0 visualizaciones • 3:21 min. • July 8th, 2025
Los vasos linfáticos están presentes en la dermis de la piel y su función es eliminar el exceso de líquido intersticial del tejido. El daño a los vasos linfáticos provoca una acumulación excesiva de líquido en el espacio intersticial y un aumento en la deposición subcutánea de tejido fibroso y adiposo. Estos cambios resultan en linfedema.
Para generar linfedema en la cola murina, tome un ratón anestesiado y colóquelo en posición prona. Realice una escisión de piel circunferencial de espesor total en un sitio adecuadamente distante, distal a la base de la cola. Haga una incisión en otro sitio de la cola inferior al primer corte.
Haga una incisión vertical en la piel conectando las dos incisiones prefabricadas. Con este corte, extirpe el parche cutáneo superpuesto para exponer las venas laterales y los vasos linfáticos.
Tome una jeringa que contenga un tinte de seguimiento de color e inyéctelo por vía subcutánea cerca del final de la cola, haciendo que los vasos linfáticos se vean azules. Secar los vasos linfáticos, envolver el sitio de la herida y monitorear al ratón durante el tiempo deseado.
La microdisección detiene el flujo de linfa en los vasos y el líquido se acumula en el espacio tisular. En consecuencia, el linfedema sostenido se observa como hinchazón de la cola del ratón dorsal al sitio quirúrgico.
Para comenzar, coloque al ratón sedado de 8 semanas de edad en esternón y prepare la cola con alcohol isopropílico al 70%. Use un calibrador para medir el diámetro de la cola en incrementos de 5 milímetros a partir de 20 milímetros desde la base de la cola. Marque una incisión circunferencial de 3 milímetros en la cola a 20 milímetros de la base.
Bajo un aumento microscópico quirúrgico, realice una escisión meticulosa de piel de espesor total de 3 milímetros, dejando intacta toda la vasculatura subyacente. Incidir una marca circunferencial superior, primero a través de la dermis, seguida de una incisión circunferencial de espesor total a 3 milímetros distal a la primera incisión. Haga una incisión vertical perpendicular de espesor completo para conectar las dos incisiones, luego use una pastilla fina dentada para agarrar un borde de ataque y diseccionar profundamente dentro del plano avascular hasta la dermis y superficial hasta la adventicia venosa, con microtijeras.
Inyecte 0,1 mililitros de azul de isosulfán al 1% por vía subcutánea proximal a la punta de la cola. Identifique los dos canales linfáticos que aparecen azules debido a la inyección, adyacentes a las venas laterales de la cola. Seccionar los linfáticos con cuidado, diseccionando un plano entre la vena lateral y el linfático con unas tijeras microquirúrgicas rectas. Pase la punta de una hoja de tijera entre el vaso linfático y la vena lateral, y cierre las hojas para cortar el vaso linfático. Cuando termine, cubra la herida de la cola con un apósito transparente adherente estéril.