Establecimiento de un modelo de cocultivo tridimensional de ganglios de raíz dorsal murina y células cancerosas: un modelo in vitro para estudiar la invasión de células cancerosas perineurales

La invasión perineural o PNI se refiere a la migración de células cancerosas a lo largo de los nervios y su posterior invasión al perineuro, un microambiente adecuado para el crecimiento y la metástasis del cáncer.

Para imitar la PNI in vitro, comience agregando una gota de matriz extracelular o suspensión de ECM en una placa de cultivo de modo que tome la forma de un hemisferio. Ahora, incube la placa de cultivo para reforzar las características estructurales y funcionales del andamio 3D.

A continuación, coloque con cuidado un ganglio de la raíz dorsal o DRG previamente cosechado, un grupo de neuronas sensoriales, en el centro de la gota semisólida de ECM. Incubar para incrustar el DRG dentro de la gota de ECM.

A continuación, agregue un medio de cultivo adecuado e incube. La ECM suplementada con nutrientes favorece la germinación de DRG en pequeñas proyecciones nerviosas llamadas neuritas que crecen radialmente hacia la circunferencia de la gota.

Retire el medio gastado para preparar la gota de ECM para el ensayo posterior. La semilla tiñe fluorescentemente las células cancerosas adherentes sobre la gota. Debido a la forma hemisférica, las células cancerosas se dan la vuelta y se