Bandas del arco aórtico transversal en modelo de ratón: una técnica mínimamente invasiva en ratones para la inducción de alta presión en el ventrículo izquierdo

La constricción aórtica transversa mínimamente invasiva o banda del arco aórtico es un procedimiento simplificado para generar un modelo de ratón de enfermedad cardiovascular. Comience con un ratón anestesiado en posición supina. Afeita el cuello y la región del pecho. Realice una incisión en la línea media para exponer la capa muscular subyacente.

Corte a través de la capa muscular para acceder a la glándula tiroides y el esternón. Luego, separe los músculos traqueales y corte el esternón para revelar la glándula timo subyacente. Separe los lóbulos del timo entre sí para revelar el arco aórtico transverso y las arterias carótidas. Coloque una aguja curva debajo del arco aórtico y empújela hacia afuera entre la pared del vaso.

Pase una ligadura a través de esta perforación y coloque un espaciador en el bucle para ajustar el diámetro del bucle. Ahora, apriete la sutura alrededor de la aorta para ocluir el vaso. Esto aumenta la velocidad del flujo sanguíneo en la arteria carótida derecha, lo que provoca un aumento de la presión arterial en la aorta ascendente y el ventrículo izquierdo.

A continuación, retire el espaciador y corte el hilo. Luego, reposicione los órganos y sutura la piel. Transfiera el ratón a la jaula de recuperación y controle su función cardíaca. La banda aórtica induce una sobrecarga ventricular izquierda, lo que lleva a un engrosamiento de las paredes de la cámara y una disminución del gasto cardíaco.

Antes de comenzar el procedimiento, use un portaagujas para curvar las puntas de dos a cuatro agujas de calibre 30 y monte las agujas en aplicadores de algodón individuales. A continuación, desafila una aguja de calibre 27 y usa el portaagujas para doblar la punta 90 grados. Luego, alise la punta sobre una superficie dura para hacer un espaciador de 0,4 milímetros. Después de confirmar el nivel apropiado de sedación por falta de respuesta al pellizco del dedo del pie, aplique ungüento en los ojos del animal y coloque el ratón sobre una almohadilla térmica calentada a 37 grados Celsius en posición supina.

Asegure las extremidades a la almohadilla térmica con cinta quirúrgica. Luego, desinfecte la piel con tres toallitas consecutivas con solución de alcohol y povidona yodada y coloque un paño estéril con un campo de operación expuesto sobre el animal. Para comenzar el procedimiento de ligadura, use un bisturí estéril para abrir la piel en la posición de la línea media del cuello y el pecho. Luego, bajo un microscopio de disección, use tijeras romas para separar suavemente los tejidos conectivos y tirar de la glándula tiroides hacia la cabeza.

Con las agujas curvas, separe la capa muscular de la tráquea en la línea media hacia ambos lados del animal y use las tijeras romas para cortar el esternón aproximadamente 5 milímetros hasta la segunda costilla. Abra la incisión con fórceps curvos y use una aguja curva para separar los lóbulos del timo y la pared torácica inferior. El arco aórtico transverso y dos arterias carótidas serán claramente visibles en este punto.

Coloque la aguja curva debajo del arco y use la punta para hacer una perforación entre la pared del vaso y el tejido conectivo del otro lado. Use la aguja para colocar una sutura de monofilamento 6-0 debajo del arco aórtico y coloque el espaciador previamente preparado en el bucle. Fije la sutura en su lugar con un nudo doble y retire suavemente el espaciador.

Después de confirmar una constricción exitosa del nudo, corte los extremos de la sutura y use una sutura de seda 6-0 para cerrar la pared torácica con un patrón de sutura interrumpido simple, seguido del cierre de la piel con una sutura de monofilamento 6-0 en un patrón de sutura continua. Luego, aplique una solución de povidona yodada en el sitio de sutura y coloque al animal en una jaula precalentada para su recuperación y monitoreo postoperatorio.