0 visualizaciones • 4:02 min. • July 8th, 2025
Comience con un ratón hembra anestesiado en posición lateral derecha sobre una plataforma quirúrgica. A continuación, afeite el abdomen del ratón y esterilice el área. Haga una incisión paralumbar en la piel y diseccione los músculos abdominales para exponer la cavidad abdominal.
Ahora, ubique una de las almohadillas de grasa ovárica, el tejido adiposo que rodea los ovarios. Los oviductos conectan los ovarios a estructuras tubulares largas llamadas cuernos uterinos. Además, exteriorice suavemente el ovario junto con la almohadilla de grasa ovárica, colocándola sobre una gasa húmeda para mantener el tejido hidratado.
Ahora, identifique la bolsa ovárica, la membrana delgada que encapsula el ovario y el extremo del oviducto. Hacer una incisión en la bolsa opuesta al hilio ovárico, que forma el borde entre el ovario y el ligamento ovárico. El ligamento ovárico conecta estructuralmente el ovario con el cuerno uterino.
Después de exponer el ovario, retírelo suavemente de la bolsa ovárica y sujete el hilio ovárico para extirpar el ovario. Transfiera el ovario extirpado a una placa de cultivo que contenga solución salina fría.
Almacene el ovario de ratón intacto compuesto por unidades funcionales: los folículos ováricos, cada uno de los cuales contiene un ovocito, hasta su uso posterior.
Antes de comenzar el procedimiento, confirme el nivel adecuado de sedación pellizcando los dedos de los pies y aplique ungüento en los ojos del animal. Coloque el ratón en posición supina sobre una pila de toallas de papel calientes, y comenzando justo debajo de las costillas y moviéndose distalmente, use cortadoras de pelo de cuchilla número 40 para eliminar un cuadrado de pelo de 2 a 3 centímetros unos pocos milímetros laterales a la línea media a cada lado del animal, con una tira de pelo de 1 a 2 centímetros que cubra la línea media.
Después de administrar analgesia, transfiera al animal a un campo quirúrgico estéril calentado en posición supina y use una gasa empapada en etanol al 70% de 2 por 2 centímetros seguida de un exfoliante de betadine para desinfectar el área quirúrgica. Luego, haga una incisión paralumbar de 1 a 1.5 centímetros en una de las áreas quirúrgicas y dos tijeras para diseccionar la piel de la fascia subyacente.
Luego, haga otra incisión a través de la fascia y diseccione lateralmente debajo de la fascia lo más superficialmente posible hasta llegar a la cavidad abdominal. Coloque un paño quirúrgico de gasa de 2 por 2 centímetros sobre la incisión y humedezca la gasa con solución salina estéril.
Con unas pinzas pequeñas, localiza el tejido adiposo que rodea el ovario y extrae suavemente la almohadilla de grasa y el ovario sobre la cortina. La almohadilla de grasa ovárica aparecerá más blanca que el tejido adiposo circundante. Coloque una pinza Bulldog de 1.5 pulgadas en la almohadilla de grasa, teniendo cuidado de no obstruir la bolsa ovárica, para mantener el tracto en su lugar durante el procedimiento.
Use un microscopio de disección para identificar la bolsa ovárica. Luego, agarre la bolsa con dos pinzas de relojero y haga una incisión en la bolsa en el lado opuesto del hilio ovárico para exponer el ovario.
Antes de decidir dónde abrir la bursa, intente visualizar un bolsillo en la bolsa donde colocará el nuevo ovario antes de suturar. Solo abra la bolsa hasta donde sea necesario para extirpar el ovario endógeno.
Retire suavemente el ovario de la bolsa y sujete el hilio ovárico con pinzas de relojero para extirpar el ovario y evitar el sangrado. Luego, coloque el ovario donante en un vidrio de reloj que contenga solución salina estéril a 4 grados Celsius y coloque una cubierta suelta sobre el vidrio.