JoVE Encyclopedia of Experiments
Biología
0 vistas • 3:17 min • July 8th, 2025
La porción anterior del ojo está cubierta por la córnea, una capa transparente que permite la transmisión de rayos de luz. La córnea se extiende hacia la esclerótica, un tejido protector blanco alrededor del ojo. La parte del ojo que consiste en la córnea rodeada por un anillo delgado de la esclerótica es el botón corneoescleral.
Para extirpar el botón corneoescleral, coloque un ojo porcino intacto en una placa de Petri. Retire la conjuntiva, una cubierta mucilaginosa alrededor de la esclerótica, junto con los músculos extraoculares circundantes para acceder a la cubierta escleral. Trate el ojo con una solución desinfectante adecuada para eliminar cualquier microorganismo contaminante de la superficie del ojo.
Lave el desinfectante con una solución tampón. Transfiera el ojo desinfectado a una placa de cultivo fresca. Haga una incisión en la esclerótica cerca del límite corneal. Usando esta abertura, haga un corte circunferencial completo para dividir el ojo en dos fragmentos.
Visualice el lado interior del segmento frontal para ubicar la capa uveal unida a la esclerótica. Este tejido consiste en iris pigmentado, un cuerpo ciliar en forma de anillo y una porción de la capa coroides vascular. Separa la úvea para visualizar la capa corneoescleral. Guarde el botón en una solución tampón estéril para realizar más ensayos.
Use fórceps estériles para transferir el globo ocular a una placa de Petri. Retire la conjuntiva y el tejido muscular alrededor del globo ocular con una hoja de bisturí # 15 y fórceps. Luego, mientras sostiene el nervio óptico con las pinzas, levante suavemente el globo ocular y transfiéralo a un frasco de medio litro lleno de PBS estéril.
Una vez que todos los globos oculares estén limpios de tejido circundante, use fórceps estériles para moverlos a otro frasco de medio litro lleno de povidona yodada al 3% en PBS. Después de que los globos oculares hayan estado en el frasco durante un minuto, transfiéralos a un tercer frasco que contenga PBS estéril.
Coloque un globo ocular en una placa de Petri limpia y use las pinzas para mantenerlo firme. Con una hoja de bisturí # 10A, haga un corte cerca de la córnea. Use tijeras para extirpar la córnea, dejando unos 3 milímetros de esclerótica rodeándola. Asegúrese de que el extremo afilado de las tijeras esté en el espacio supracoroideo y no perfore el iris.
Sostenga el botón corneoescleral con fórceps y use otro par de fórceps de punta para separar suavemente el tejido uveal. Luego, levante el botón corneoescleral para separarlo del resto del globo ocular. Enjuague brevemente el botón en una solución al 1,5% de povidona yodada en PBS. Luego, coloque el botón en PBS estéril en una placa de 12 pocillos.