean la conducción axonal en las neuronas aferentes primarias, sino que deprime la transmisión sináptica. Por lo tanto la conducción axonal en el axón neuronal aferente primaria se conserva. </li><li> Inyectar corriente continua (CC, 1-4NA) para un tiempo de inyección total de 15 70nA minutos. Monitor de la penetración del electrodo durante la inyección de corriente y suspender si el potencial de membrana se vuelve más positivo que-30mV.</li></ol> 4. Procesamiento de tejidos <ol><li> La eutanasia de los animales mediante una sobredosis de pentobarbital (140mg/kg IV) y perfusión vascular con un enjuague (0,9% NaCl 38 ° C que contiene 500 unidades de heparina y 2% 1ml xilocaína seguido de un 4% de paraformaldehído en tampón fosfato 0,1 M (pH 7,4) . </li><li> Quitar el cerebro y en la sección que el 50-100μm con un vibratome, ya sea en el plano frontal, sagital u horizontal. Secions se recogen flotando libre en PBS 25 ° C. </li><li> Proceso en el cerebro para DAB mediante la incubación de suero de cabra normal de 1-2% y 1% de Triton X-100 en PBS 0,01 M seguido de incubación en avidina biotina (1:50 Elite Vectastain). Reaccionar con secciones de níquel-DAB con H 2 O 2. Para el proceso de Texas Red, las secciones se incuban en complejo avidina-biotina (1:50) en PBS durante una noche a 4 ° C y luego se incuban en Texas el 4% DCS Red avidina en PBST a 4 ° C durante la noche. Contratinción secciones con un fluorescente Nissl mancha (NeuroTrace) 20 minutos a 23 ° C. </li><li> Si las neuronas se inyectó con rodamina, visualizar la neurona se inyecta directamente con un microscopio de fluorescencia (Ex 545nm). </li></ol> 5. La combinación de método con el etiquetado retrógrada, la inmunocitoquímica, la imagen confocal, análisis cuantitativo de colocalización El éxito de combinar esta técnica con otros métodos depende en gran medida el etiquetado intracelular buena. <ol><li> El método de visualizar aquí se puede combinar fácilmente con el etiquetado neuronal retrógrada. 7-10 Para ello, anestesiar al animal y utilizando una técnica aséptica, se inyecta un trazador neuronal como la peroxidasa de rábano picante (20% peroxidasa de rábano picante. VI Sigma, Sigma) y el 1% de germen de trigo aggultinated peroxidasa de rábano (Sigma) en las regiones objetivo periféricos como el músculo masetero. Este marcador neuronal se abordará en los axones periféricos y se transporta a través del transporte axonal de la motoneurona cuerpos celulares. Para el músculo masetero, 15μl de trazador se inyecta en el músculo con una microjeringa estéril de 10 microlitros. Los animales se colocan en un cojín de calefacción y control hasta que se recupere de la anestesia y luego se colocan en las jaulas de recuperación. Después de 24 horas, anestesiar a los animales y fisiológicamente caracterizan las neuronas y intracelularmente a las manchas. Luego perfundir el animal como se describió anteriormente y secciones proceso de tejido para detectar la presencia de HRP con tetrametilbenzidina (TMB) como cromógeno y tungstato sódico como el estabilizador y se intensificó con el cobalto. Se colocan en el 1% tungstato sódico disuelto en PBS 0,1 M (pH 6,5) y 0,0007% TMB disuelto en etanol absoluto y acetona a 15 ° C durante 20 min. Entonces reaccionan las secciones de tejido mediante la adición de 1,0 ml de 0,3% de H 2 O 2 por cada 100 ml de solución de incubación durante 60 minutos. Enjuague el tejido en PBS 0,1 M (pH 6,5) y el lugar en el 0,05% diaminobencidina (pH 7,4), el 0,02% de cobalto, y el 0,01% H 2 O 2 en PBS 0,1 M (pH 7,4) durante 10 minutos. a 37 ° C. Proceso de tejido para la visualización de la neurona inyectados con biotinamide como se describe y visualizar las relaciones entre la neurona sensorial y la etiqueta de una variedad de las motoneuronas. </li><li> La técnica se muestra aquí también pueden ser fácilmente combinados con immnocytochemistry. 