Aislamiento de células intersticiales de válvula de ratón: un método enzimático para aislar y cultivar VICs de válvula aórtica de ratón

0 visualizaciones • 4:51 min. • July 8th, 2025

La válvula aórtica del corazón es una estructura de tres valvas compuesta por las células intersticiales de la válvula interna o VIC distribuidas por toda la matriz extracelular densa y las células endoteliales de la válvula suprayacente o VEC.

Para aislar los VIC, primero, prepare un ratón sacrificado en posición supina. A través de la incisión abdominal y torácica de la línea media, exponga el corazón. Haga una pequeña hendidura entre la aurícula izquierda y el ventrículo seguida de perfusión salina para drenar la sangre. Cortar la aorta ascendente a nivel del arco aórtico y cosechar el corazón.

Seccionar y desechar los dos tercios distales de los ventrículos antes de diseccionar longitudinalmente la porción restante del corazón para revelar las valvas de la válvula aórtica en forma de "U". Extirpe los folletos y enjuague con un tampón frío para eliminar la sangre.

Posteriormente, tratar las valvas con una solución de colagenasa de baja concentración e incubar. En bajas concentraciones, la colagenasa, una enzima proteolítica, solo descompone parcialmente la matriz extracelular, desalojando los VEC superficiales de las valvas.

Centrifugar y reemplazar el sobrenadante que contiene

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Aislamiento de la válvula aórtica