Imágenes intravitales: un método para la observación a nivel celular del páncreas de ratón a través de una ventana de imagen estabilizada

Las imágenes intravitales implican la visualización de células de un animal vivo a través de una ventana de imágenes implantada en el animal. Permite la observación a largo plazo de la dinámica celular sin comprometer sus funciones.

Para comenzar, tome un ratón transgénico anestesiado previamente implantado con una ventana de imagen pancreática apoyada en una placa de metal. La placa base separa espacialmente el páncreas del intestino, reduciendo así los artefactos de movimiento de movimientos fisiológicos como el peristaltismo.

El ratón transgénico expresa la proteína verde fluorescente o GFP bajo el promotor del gen de la insulina expresado en las células beta de los islotes en el páncreas.

A continuación, sujete firmemente la cola del ratón y rocíe desinfectante para eliminar cualquier contaminante de la superficie. Inserte un catéter en la vena lateral de la cola. Inyecte una solución que contenga anticuerpos marcados con una sonda fluorescente roja en la vena de la cola. Estos anticuerpos se unen a las células que recubren los vasos sanguíneos, tiñéndolos de rojo.

Ahora, cambie el mouse a una configuración de microscopía intravital. Inserte la ventana de imágenes pancreáticas