Name: La extracción de sangre de las ratas a través de la vena safena y por punción cardiaca (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2007-08-23T00:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 27 s
Description: Aprende dos técnicas de extracción sanguínea en ratas: vena safena sin anestesia y punción cardiaca terminal. Estos métodos son esenciales para estudios farmacocinéticos con mínimo estrés animal.

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La extracción de sangre de las ratas a través de la vena safena y por punción cardiaca Nota: Todos los procedimientos deben ser aprobados por el cuidado de los animales de su institución y el empleo. 1. Extracción de sangre de la vena safena <ol><li> Este procedimiento se realiza sin anestesia y se necesitan dos personas, una que se encarga de la rata, y el que lleva a cabo el sorteo. </li><li> Hacer un cono de una toalla o mantener la rata con guantes de manipulación de roedores, dejando una pata trasera al descubierto. </li><li> Afeitarse la parte posterior de la pierna con una cortadora eléctrica hasta que la vena safena es visible. Afeitarse un área lo suficientemente grande, por lo que no tiene pelo entre en contacto con el sitio de punción. Use una pequeña cantidad de crema para las manos no aromático para mantener el pelo afeitado no lejos del sitio de la punción. </li><li> Hacer un punto de compresión en la base de la pierna para hacer el bulto de la vena safena (similar al uso de un torniquete para extraer sangre de un humano o un animal de gran tamaño). Punción de la vena con una aguja 20G y saca la sangre a medida que sale con un microvette. De bombeo con la pierna le ayudará a sacar más sangre. Cuando haya recogido suficiente cantidad de sangre, coloque compresas limpias en el sitio de punción para detener el sangrado. </li></ol> 2. Extracción de sangre por punción cardiaca <ol><li> Este procedimiento requiere anestesia y es terminal. Los animales deben ser sacrificados inmediatamente al final de una punción cardíaca. </li><li> Prepare una jeringa de 5 ml con una aguja 23G1. </li><li> Profundamente anesthesize la rata y el cheque para la anestesia por la falta de movimiento espontáneo, la tasa de respiración lenta, y la falta de respuesta a los estímulos (como presionar un dedo del pie). Para garantizar la anestesia prolongada, coloque una jeringa que contiene una toalla de papel empapado en anestésico volátil en la nariz de las ratas durante el procedimiento. </li><li> Coloque el ratón sobre la espalda, de espaldas a usted. </li><li> Si usted es diestro, coloque el dedo índice izquierdo a nivel de las costillas inferiores, sin aplicar ninguna presión. El corazón se encuentra aproximadamente 1 cm por encima de este punto, ligeramente hacia la derecha. </li><li> La celebración de la jeringa en un ángulo de 45 grados, inserte la aguja entre dos costillas y ver una gota de sangre para entrar en la aguja. Esto es una indicación de que está en el corazón. Sin mover la jeringa, tire del émbolo para llenar la jeringa. Una vez que la jeringa se llena, con cuidado de desconexión de la aguja y se vacía en un tubo. La jeringa puede ser re-unido a la aguja para la elaboración de más sangre. Debe ser posible llegar a 5-10 ml de sangre de una rata 120-180 g. </li><li> Inmediatamente la eutanasia a la rata. </li></ol>

