Aislamiento de bacterias conjuntivales comensales basado en hisopos: una técnica para aislar bacterias comensales de la conjuntiva de un modelo murino

La conjuntiva del ojo alberga bacterias comensales. Esta microflora autóctona protege el ojo de las infecciones activando las células inmunitarias para atacar cualquier microbio dañino que ingrese a los revestimientos de los ojos.

Para aislar las bacterias comensales, coloque un ratón anestesiado en posición lateral. Tome un hisopo ocular estéril humedecido en un medio adecuado. Inserte la punta del hisopo húmedo en la región conjuntival medial del ojo izquierdo. Presione el globo ocular y mueva el hisopo hacia adelante y hacia atrás a lo largo de la conjuntiva para recolectar una población comensal diversa.

Retire el hisopo y revuélvalo en un tubo que contenga medios de enriquecimiento microbiano. Este paso libera las bacterias atrapadas de la malla de algodón del hisopo en el medio. Deseche el hisopo e incube el tubo para facilitar la aparición del crecimiento bacteriano.

Dispense unas gotas del medio enriquecido inoculado con hisopo ocular en una placa de agar de sangre en el patrón deseado e incube. La caseína y las peptonas de soja presentes en el medio suministran el nitrógeno necesario para la síntesis de péptidos, mientras que el cloruro de sodio mantiene el equilibrio osmó