Modelo de pancreatitis biliar aguda: un método para generar un modelo de ratón de pancreatitis biliar aguda mediante infusión de conducto pancreático

El conducto pancreático transporta enzimas digestivas y se conecta con el conducto biliar común cerca del intestino. Estos conductos forman un canal donde las sales biliares activan las enzimas digestivas antes de salir al intestino.

Cuando los cálculos biliares obstruyen este canal, la bilis fluye hacia atrás, activando las enzimas digestivas en el páncreas, lo que provoca pancreatitis biliar aguda, una afección inflamatoria grave. Para imitar esta condición en un modelo de ratón, prepare un ratón anestesiado en posición supina.

Incidir en la parte superior del abdomen, debajo del pecho. Luego, tire de la parte superior del intestino delgado con el páncreas y fije sus extremos laterales para acceder a la región periampular, una estructura anatómica compleja que incluye la abertura del conducto pancreático.

Asegure los extremos proximal y distal del conducto biliar común para evitar cualquier fuga a otros órganos. A continuación, conecte una jeringa llena de solución de taurocolato de sodio a una bomba de infusión. El taurocolato de sodio es una sal biliar que activa las enzimas para la digestión de las grasas.

Ahora, inserte la aguja en la región periampular y comience a perfundir a la velocidad y concentración óptimas durante la duración deseada. Después de la perfusión, retire la aguja y las suturas. Vuelva a colocar el intestino en el peritoneo.

Sutura la incisión. Deje que el mouse se recupere. Eventualmente, el taurocolato de sodio ingresa al páncreas y activa las enzimas digestivas, causando daño pancreático.

Después de verificar la profundidad de la anestesia con un pellizco en el dedo del pie, limpie el área abdominal de un ratón anestesiado con una solución de povidona yodada al 5%. Con una recortadora, elimine el vello entre el pecho y la parte inferior del abdomen y limpie un área quirúrgica de aproximadamente 2 centímetros cuadrados con alcohol al 70%. Inmovilizar al animal en la tabla quirúrgica y utilizar unas tijeras para cortar 5 milímetros de piel horizontalmente en la parte superior del abdomen y 1 centímetro por debajo de la apófisis xifoides. Repita el corte en el peritoneo.

Para realizar la laparotomía con una exposición mínima de la cavidad, utilizando un tractor tire del hígado hacia la cabeza aproximadamente a 1 centímetro del intestino y localice la región del páncreas y el duodeno. Con fórceps, levante el hígado hacia la cabeza del animal. Tirando suavemente de la porción del intestino delgado, fije los dos extremos laterales con una sutura de polipropileno 6-0 para una mejor vista de la porción distal del tubo del conducto biliar común.

Con un clip de microvasos, ocluya temporalmente el conducto biliar común proximal. Exponga el órgano fuera de la cavidad abdominal. Luego, realice una oclusión temporal del conducto biliar común distal con un 8-0 sutura. Para acceder al conducto biliar común, punte la región periampular, que aparece como una parte blanquecina de la pared del intestino delgado, con una aguja de 0,4 milímetros conectada a un tubo de polietileno de 0,54 milímetros. Ponga en marcha la bomba de infusión para la infusión de solución de taurocolato de sodio al 2,5% a una velocidad constante de 10 microlitros por 10 gramos de peso corporal durante 3 minutos.

Después de la infusión, retire el clip del microvaso, el 8-0 sutura y la aguja de inyección del conducto biliar pancreático. Sutura el abdomen con una sutura de polipropileno monofilamento no absorbente 6-0. El tiempo entre la laparotomía y la sutura final no debe ser superior a 30 minutos. Después de la cirugía, aloje a los animales en cajas de polietileno forradas con virutas de madera y agua y comida ad libitum.