Sistema de microbiorreactor de mármol líquido: un protocolo de cultivo en 3D para la encapsulación de ovocitos porcinos

Prepare un lecho de polvo de etileno propileno fluorado, o FEP, en una placa de cultivo. Agregue una gota de medio de maduración que contenga complejos cúmulo-ovocitario, o AOC, sobre el polvo de FEP. Pase suavemente la gota sobre el polvo para formar una canica líquida o LM. El polvo de FEP crea una capa porosa hidrofóbica, lo que permite el intercambio de gases entre el líquido interior y el entorno circundante.

Ahora, recoja la unidad LM y transfiérala al pozo central de una placa de Petri de FIV. Agregue agua estéril al anillo exterior para mantener hidratados los AOC. Luego, incube el LM en condiciones fisiológicas para permitir la maduración de los ovocitos.

A continuación, retire el medio gastado y agregue un medio de maduración fresco. El contacto directo con el líquido interrumpe la capa hidrofóbica de FEP y rompe el LM para liberar los AOC. Transfiera los AOC liberados a un nuevo plato que contenga una gota fresca de medio de maduración y lávelos para eliminar las partículas de FEP.

Después del lavado, transfiera los AOC y el medio fresco al lecho de polvo FEP. Enrolle la gota para cubrirla con polvo. Finalmente, transfiera el LM a la placa de Petri de FIV. Los LM con rec