<ol><li>Van Herck, H., Baumans, V., Brandt, C. J. W. M., Boere, H. A. G., Hesp, A. P. M., Van Lith, H. A., Schurink, M., Beynen, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Blood+sampling+from+the+retro-orbital+plexus%2C+the+saphenous+vein+and+the+tail+vein+in+rats%3A+comparative+effects+on+selected+behavioural+and+blood+variables%5BTitle%5D)+AND+%22Laboratory+Animals%22%5BJournal%5D)">Blood sampling from the retro-orbital plexus, the saphenous vein and the tail vein in rats: comparative effects on selected behavioural and blood variables.</a> Laboratory Animals. 35, 131-139 (2001).</li>
<li>Luzzi, M., Skoumbourdis, E., Baumans, V., Conte, A., Sherwin, C., Kerwin, A., Lang, T., Morton, D., Barley, J., Moreau, E., Weilenmann, R. F., Reinhardt, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Collecting+blood+from+rodents%3A+a+discussion+by+the+laboratory+animal+refinement+and+enrichment+forum%5BTitle%5D)+AND+%22Animal+Technology+and+Welfare%22%5BJournal%5D)">Collecting blood from rodents: a discussion by the laboratory animal refinement and enrichment forum.</a> Animal Technology and Welfare. 4, 99-102 (2005).</li>
<li>Angelow, O., Schroer, R. A., Heft, S., James, V. C., Noble, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+comparison+of+two+methods+of+bleeding+rats%3A+the+venous+plexus+of+the+eye+versus+the+vena+sublingualis%5BTitle%5D)+AND+%22Jounal+of+Applied+Toxicology%22%5BJournal%5D)">A comparison of two methods of bleeding rats: the venous plexus of the eye versus the vena sublingualis.</a> Jounal of Applied Toxicology. 4, 258-260 (2006).</li>
<li>Beeton, C., Wulff, H., Barbaria, J., Clot-Faybesse, O., Pennington, M., Bernard, D., Cahalan, M. D., Chandy, K. G., Beraud, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Selective+blockade+of+T+lymphocyte+K%2B+channels+ameliorates+experimental+autoimmune+encephalomyelitis%2C+a+model+for+multiple+sclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Natl.+Acad%22%5BJournal%5D)">Selective blockade of T lymphocyte K+ channels ameliorates experimental autoimmune encephalomyelitis, a model for multiple sclerosis.</a> Proc. Natl. Acad. , 13942-13947 (2001).</li>
<li>Beeton, C., Pennington, M. W., Wulff, H., Singh, S., Nugent, D., Crossley, G., Khaytin, I., Chen, C. Y., Calabresi, P. A., Chandy, K. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Targeting+effector+memory+T+cells+with+a+selective+peptide+inhibitor+of+Kv1.3+channels+for+therapy+of+autoimmune+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Mol.+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Targeting effector memory T cells with a selective peptide inhibitor of Kv1.3 channels for therapy of autoimmune diseases.</a> Mol. Pharmacol. , 1369-1381 (2005).</li>
<li>Beeton, C., Wulff, H., Standifer, N. E., Azam, P., Mullen, K. M., Pennington, M. W., Kolski-Andreaco, A., Wei, E., Grino, A., Counts, D. R., Wang, P. H., LeeHealey, C. J., Andrews, B. S., Sankaranarayanan, A., Homerick, D., Roeck, W. W., Tehranzadeh, J., Stanhope, K. L., Zimin, P., Havel, P. J., Griffey, S., Knaus, H. G., Nepom, G. T., Gutman, G. A., Calabresi, P. A., Chandy, K. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Kv1.3+channels+are+a+therapeutic+target+for+T+cell+mediated+autoimmune+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Natl.+Acad.+Sci.+USA%22%5BJournal%5D)">Kv1.3 channels are a therapeutic target for T cell mediated autoimmune diseases.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. USA. , 17414-17419 (2006).</li>
<li>Beeton, C., Barbaria, J., Devaux, J., Benoliel, A. -M., Gola, M., Sabatier, J. -M., Bernard, D., Crest, M., Beraud, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Selective+blocking+of+voltage-gated+K%2B+channels+treats+experimental+autoimmune+encephalomyelitis+and+inhibits+T-cell+activation%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Immunol%22%5BJournal%5D)">Selective blocking of voltage-gated K+ channels treats experimental autoimmune encephalomyelitis and inhibits T-cell activation.</a> J. Immunol. , 936-944 (2001).</li>
<li>Devaux, J., Forni, C., Beeton, C., Barbaria, J., Beraud, E., Gola, M., Crest, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Myelin+basic+protein-reactive+T+cells+induce+conduction+failure+in+vivo+but+not+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroreport%22%5BJournal%5D)">Myelin basic protein-reactive T cells induce conduction failure in vivo but not in vitro.</a> Neuroreport. , 317-320 (2003).</li>
<li>Beeton, C., Chandy, K. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Induction+and+monitoring+of+adoptive+delayed+type+hypersensitivity+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Induction and monitoring of adoptive delayed type hypersensitivity in rats.</a> Journal of Visualized Experiments. 8, (2007).</li>
</ol>

La extracción de sangre de la vena safena es una manera conveniente de obtener pequeñas cantidades de sangre sin necesidad de anestesia. Si el muestreo repetido es necesario, consulte las normas para asegurarse de que no sacan mucha sangre de una rata. La extracción de sangre por punción cardiaca es una manera conveniente de obtener grandes cantidades de sangre, pero esto es un procedimiento terminal. El animal debe ser sacrificado al final de la extracción de sangre. Estas técnicas (como todas las técnicas de los animales v...

