0 visualizaciones • 5:51 min. • April 30th, 2023
Primero, aplique gel de ecocardiografía al transductor de ultrasonido y al pecho afeitado de un ratón anestesiado asegurado a una placa de calentamiento. Coloque el transductor a la izquierda del esternón, mirando hacia el lado derecho del cuello, para obtener una vista a través del corazón llamada vista paraesternal de eje largo.
Gire el transductor 90 grados en el sentido de las agujas del reloj para la vista paraesternal de eje corto. Con esta vista, grabe imágenes en modo M para capturar el movimiento del corazón a lo largo del tiempo a medida que late. Para medir las dimensiones del ventrículo izquierdo, identifique cuatro interfaces tisular-fluido de referencia en las imágenes grabadas.
Estos son la interfaz entre la cavidad ventricular derecha y la pared anterior del ventrículo izquierdo; entre esta pared y la cavidad ventricular izquierda; entre esta cavidad y la pared posterior del ventrículo izquierdo; y entre esta pared y el pericardio.
Luego, calcule las distancias entre estas cuatro interfaces. Repita las mismas mediciones cuando el corazón esté en diástole, o esté relajado, y cuando esté en sístole, o esté contraído.
Para comenzar, mientras sostiene ligeramente a un ratón por la cola, use una balanza de laboratorio estándar para determinar el peso corporal del animal. Después de anestesiar el mouse de acuerdo con el protocolo de texto, apriete ligeramente un pie trasero y observe si la pierna se retrae. Use una afeitadora comercial para roedores para afeitar el lado izquierdo del tórax y la axila izquierda.
Coloque al animal en una almohadilla tibia a 40 a 42 grados Celsius en una posición poco profunda del lado izquierdo, con la cabeza a las 12 en punto y la cola a las 6 en punto. Luego, use cinta adhesiva para fijar el brazo izquierdo, la pierna izquierda y la cola. Aplique gel de ecocardiografía precalentado en el pecho afeitado y la cabeza del transductor.
A continuación, coloque el transductor de ecocardiógrafo paraesternal izquierdo, dirigiéndolo hacia el lado derecho del cuello para obtener una vista bidimensional del eje largo paraesternal a nivel del músculo papilar. Luego, gire el transductor 90 grados en el sentido de las agujas del reloj para obtener una vista de eje corto. Establezca una configuración de profundidad mínima y un zoom para maximizar la calidad de imagen y la velocidad de fotogramas. Ajuste la velocidad de barrido al máximo. Grabe imágenes en modo M guiadas en 2D en una vista de eje corto. Graba al menos 3 series de 3 bucles de cine de latidos del corazón para cada animal.
Después de obtener grabaciones exitosas, retire la cinta de las extremidades y la cola. Limpie el gel de ecocardiografía del tórax del ratón, la almohadilla térmica y el transductor. Deje al ratón bajo observación sobre la almohadilla térmica, cubierta con un pañuelo de papel para evitar la exposición innecesaria a la luz y la pérdida de calor hasta que se despierte. Luego, vuelva a colocar al animal en la jaula.
Analice las imágenes grabadas en modo M desde una vista de eje corto para determinar las dimensiones y la función del ventrículo izquierdo o del VI. Usando la identificación de la interfaz tejido-sangre en las imágenes almacenadas, mida el grosor de la pared anterior del VI en sístole y diástole, los diámetros telesistólico y telediastólico internos del VI y el grosor de la pared posterior del VI en sístole y diástole. Mida las dimensiones diastólicas en el momento de las dimensiones diastólicas máximas aparentes del VI y las dimensiones telesistólicas del VI al final de la excursión sistólica más anterior de la pared posterior del VI. Toque la pantalla táctil en el icono "Analizar" y luego en el icono "LVAWd". Coloque el calibrador electrónico en la interfaz entre la cavidad ventricular derecha y la pared anterior del VI en diástole.
A continuación, coloque el calibrador electrónico en la interfaz entre la pared anterior del VI y la cavidad del VI para obtener el grosor de la pared anterior diastólica del VI. Coloque el calibrador en la interfaz entre la cavidad del VI y la pared posterior del VI para obtener el diámetro interno y diastólico del VI. Coloque el calibre en la interfaz entre la pared posterior del VI y el pericardio para obtener el grosor de la pared posterior diastólica del VI.
Para las dimensiones sistólicas del VI, toque la pantalla táctil en el icono "DAVI" y coloque el calibrador electrónico en la interfaz entre la cavidad ventricular derecha y la pared anterior del VI en sístole. Coloque el calibrador electrónico en la interfaz entre la pared anterior del VI y la cavidad del VI para obtener el grosor de la pared anterior sistólica del VI. Coloque el calibrador en la interfaz entre la cavidad del VI y la pared posterior del VI para obtener el diámetro interno y sistólico del VI. Coloque el calibrador en la interfaz entre la pared posterior del VI y el pericardio para obtener el grosor de la pared posterior sistólica del VI.