Posicionamiento de la sonda Doppler láser: una técnica para implantar la sonda sobre la arteria cerebral media para la medición del flujo sanguíneo en un modelo murino

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La arteria cerebral media, o M-C-A, es un vaso cerebral prominente que suministra sangre oxigenada al cerebro.

Para medir el flujo sanguíneo dentro del MCA, coloque un ratón anestesiado en posición prona. Haga una pequeña incisión en el cuero cabelludo entre la oreja izquierda y el ojo izquierdo para ubicar el hueso temporal del cráneo. Corta las capas musculares adyacentes y retíralas para visualizar el MCA debajo del hueso del cráneo.

Coloque el soporte de la sonda que contiene la sonda Doppler láser sobre el MCA. Este paso permite implantar la sonda cerca de la arteria. Aplique pegamento quirúrgico para sujetar la sonda en su posición. Con más pegamento, cierre la piel alrededor de la sonda implantada y cubra el sitio de la herida.

Conecte la sonda a un dispositivo Doppler láser. La sonda enfoca un rayo láser a una frecuencia particular en una región estrecha del MCA. Posteriormente, los glóbulos rojos que fluyen en la arteria absorben el rayo láser.

Al estar en movimiento, estas células dispersan el láser, provocando un cambio Doppler, un cambio aparente en la frecuencia de las ondas emitidas. El detector captura estos diminutos cambios de frecuencia para medir el flujo sanguíneo dentro de la arteria.

Prepare un soporte para la sonda Doppler láser cortando la punta de una punta de pipeta de 10 microlitros. Una vez que el ratón esté completamente anestesiado, colóquelo en posición prona en el área de operación. Inserte suavemente la sonda rectal para controlar la temperatura durante los procedimientos quirúrgicos. Después de desinfectar el sitio quirúrgico, corte el cuero cabelludo entre la oreja izquierda y el ojo para exponer el hueso del cráneo.

A continuación, corte y retire el músculo temporal para visualizar las múltiples arterias cerebrales o MCA debajo del cráneo. Fije la parte exterior de la punta, sosteniendo la sonda o fibra Doppler láser en la parte superior del MCA izquierdo con pegamento, y cierre la piel para que la piel también quede pegada. Aplique dos o tres gotas de pegamento endurecedor para acelerar el proceso. Asegúrese de que la fibra Doppler láser no esté pegada y se pueda quitar fácilmente del soporte de la punta en cualquier momento.