Monitorización multisistémica de anomalías epilépticas en conejos: un método para el registro simultáneo de vídeo EEG, ECG, capnografía y oximetría durante las convulsiones inducidas

En la epilepsia, un estallido repentino de actividad eléctrica en el cerebro conduce a anomalías neurológicas y cardiorrespiratorias. Estas anomalías incluyen convulsiones, señales eléctricas anormales en el cerebro, arritmia, latidos cardíacos irregulares y apnea, cese transitorio de la respiración, que se pueden evaluar mediante un método de monitoreo multisistémico.

Para realizar un monitoreo multisistémico en un modelo animal, comience con un conejo restringido con electroencefalograma, o EEG, y electrocardiograma, o ECG, preimplantados. Los electrodos de EEG y ECG ayudan a monitorear la actividad cerebral y los ritmos cardíacos en tiempo real, respectivamente. A continuación, coloque un oxímetro sobre la oreja derecha del conejo y un capnógrafo sobre la nariz y la boca del conejo para registrar los parámetros respiratorios.

Afeita la superficie posterior de la oreja izquierda del conejo para visualizar la vena marginal de la oreja. Limpie el oído con un antiséptico para esterilizar la superficie y dilatar la vena. Luego, inserte una cánula en la vena del oído y asegúrela. Conecte la cánula a un sistema de perfusión que contenga un reactivo inductor de convulsiones. Ahora, inyecte la concentración deseada del reactivo en la vena del conejo y permita que se propague más en el cerebro.

Las moléculas inductoras de convulsiones se unen al sitio antagonista-modulador del ácido gamma-aminobutírico, o receptores GABA, causando la despolarización prolongada de las neuronas. A partir de entonces, aumente periódicamente la dosis y controle cuidadosamente los parámetros para lograr evidencia visual de anomalías epilépticas.

Antes de registrar la respuesta del EEG-ECG a la administración de medicamentos intravenosos, afeite la superficie posterior de la oreja del conejo y use etanol al 70% para desinfectar el sitio y dilatar la vena marginal del oído. Canule con cuidado la vena marginal del oído con un angiocatéter de calibre 25 y coloque un tapón de inyección en el extremo del catéter. Pegue con cinta adhesiva una férula creada a partir de tres trozos enrollados de gasa en la oreja para asegurar el catéter en su lugar y mantener la oreja en posición vertical. Inyecte 1 mililitro de 10 unidades USP por ml de solución salina heparinizada para mantener la patente del catéter.

Cuando haya finalizado el registro inicial, inyecte solución salina suplementada con 1 a 10 mg / kg del medicamento de interés en el catéter una vez cada 10 minutos. Después de cada dosis, controle cuidadosamente el video-EEG-ECG-capnografía-oximetría para detectar cualquier anomalía neurocardíaca, eléctrica y respiratoria, o evidencia visual de actividad epileptiforme. Tenga en cuenta estos cambios en tiempo real, así como durante el análisis posterior.