<table><tbody><tr><td>Aguja 20G 1/2</td><td>Herramienta</td><td>BD Biosciences</td><td>305176</td><td>Para puncionar la vena safena</td></tr><tr><td>Microvette 300</td><td>Herramienta</td><td>Sarstedt Ltd</td><td>20.1308.100</td><td>Para recolectar sangre de la vena safena</td></tr><tr><td>Recortadora eléctrica</td><td>Herramienta</td><td>Braintree Scientific, Inc.</td><td>CLP-32130</td><td></td></tr><tr><td>Aguja 23 G 1</td><td>Herramienta</td><td>BD Biosciences</td><td>305145</td><td>Para punción cardíaca</td></tr><tr><td>Jeringa plástica de 5 ml, con punta deslizable</td><td>Herramienta</td><td>Fisher Scientific</td><td>14-826-12</td><td>Para punción cardíaca</td></tr></tbody></table>

la extracción de sangre de las ratas a través de la vena safena y por punción cardiaca

Drawing Blood from Rats through the Saphenous Vein and by Cardiac Puncture

La extracción de sangre de los roedores es necesario para un gran número de los estudios in vitro e in vivo. Los sitios de extracción de sangre son numerosas en los roedores: retro-orbital sinusal, la vena yugular, vena maxilar, la vena safena, el corazón. Cada técnica tiene sus ventajas y desventajas, y algunos no han sido aprobados más en algunos países (por ejemplo, retro-orbital se basa en Holanda). Una discusión de las diferentes técnicas para la extracción de sangre están disponibles 3.1. Aquí se presentan dos técnicas para la extracción de sangre de las ratas, cada uno con sus aplicaciones específicas. Extraer la sangre de la vena safena, siempre y cuando se hace correctamente, provoca angustia mínima en los animales y no requiere anestesia. Esta técnica permite repetir sorteos de pequeñas cantidades de sangre, como necesarios para los estudios farmacocinéticos 4,5, la determinación de la química del plasma, o recuento sanguíneo 6. La perforación cardíaca permite la obtención de grandes cantidades de sangre de un solo animal (hasta 10 ml de sangre puede ser extraída de una rata de 150 g). Esta técnica es muy útil por lo tanto, como un procedimiento terminal cuando la extracción de sangre de la safena interna no sería una muestra suficientemente grande. Usamos punción cardiaca cuando necesitamos una cantidad suficiente de suero de una cepa específica de las ratas a crecer T líneas de linfocitos in vitro 4-9.

La extracción de sangre son necesarias en un gran número de estudios, por ejemplo para estudiar el perfil farmacocinética de un compuesto. En este sentido, se muestra cómo extraer la sangre de las ratas mediante dos técnicas: extracción de sangre de la vena safena o por punción cardiaca.

La extracción de sangre de las ratas a través de la vena safena y por punción cardiaca

La extracción de sangre de roedores es necesaria para un gran número de estudios, tanto in vitro como in vivo. Los sitios de extracción de sangre en los roedores son numerosos: ...

Hola, soy Christine Beaton. Soy investigadora asistente en el laboratorio de George Chen, del Departamento de Fisiología y Biofísica de la Universidad de California en Irvine. Y en el video que están a punto de ver con la ayuda de Adriana Garcia, una estudiante de posgrado del laboratorio.Voy a mostrarle dos técnicas para extraer sangre de ratas. La primera técnica que le mostraremos es cómo extraer sangre de la vena safena. Esta es una técnica muy útil si desea obtener pequeñas cantidades de sangre de la rata sin anestesia.Por ejemplo, si está realizando un estudio farmacocinético, que requiere pequeñas cantidades de sangre pero que se toman a intervalos regulares. La segunda técnica que le vamos a mostrar es la extracción de sangre mediante punción cardíaca. Esta es una técnica terminal, por lo que la rata debe sacrificarse al final de la extracción de sangre.Pero la ventaja de esta técnica es que puede proporcionar cantidades mucho mayores de sangre, varios mililitros. Así que una vez que hemos preparado la zona, aplicamos una loción cutánea común principalmente para evitar que el pelo se desprenda y entre en el tubo, así como para prevenir la coagulación de la sangre. Luego, co

