Perfusión hepática murina in vivo: un método para infundir el hígado de roedor con solución a través de la vena porta

Después de anestesiar y preparar al roedor, ubique la vena porta y deslice un hilo debajo de ella. Haz un nudo suelto alrededor de la vena porta sin tensarla. Esto estabilizará un catéter intravenoso más adelante durante el protocolo.

Sosteniendo la aguja de un catéter intravenoso biselada y paralela a la vena porta, insértela en la luz, el espacio dentro de la vena. Retraiga la aguja y empuje el catéter a través de la vena hasta el área venosa ramificada dentro del hígado.

Después de estabilizar el catéter, aumente la velocidad de la bomba peristáltica. Inmediatamente, el hígado debe palidecer a medida que la sangre es reemplazada por líquido de perfusión. Cortar un vaso sanguíneo importante para drenar aún más sangre y líquido de perfusión del hígado.

Apriete el vaso cortado varias veces para inflar el hígado y asegurarse de que esté completamente desprovisto de sangre. Cambie la bomba para que perfunda el tampón en el hígado. Finalmente, repita brevemente la inflación del hígado, teniendo cuidado de no reventar el hígado de su tejido conectivo.

Para colocar el catéter de la vena porta, primero, use la parte posterior de un fórceps para mover los intestinos hacia el lado derecho