6 A modo de ejemplo, immunocytochemically proceso del cerebro para sinaptofisina para localizar con precisión las sinapsis en las neuronas marcadas (Fig. 3). Para ello, se incuban las secciones del cerebro de ratón anti-sinaptofisina anticuerpos (1:10.000) por 2 días a 4 ° C y luego se incuban en anti-ratón FITC (1:400) durante 1 hora a 23 ° C. </li><li> Neuronas marcadas con marcadores fluorescentes o tratados con imágenes fluorescentes son ideales para la visualización de imagen confocal. La Figura 3 es un ejemplo de una sección óptica obtenida con microscopía confocal a través de un axón Bouton. (Fig. 3). Generar animaciones de neuronas marcadas por la adquisición de varias secciones ópticas a través de la neurona marcada (Fig. 4). </li><li> Neuronas marcadas con este método se puede utilizar para el análisis cuantitativo de colocalización. Para ello, utilice una macro de software a disposición del público en relación con NIH Image (que se encuentra en http://phy.ucsf.edu/ ° idl / colocalization.htm). Localizar sinaptofisina en terminales de los axones individuales mediante la combinación de etiquetado intracelular con inmunocitoquímica sinaptofisina 6. </li></ol> 6. Los resultados representativos: Un resumen de los resultados representativos que se pueden obtener con este método se ilustra en la Figura 1. Esta sola neurona cerebral se registró electrofisiológico durante el movimiento de la mandíbula y, como se puede ver claramente, la respuesta de esta neurona (Figura 1 abajo a la izquierda, la luz azul) fue modulada durante el movimiento. Esta neurona se le inyectó después biotinamide caracterización electrofisiológica y posteriormente procesadas para su visualización. La neurona reconstruida (Figura 1 medio, verde) puede ser realted a un punto de referencia anatómica, en este caso el núcleo motor del trigémino designado (línea roja). Sobre la base de la respuesta neuronal durante el movimiento y la reconstrucción esta neurona puede ser identificado como una neurona aferente del huso muscular secundaria. La figura 2 muestra un ejemplo representativo de la respuesta fisiológica de la neurona durante el desplazamiento mandibular. La respuesta de la neurona se representa como frecuencia de disparo instantáneo. Tenga en cuenta que la respuesta neuronal imita el desplazamiento mandibular que indica que esta neurona en particular proporciona retroalimentación sensorial relacionada con la posición mandibular. Figura 3 es una imagen de gran aumento de un axón intracelularmente manchadas combinado con tinción para sinaptofisina y una mancha de Nissl. Tenga en cuenta la colocalización de sinaptofisina (amarillo) en el bouton axón. Figura 4 es una animación de una sola neurona, fisiológicamente caracterizan y etiquetado intracelular. <img src="/files/ftp_upload/2650/2650fig1.jpg" alt="Figura 1" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Figura 1"> Figura 1. Descripción del método. Arriba a la izquierda: el desplazamiento mandibular. Grabación de media intracelular (verde) de una sola neurona (amarillo). La morfología de esta neurona se reconstruyó después de la grabación intracelular y la inyección. Contorno de color rojo indica la ubicación del núcleo motor del trigémino. Abajo a la izquierda: la respuesta fisiológica de esta neurona durante el movimiento de la mandíbula. <img src="/files/ftp_upload/2650/2650fig2.jpg" alt="Figura 2" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Figura 2"> Figura 2. Respuesta fisiológica Representante de una neurona sensorial solo músculo grabado en vivo durante el movimiento de la mandíbula. Tenga en cuenta la similitud de la respuesta neuronal de los desplazamientos mandíbula. <img src="/files/ftp_upload/2650/2650fig3.jpg" alt="Figura 3" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Figura 3"> Figura 3. Arborización terminal axonal con botones sinápticos (hinchazón de color rojo) de una neurona sensorial intracelularmente manchadas de que respondió en los músculos de sondeo. Posterior tratamiento inmuno sinaptofisina muestra la localización de sinaptofisina en el bouton axonal (amarillo). El verde es un Nissl tinción fluorescente. Figura 4. Animación del huso muscular primaria axón neurona aferente cuya respuesta fisiológica fue grabado en vivo durante los movimientos mandibulares, el axón entonces intracelularmente manchadas y procesados ​​para su visualización. <a href="/files/ftp_upload/2650/collateral4.avi">Descargar un vídeo de alta resolución de la Figura 4 aquí</a> <a href="/files/ftp_upload/2650/medres.mov">Descargar un vídeo de resolución media de la Figura 4 aquí</a>