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Research

Investigación

JoVE Journal

Biology

Biología

Cateterización crónica de los vasos sanguíneos de la rata es a menudo necesaria para la administración de sustancias, obtener muestras de sangre durante un período de tiempo o por mediciones directas consciente de la presión arterial. Cateterización arterial femoral de la rata y las mediciones correspondientes de la presión arterial en el animal consciente se ha demostrado.

El cateterismo femoral arterial y venosa para muestras de sangre, la Administración de Drogas y la presión arterial consciente y mediciones del ritmo cardíaco

Las muestras de sangre son útiles para evaluar biomarcadores de estados fisiológicos o enfermedades in vivo. Aquí describimos la metodología para muestrear sangre de la vena lateral de la cola en la rata. Este método proporciona muestras rápidas con un mínimo de dolor e invasión.

Toma de muestras de sangre de la vena lateral de la cola de la rata

Aquí, describimos un método de tomar muestras de sangre de la vena de cola simple en ratas no anestesiados mediante un sistema de tubo de aspiración. Este método reduce el riesgo de exposición directa a sangre y simplifica la toma de muestras múltiples de una sola venopunción.

Repetidos de muestras de sangre de vena de la cola de las ratas no anestesiados con un sistema de colección de sangre vacío

Aquí, presentamos un protocolo para recolectar muestras de sangre de la vena subclavia de rata.

Punción de la vena subclavia como método alternativo de recogida de muestras de sangre en las ratas

Se han demostrado técnicas microquirúrgicas detalladas para establecer un modelo de rata de canulación de vena yugular a largo plazo para la recolección secuencial de sangre en el mismo animal. Los parámetros fisiológicos y hematológicos han sido monitoreados durante la fase de recuperación de la rata. Este modelo se ha aplicado para estudiar la farmacocinética del polifenol administrado por vía oral sin inducir estrés animal.

Habilidades microquirúrgicas para establecer la canulación permanente de la vena yugular en ratas para el muestreo de sangre en serie del medicamento administrado por vía oral

El presente protocolo describe un método simple y eficiente para la recolección dinámica y en tiempo real de sangre de corazón de rata utilizando la técnica de microdiálisis.

Extracción dinámica continua de sangre del corazón de rata mediante una técnica de microdiálisis no invasiva

Aquí, presentamos un protocolo para ofrecer alternativas de recolección de sangre rápidas, fáciles y confiables para el modelo de rata. Describimos tres métodos diferentes de muestreo de sangre según el contexto: punción de la vena de la cola bajo anestesia o en un animal consciente, y punción de la vena dorsal del pene bajo anestesia.

Punción modificada de la vena de la cola y la vena del pene para el muestreo de sangre en el modelo de rata

Aquí presentamos una combinación de métodos efectivos de restricción en ratas y punción de la vena subclavia que permiten la recolección de sangre rápida, segura y repetida en ratas sin anestesia.

Muestreo de sangre de la vena subclavia en ratas conscientes

La punción cardíaca subclavia es un método sencillo y fiable para recoger sangre terminal en ratones. Es fácil de manejar y garantiza muestras de alta pureza.

Recogida de sangre cardíaca mediante punción subclavia en ratones

Las células asesinas naturales son una pequeña población de linfocitos. Aquí se muestra la forma de aislar estas células de la sangre humana por selección negativa, utilizando un kit de StemCell Technologies. Las células obtenidas son viables y sin tocar por los anticuerpos, y por lo tanto, listo para ser utilizado para una serie de procedimientos.

Enriquecimiento de las células NK a partir de sangre humana con el Kit de RosetteSep de Tecnologías de la StemCell

Aprende dos técnicas de extracción sanguínea en ratas: vena safena sin anestesia y punción cardiaca terminal. Estos métodos son esenciales para estudios farmacocinéticos con mínimo estrés animal.

La extracción de sangre de las ratas a través de la vena safena y por punción cardiaca

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