Aislamiento de miofibras: una técnica para obtener miofibras individuales a partir de músculo extensor largo de los dedos (EDL) de ratón

Comience con un ratón sacrificado en posición supina. Esterilice su extremidad posterior. Extirpe quirúrgicamente la piel y la fascia, una delgada envoltura de tejido conectivo debajo de la piel, para exponer los músculos subyacentes de las extremidades posteriores.

Ubique el músculo tibial anterior o TA en el lado lateral de la tibia. Sosteniendo el tendón distal TA, separe el músculo del tejido subyacente. Corte el músculo cerca de la rodilla para extirpar el músculo TA, revelando el músculo extensor largo de los dedos subyacente o músculo EDL ubicado en el compartimento anterior de la extremidad posterior.

Haga una incisión en el tendón EDL distal y tire del músculo EDL hacia la rodilla. Corte el tendón EDL proximal para extirpar el músculo EDL. Transfiera el músculo recolectado a un tubo con medios precalentados que contengan enzimas colagenasa e incube durante el tiempo adecuado. Las colagenasas descomponen el tejido conectivo que rodea cada fibra muscular o miofibra dentro del músculo. Este paso de digestión afloja las miofibras de la capa interna del músculo.

Después de la incubación, transfiera cuidadosamente el músculo digerido a una placa de pocillos múltiples que conteng