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<li>Hassani, O. K., Henny, P., Lee, M. G., Jones, B. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((GABAergic+neurons+intermingled+with+orexin+and+MCH+neurons+in+the+lateral+hypothalamus+discharge+maximally+during+sleep%5BTitle%5D)+AND+%22Eur.+J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">GABAergic neurons intermingled with orexin and MCH neurons in the lateral hypothalamus discharge maximally during sleep.</a> Eur. J. Neurosci. 32, 448-457 (2010).</li>
<li>Inokawa, H., Yamada, H., Matsumoto, N., Muranishi, M., Kimura, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Juxtacellular+labeling+of+tonically+active+neurons+and+phasically+active+neurons+in+the+rat+striatum%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Juxtacellular labeling of tonically active neurons and phasically active neurons in the rat striatum.</a> Neuroscience. 168, 395-404 (2010).</li>
</ol>

Los experimentos con animales se realizaron de acuerdo con las guias y la regulación se establece en la Guía para el Cuidado y Uso de Animales de Laboratorio (NIH Publicación N º 86-23, revisado en 1985) y la Universidad de Maryland Cuidado de los Animales y el empleo Comisión.

El método se ilustra aquí es una poderosa técnica que aporta datos importantes en la función de neuronas individuales y cómo la respuesta de las neuronas individuales contribuye a los circuitos neuronales. 9 Este conocimiento es fundamental para entender la función sensorio. La mayor fortaleza de esta técnica es que permite la determinación de un gran número de parámetros de una neurona como la fisiología, la morfología y la morfología sináptica y la distribución. Cuando se combina con otras técnicas como la ...

<table border="1"><tbody><tr><th> Nombre del reactivo o equipo </th><th> Empresa </th><th> Número de catálogo </th><th> Comentarios </th></tr><tr><td> vibrador electromagnético </td><td> Ling Sistemas Dinámicos </td><td> V101 </td><td></td></tr><tr><td> generador de señal </td><td> Sistemas de retroalimentación </td><td> PFG605 </td><td> capaz de producir la señal de salida trapezoidal </td></tr><tr><td> electrodo de vidrio </td><td> Sutter Instrumentos </td><td> AF100-68-10 </td><td> con filamento </td></tr><tr><td> electrodo extractor </td><td> Sutter Instrumentos </td><td> Modelo P-2000 y P-80 </td><td></td></tr><tr><td> biotinamide </td><td> Vector Laboratories </td><td> SP-1120 </td><td> se almacenan a 4 ° C </td></tr><tr><td> Texas Red avidina DCS </td><td> Vector Laboratories </td><td> A-2016 </td><td></td></tr><tr><td> tetramethlyrhodamine </td><td> Las sondas moleculares </td><td> D-3308 </td><td> 3000 peso molecular, la lisina puede arreglar </td></tr><tr><td> ratón de anticuerpos anti-sinaptofisina </td><td> Chemicon </td><td> MAB5258 </td><td></td></tr><tr><td> fluorescentes Nissl mancha </td><td> Neurotrace, sondas moleculares </td><td> N-21480 </td><td></td></tr><tr><td> electrodo probador </td><td> Winston Electronics </td><td> BL-1000-B </td><td> para medir la impedancia del electrodo </td></tr><tr><td> electrómetro </td><td> Axon Instruments </td><td> Axoprobe 1A, 2B Axoclamp </td><td></td></tr></tbody></table>

caracterización fisiológicas, morfológicas y neuroquímicas de las neuronas modulada por el movimiento

Physiological, Morphological and Neurochemical Characterization of Neurons Modulated by Movement

