JoVE Encyclopedia of Experiments
Biología
0 vistas • 3:58 min • July 8th, 2025
La resección apical de un ratón neonatal es un procedimiento para extirpar el vértice ventricular izquierdo del corazón. La lesión resultante activa los macrófagos cardíacos neonatales que promueven los procesos celulares para la reparación cardíaca. Sin embargo, esta capacidad regenerativa se limita en la edad adulta, lo que lleva a la insuficiencia cardíaca. El trasplante de macrófagos cardíacos neonatales al corazón adulto puede restaurar la función cardíaca.
Para comenzar, coloque un ratón neonatal en hielo para inducir hipotermia que adormece al ratón. Transfiera y prepare el ratón inconsciente en una plataforma quirúrgica. Ahora, bajo un estereoscopio, haga una incisión horizontal en el lado izquierdo del tórax y separe los músculos subyacentes para visualizar el corazón.
Aplique presión sobre el pecho y el abdomen para exteriorizar el corazón. Corte con cuidado el tejido del ápice ventricular hasta que el sangrado exponga la cámara ventricular izquierda. Con un hisopo de algodón, presione el corazón contra la cavidad torácica. Sutura la pared torácica incisa y aplica pegamento para tejidos para unir la piel. Posteriormente, transfiera el ratón a una manta térmica para detener la hipotermia. Luego, traslade el ratón neonatal operado a la jaula de su madre para una pronta recuperación.
Después de la resección apical, los macrófagos cardíacos residentes se acumulan en el sitio lesionado. Posteriormente, estos macrófagos se pueden aislar para trasplantarlos al corazón adulto.
Comience por preenfriar la plataforma operativa de bronce durante la noche a menos 20 grados centígrados. Saca el ratón anestesiado de la nevera y colócalo en la plataforma. Ancle el ratón en posición supina con cinta adhesiva médica. Coloque la plataforma operativa con el mouse debajo de un estereoscopio y desinfecte el pecho del mouse con una almohadilla de preparación empapada en betadine y alcohol al 70%.
Incidir la piel con un corte de 1 centímetro en la cuarta área intercostal de la cavidad torácica y separar los músculos intercostales con tijeras microquirúrgicas hasta acceder al corazón. Presione alternativamente el pecho y el abdomen con la ayuda de dos fórceps hasta que el corazón se exteriorice fuera del pecho, sin ningún daño mecánico.
Coloque las costillas debajo y encima de la pequeña incisión como una fijación natural para inmovilizar el corazón. Localice el vértice del ventrículo izquierdo y corte un diámetro de 1 milímetro de tejido del ápice ventricular con unas tijeras de iridectomía. Confirme que la cámara ventricular izquierda esté expuesta y comience a supurar.
Presione suavemente el corazón hacia la cavidad torácica con un hisopo de algodón. Sutura los músculos, las costillas y la piel usando 8-0 suturas de prolina y limpie el ratón a fondo después de la operación. Transfiera el mouse de la plataforma de operación a una manta calefactora de 37 grados para calentar el cuerpo inmediatamente después de la operación.
Confirme la anabiosis del ratón observando los signos de restauración espontánea de la respiración, el cambio de color de la piel de pálido a rosa y el movimiento de las extremidades. Lleve el ratón operado a su madre, una vez que se haya recuperado. Mezcle el ratón operado y los materiales de anidación de su madre si es necesario.