0 visualizaciones • 2:52 min. • July 8th, 2025
Los embriones de ratón se utilizan como sistemas modelo para estudiar la embriogénesis temprana de mamíferos. Para recuperar embriones de ratón perinatales en la etapa deseada de desarrollo embrionario, comience con un ratón preñado sacrificado en posición supina.
A continuación, esterilice su área abdominal y haga una incisión transversal en la pared abdominal para revelar los cuernos uterinos subyacentes. Los cuernos uterinos son estructuras tubulares largas que contienen una cadena de embriones. Ahora, separe con cuidado los cuernos uterinos del abdomen extirpándolos del tejido circundante.
Transfiera los cuernos uterinos cosechados a un plato que contenga tampón. Enjuague los cuernos uterinos para eliminar los restos de tejido y la sangre. Además, haga una incisión entre los sitios de implantación a lo largo de los cuernos uterinos para separar cada embrión. Extirpar la decidua, la capa placentaria materna, junto con el disco placentario derivado del embrión.
A continuación, retire la pequeña estructura membranosa extraembrionaria que rodea al embrión y que le proporciona nutrición: el saco vitelino. Finalmente, retire la membrana amniótica, la membrana extraembrionaria más interna que consiste en un saco lleno de líquido que rodea y protege al embrión, para liberar el embrión de ratón.
Los embriones perinatales recuperados se pueden utilizar para estudiar el desarrollo temprano de los mamíferos.
Tijeras y pinzas de disección limpias con etanol al 70%. Para recolectar embriones perinatales en E18.5 o E19.5, primero, eutanasia a ratones preñados mediante inhalación de dióxido de carbono. Luego, realice la dislocación cervical de acuerdo con las pautas de los NIH.
A continuación, rocíe etanol al 70% en la superficie abdominal ventral del animal. Luego, usando las tijeras de disección estériles y las pinzas, abra la cavidad abdominal eventualmente. Levante todo el útero y sepárelo del cuerpo en las puntas de los cuernos uterinos. Luego, enjuague todo el útero con 1x PBS en una placa de Petri.
Cortar el útero segmentariamente con unas tijeras de disección y extraer la decidua placentaria con pinzas de disección para exponer los embriones en sacos vitelinos. Retire primero el saco vitelino y luego retire la membrana amniótica con pinzas de disección para liberar los embriones perinatales.