Barnes Maze: Un método para evaluar el aprendizaje espacial y la memoria en animales de laboratorio

El laberinto de Barnes es una plataforma circular con agujeros igualmente espaciados alrededor de su borde y una caja de escape debajo de un agujero de destino. Los animales de laboratorio navegan por el laberinto para encontrar el agujero objetivo y escapar de estímulos innatamente aversivos como espacios abiertos y luces brillantes.

Para comenzar, coloque al sujeto, por ejemplo, un ratón, en el centro del laberinto debajo de una cámara oscura. Luego, levante la cámara y suelte al animal en la arena. Para motivar al sujeto a entrar efectivamente en el agujero objetivo, use un estímulo ligeramente aversivo como el sonido ultrasónico.

La prueba finaliza cuando el ratón entra en el agujero objetivo o ha transcurrido un tiempo predefinido. El aprendizaje espacial y la memoria se miden durante cada prueba registrando el número de agujeros que el sujeto exploró y el tiempo que tardó en completar la prueba, así como mapeando el camino del animal y la navegación espacial.

Antes de comenzar el procedimiento de prueba de Barnes Maze, limpie todos los componentes del laberinto con agua y etanol al 70%. Cuando los componentes estén secos, ensamble el laberinto y asigne aleatoriamente cada mouse a un orificio objetivo para usar durante el período de prueba.

Los agujeros se pueden etiquetar del 1 al 20 en la parte inferior del laberinto o en el exterior del perímetro del laberinto, donde no son visibles desde el interior del laberinto. Para comenzar una prueba de entrenamiento, reemplace el disco de orificio asignado con una caja negra de 23 por 11 centímetros y use bandas elásticas y ganchos para sujetar firmemente la caja al laberinto.

Luego, coloque un mouse en el centro del laberinto de Barnes debajo de una taza y deje que el mouse se aclimate durante 30 segundos. Al final del período de aclimatación, comience la grabación de video y encienda la luz y el generador de ruido ultrasónico.

Levante la taza a través de un mecanismo de cuerda para evitar sesgar el rumbo inicial del animal y encienda un temporizador detrás de una cortina de observación. Siga los movimientos del animal en una hoja de papel con un diagrama del laberinto y use el diagrama para analizar las estrategias de búsqueda del ratón, así como para determinar la cantidad de agujeros que se exploraron en el cuadrante opuesto al objetivo.

Cuando el ratón entre en el agujero objetivo, cúbralo con un aglutinante opaco pesado y apague el generador de ruido ultrasónico. Si el ratón no ha entrado en el objetivo después de 5 minutos, acorrale al animal en el agujero del objetivo. Luego, deje que el mouse permanezca en la caja de destino durante 1 minuto sin ser molestado, asegurándose de apagar el ruido ultrasónico. Luego, regrese al animal a su jaula.

Cuando se hayan probado todos los ratones, revise manualmente su registro para rastrear el movimiento general del ratón para determinar la cantidad de agujeros incorrectos explorados antes y después de encontrar el objetivo, así como la cantidad de agujeros desde el agujero objetivo hasta el primer agujero explorado y cualquier comportamiento de aseo notable.