Cocultivo de células de glioblastoma en neuronas modeladas: una técnica para monitorear la migración de células de glioblastoma en neuronas de hipocampo de rata in vitro

El glioblastoma posee células madre que migran a lo largo de los tractos axonales de las neuronas mielinizadas para invadir lugares distantes en el cerebro. Para recapitular la migración de glioblastoma o células GBM en neuronas in vitro, comience tomando un cubreobjetos de vidrio.

Active el cubreobjetos mediante un tratamiento con plasma de oxígeno y cebe con un agente funcionalizante. Este tratamiento facilita el acceso a los productos químicos en los pasos posteriores. Agregue una solución pegilada al cubreobjetos e incube. Esta solución recubre el cubreobjetos evitando la adhesión de neuronas en lugares aleatorios.

Dispense un polímero fotoiniciador en el cubreobjetos y móntelo en la cámara de imágenes. Coloque la cámara en la platina de un microscopio de fluorescencia. Una vez dentro, la iluminación UV activa las moléculas fotoiniciadoras localmente en las áreas designadas correspondientes a los micropatrones previstos.

Las moléculas fotoiniciadoras activadas escinden la capa PEG subyacente, generando el patrón deseado. Ahora, agregue la solución de laminina e incube. La laminina, una glicoproteína, se deposita en lugares específicos donde se ha eliminado la capa de PEG. Siemb