Biopsia de pellizco guiada por colonoscopia en un modelo de ratón: una técnica para visualizar y extraer muestras de tejido del colon de ratón

En condiciones patológicas, la colonoscopia permite la visualización del colon y la extracción de tejido mediante biopsia de pellizco para un análisis detallado de las heridas inflamatorias.

Para realizar una biopsia de pellizco guiada por colonoscópico en un ratón, comience con un ensamblaje de biopsia. El conjunto contiene una unidad de conexión, una vaina de endoscopio con un colonoscopio preinsertado de diámetro óptimo. El colonoscopio está conectado a una fuente de luz, una fuente de video, un puerto de gas y un puerto de instrumentos para pinzas de biopsia.

A continuación, prepare un ratón anestesiado en posición prona en la plataforma de colonoscopia. Tire de la cola hacia arriba y use una aguja de sonda para infundir el ano con un tampón adecuado para eliminar cualquier materia fecal. Luego, inserte el colonoscopio en el ano y avance hacia el recto. Continúe moviendo el colonoscopio más hacia el colon mientras bombea gas para mantener el colon inflado.

A continuación, saque las pinzas del puerto de instrumentos y abra las mordazas. Gire las pinzas en ángulo recto para inducir una herida de profundidad óptima. Las heridas que son demasiado superficiales o demasiado profundas dan como resultado una herida superficial o una perforación del colon, respectivamente. A continuación, con pinzas de biopsia, pellizque el tejido del colon. El tejido extraído y la herida inducida se pueden analizar más a fondo para comprender la fisiopatología.

Antes de comenzar el procedimiento, inserte un endoscopio de orificio rígido de 1,9 milímetros en una funda de endoscopio y conecte el endoscopio ensamblado a la fuente de luz y al dispositivo de imágenes de video según las instrucciones del fabricante. Use el tubo provisto para conectar la bomba de aire a la válvula de gas en el lado izquierdo de la funda, al lado del canal de trabajo.

Asegúrese de que el canal de trabajo esté en la posición abierta e inserte pinzas de biopsia de 3 Fr a través del canal de trabajo. Avance las pinzas hasta el extremo de la vaina sin sobresalir de la vaina.

A continuación, coloque el ratón anestesiado en una plataforma de estadificación endoscópica en su lado ventral y confirme el nivel apropiado de sedación por falta de respuesta al reflejo del pedal. Después de aplicar ungüento para los ojos, llene una jeringa de 3 mililitros con una aguja de sonda para ratas adjunta con PBS a temperatura ambiente e inserte la aguja aproximadamente 1 centímetro en el ano del ratón. Infundir suavemente con PBS hasta que se haya eliminado el material fecal. Varios gránulos fecales deben salir del ratón junto con el PBS que se infundió.

Inserte el endoscopio ensamblado 0,5 centímetros en el ano y avance las pinzas de biopsia hacia la luz despejada del recto hasta que las "mandíbulas" completas de las pinzas estén más allá del extremo de la vaina. Gire las pinzas 90 grados para que las mandíbulas se abran en una orientación este-oeste, abra las puntas y avance las pinzas aproximadamente 1 centímetro, cerrando y retrayendo las pinzas con un movimiento rápido y suave para recolectar la biopsia. Para evitar insuflar completamente el colon mientras se realiza la biopsia, deje abierto el lado derecho de la válvula de gas.