Criopreservación basada en vitrificación: una técnica de enfriamiento ultrarrápido para preservar muestras biológicas a temperaturas muy bajas para su almacenamiento a largo plazo

La vitrificación, una técnica de criopreservación ultrarrápida, permite enfriar y almacenar células y tejidos vivos a temperaturas extremadamente bajas durante períodos muy largos.

Para vitrificar un tejido tumoral recién extraído, primero, tome el tejido en una placa de cultivo. Extirpe cualquier región necrótica, región que contenga grasa o coágulos de sangre del tumor. Lave el pañuelo para eliminar cualquier rastro de sangre.

Corta el tejido en rodajas del grosor adecuado. Ahora, transfiera las rodajas a un tubo que contenga una solución de vitrificación que constituya DMSO, o dimetilsulfóxido, y sacarosa. Estos componentes actúan como crioprotectores para proteger las células contra el daño por congelación.

Incubar a baja temperatura. El DMSO, un crioprotector que penetra en las células, se difunde a través de la membrana celular y reemplaza el agua en las células para evitar la formación de cristales de hielo intracelulares. Al mismo tiempo, la sacarosa, un crioprotector no permeable, actúa extracelularmente facilitando la deshidratación celular y reduciendo la formación de cristales de hielo intracelulares para mitigar el riesgo de muerte celular.

Coloque las rodajas de tumor