Aislamiento del complejo de ovocitos de cúmulos porcinos: una técnica para aislar el complejo de ovocitos de cúmulos del folículo ovárico porcino para la fertilización in vitro

0 vistas3:02 min • July 8th, 2025

El ovocito porcino está rodeado por un grupo compacto de múltiples capas de células cúmulos que forman el complejo cúmulo-ovocito o COC. Las células del cúmulo más internas extienden los procesos a través de la zona pelúcida del ovocito. Estos procesos desarrollan uniones gap e intermedias, que ayudan en la transferencia intercelular de moléculas entre el ovocito y las células del cúmulo circundante. Estas interacciones bidireccionales mantienen la viabilidad de los AOC, que es un determinante crucial para el éxito de la fertilización in vitro o FIV.

Para aislar los AOC, sumerja algunos folículos ováricos porcinos en una placa de Petri que contenga los medios de maduración. Este medio contiene hormonas necesarias para la maduración de los ovocitos in vitro. Diseccionar los folículos ováricos para liberar AOC y líquido folicular en la placa de Petri. Este líquido complementa los medios de maduración con nutrientes y hormonas adicionales esenciales para la competencia de los ovocitos.

Aspira el contenido folicular liberado y transfiérelo a otra placa de Petri. Visualice la placa bajo un microscopio para identificar AOC no dañados que exhiben una morfología normal que consiste en ovocitos redondos con citoplasma moderadamente granulado y un cuerpo polar intacto rodeado de células de cúmulos.

Aísle un solo AOC y transfiéralo al pocillo central que contiene los medios de maduración de una placa de FIV. Guarde la placa a una temperatura óptima hasta su uso posterior.

Para aislar los AOC de los folículos de tamaño mediano, transfiera dos o tres ovarios a una placa de Petri estéril de 10 cm llena de HM. Corte suavemente la superficie de los folículos ováricos que sobresalen con una cuchilla quirúrgica estéril # 15, lo que hará que el líquido folicular y los AOC fluyan hacia la placa de Petri. Aspire el contenido folicular con una aguja de calibre 28 conectada a una jeringa desechable y transfiéralo a otra placa de Petri.

Para preparar las placas de Petri de FIV, agregue 1 mililitro de HM a los pocillos centrales y coloque de tres a cuatro gotas de HM en los anillos exteriores. Luego, use una micropipeta de policarbonato para mover los AOC no dañados a gotas de HM en los anillos exteriores y enjuáguelos brevemente tres o cuatro veces. Cuando termine, transfiéralos individualmente al pozo central. Guarde las placas de FIV en la incubadora.

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Última actualización: 29 agosto 2026