El papel de las neuronas individuales y su función en los circuitos neuronales es fundamental para comprender los mecanismos neuronales de las funciones motoras y sensoriales. La mayoría de las investigaciones de los mecanismos sensoriomotores se basan en el examen de cualquiera de las neuronas, mientras que un animal es de 1,2 estática o grabar la actividad neuronal extracelular durante un movimiento de 3,4. Aunque estos estudios han proporcionado la base fundamental para la función sensorio, o bien no evaluar la información funcional que se produce durante un movimiento o están limitados en su capacidad para caracterizar el fenotipo de la anatomía, la fisiología y la neuroquímica de las neuronas. Una técnica se muestra aquí, que permite una amplia caracterización de las neuronas individuales en un movimiento en vivo. Esta técnica puede ser utilizada no sólo para estudiar las neuronas aferentes primarias, sino también para caracterizar a las motoneuronas y las interneuronas sensorio. Inicialmente la respuesta de una sola neurona se registra utilizando métodos electrofisiológicos en los diversos movimientos de la mandíbula, seguida por la determinación del campo receptivo de la neurona. Un trazador neuronal luego se inyecta en forma intracelular de la neurona y el cerebro se procesa para que la neurona se puede visualizar con microscopía de luz, de electrones o confocal (Fig. 1). La morfología detallada de la neurona se caracteriza se reconstruye de modo que la morfología neuronal se puede correlacionar con la respuesta fisiológica de la neurona (Figs. 2,3). En esta comunicación los detalles importantes claves y consejos para la implementación exitosa de esta técnica se proporcionan. Una valiosa información adicional puede ser determinada por la neurona en estudio mediante la combinación de este método con otras técnicas. Etiquetado neuronal retrógrada puede ser usado para determinar las neuronas con las que la sinapsis de neuronas marcadas, lo que permite la determinación detallada de los circuitos neuronales. Inmunocitoquímica se puede combinar con este método para examinar los neurotransmisores dentro de la neurona y la etiqueta para determinar los fenotipos químicos de las neuronas con las que la etiqueta sinapsis neuronal. La neurona etiqueta también puede ser procesado para microscopía electrónica para determinar las características ultraestructurales y microcircuitos de las neuronas etiquetados. En general, esta técnica es un poderoso método para caracterizar completamente las neuronas durante el movimiento en vivo lo que permite visión precisa del papel de la neurona en funciones sensoriales y motrices.

Una técnica es descrita para cuantificar la respuesta in vivo fisiológicas de las neuronas de mamíferos durante el movimiento y correlacionar la fisiología de las neuronas con morfología neuronal, fenotipo neuroquímicos y microcircuitos sináptica.

Caracterización fisiológicas, morfológicas y neuroquímicas de las neuronas modulada por el Movimiento

El papel de las neuronas individuales y su función en los circuitos neuronales es fundamental para comprender los mecanismos neuronales de los procesos sensoriales y motores...

El objetivo general de este procedimiento es registrar la respuesta fisiológica de neuronas individuales durante el movimiento y caracterizar además la morfología y la neuroquímica de estas neuronas. Esto se logra primero anestesiando y preparando quirúrgicamente al animal. El siguiente paso consiste en registrar electrofisiológicamente la respuesta intracelular de neuronas individuales durante el movimiento.Después de perfundir el animal y procesar el cerebro, el paso final consiste en visualizar y analizar la respuesta fisiológica y la morfología neuronal. En última instancia, las técnicas de registro neuronal intracelular, inmunoquímica y análisis se combinan para mostrar las modulaciones en el potencial de membrana de neuronas individuales durante el movimiento. La principal ventaja de esta técnica frente a métodos existentes como el cultivo celular es que se conservan las conexiones neuronales y las entradas sinápticas, y las neuronas no se encuentran exautotomizadas ni colocadas en medios artificiales. El día anterior, el experimento inyecta un trazador neuronal, como la peroxidasa de rábano picante, en regiones diana periféricas para etiquetar de forma retrógrada las neurona

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Investigación

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Neurociencia

Se describe un protocolo que permite imágenes de las mitocondrias en la vida neuronas a través de microscopía de fluorescencia durante largos períodos de tiempo. Imágenes durante períodos prolongados se lleva a cabo a través de lentivirus mediada por la expresión de una proteína mitocondrial, dirigida fluorescentes y el uso de una etapa de bajo costo-top incubadora que fue diseñado y construido en nuestro laboratorio.

La neuromodulación y mitocondrial de transporte: Imágenes en vivo en las neuronas del hipocampo durante largos períodos de tiempo

Numerosos estudios recientes han identificado mutaciones en las proteínas sinápticas asociadas a patologías cerebrales. Primaria neuronas corticales cultivadas ofrecen una gran flexibilidad en el examen de los efectos de estas proteínas asociadas a la enfermedad en la morfología y motilidad de la espina dendrítica.

