Aislamiento peritoneal de neutrófilos de baja densidad: una técnica para obtener neutrófilos de baja densidad a partir de líquido de lavado peritoneal mediante la clasificación de células activadas magnéticamente

Los neutrófilos de baja densidad, o LDN, son una subpoblación distinta de neutrófilos que se encuentra en cantidades elevadas durante condiciones patológicas como el cáncer gastrointestinal. Los LDN se pueden aislar de los lavados de la cavidad peritoneal o del líquido de lavado de los pacientes.

Primero, filtre el líquido de lavado para eliminar los restos de tejido. Centrifugar el filtrado para obtener un gránulo que contenga células sanguíneas, incluidas las LDN. Volver a suspenderlo en un tampón adecuado. Coloque esta suspensión sobre un medio de gradiente de densidad adecuado óptimo para el aislamiento de LDN.

Centrifugar para separar los diferentes componentes sanguíneos en función de sus densidades relativas. Los glóbulos rojos más densos forman la capa inferior, mientras que la fracción plasmática menos densa forma la capa superior. Las LDN menos densas ocupan la capa intermedia junto con otras células mononucleares.

Transfiera la capa intermedia a un tubo nuevo que contenga un reactivo de bloqueo. Los componentes del reactivo bloquean los sitios de unión no específicos en todas las superficies de las células no diana y aumentan la especificidad de la LDN durante el etiquet