Análisis de la morfología espina dendrítica en las neuronas del SNC cultivadas

Morfogénesis neuronal y la migración son eventos cruciales que subyacen el desarrollo adecuado del cerebro. Aquí se describen los métodos para manipular genéticamente las neuronas granulares de cerebelo en cultivo y el cerebelo en desarrollo para la evaluación de la morfología y las características migratorias de las neuronas.

La manipulación genética de las neuronas cerebelosa gránulo<em&gt; In Vitro</em&gt; Y<em&gt; En Vivo</em&gt; Estudiar Neuronal Morfología y Migración

Este protocolo utiliza técnicas de análisis y proyección de imagen (3D) tridimensionales para visualizar y cuantificar las mitocondrias del nervio específico. Las técnicas son aplicables a otras situaciones donde una señal fluorescente se utiliza para aislar un subconjunto de los datos de otra señal fluorescente.

Proyección de imagen tridimensional y análisis de las mitocondrias en las fibras de nervio humano Intraepidermal

La investigación del tráfico de membranas es crucial para entender las funciones neuronales. Aquí, se introduce un método para la cuantificación de la motilidad vesicular en las neuronas. Este es un método conveniente que puede adaptarse a la cuantificación del tráfico de membranas en el sistema nervioso.

Cuantificación de endosomas y de las motilidades de los lisosomas en neuronas cultivadas utilizando sondas fluorescentes

Este protocolo ofrece una digitalización de porciones de las tareas clínicas tradicionales comúnmente utilizadas para medir la cognición y el control motor en la enfermedad de Parkinson. Las tareas clínicas se digitalizan mientras que los ritmos biofísicos se registran de diferentes niveles funcionales de los sistemas nerviosos, que van desde voluntarios, espontáneos, automáticos a autonómicos.

Biomarcadores Digitales Dinámicos de la Función Motora y Cognitiva en la Enfermedad de Parkinson

El deterioro del transporte mitocondrial y la morfología están involucrados en diversas enfermedades neurodegenerativas. El protocolo presentado utiliza neuronas anticerebrales derivadas de células madre pluripotentes inducidas para evaluar el transporte mitocondrial y la morfología en paraplejia espástica hereditaria. Este protocolo permite la caracterización del tráfico mitocondrial a lo largo de los axones y el análisis de su morfología, lo que facilitará el estudio de la enfermedad...

Análisis del transporte mitocondrial y la morfología en neuronas derivadas de células madre pluripotentes inducidas por el hombre en paraplejia espástica hereditaria

Control del movimiento del ojo (o el seguimiento de los ojos) revela que en el espacio de los ojos persisten, cuándo y por cuánto tiempo. En este caso, se demuestra cómo el seguimiento de los ojos pueden ser utilizados para investigar la integridad de la memoria en las poblaciones de varios de los participantes, sin necesidad de informes verbales o explícita de lo contrario,.

Ojo vigilancia de los movimientos de la Memoria

El efecto de la ingravidez y hipergravedad en ambos procesos hemodinámicos y electrofisiológicos en el cerebro se va a seguir durante el vuelo parabólico con técnicas de EEG y NIRS. Un estudio de viabilidad de un experimento más complejo, que está previsto llevar a cabo durante el vuelo espacial a medio y largo plazo.

La coherencia entre la función cerebral cortical y rendimiento neurocognitivo en condiciones de gravedad ha cambiado

Neuronas olfativas del receptor (ORNs) convertir señales de olor primero en un receptor de corriente que a su vez desencadena los potenciales de acción que se transmiten a las neuronas de segundo orden en el bulbo olfatorio. Aquí se describe la técnica de pipeta de succión de grabar simultáneamente el receptor de odorizantes de la corriente inducida y los potenciales de acción de ORNs ratón.

Inducidas Odorante-respuestas registradas de neuronas olfativas del receptor utilizando la técnica de aspiración con una pipeta

Aprende a registrar la respuesta fisiológica de neuronas mamíferas durante el movimiento mediante grabación intracelular in vivo. Este método preserva conexiones sinápticas y permite correlacionar actividad neuronal con morfología y neuroquímica.

Caracterización fisiológicas, morfológicas y neuroquímicas de las neuronas modulada por el Movimiento

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