Transformación genética mediada por agrobacterias: un método para transformar genéticamente el genoma del arroz a través de Agrobacterium tumefaciens modificado genéticamente

Agrobacterium tumefaciens, una bacteria patógena de plantas, puede ser modificada genéticamente mediante la introducción de un plásmido de Ti preparado artificialmente, que lleva un gen de interés en su región de transferencia de ADN o ADN-T, y un plásmido auxiliar que lleva la virulencia o los genes Vir para transferir el ADN-T a las células vegetales.

Para la transformación genética mediada por Agrobacterium, comience con una inflorescencia de arroz joven y córtela en trozos pequeños. Transfiera los esquejes a un medio de crecimiento e incube para facilitar el crecimiento de los esquejes en una masa celular indiferenciada llamada callo.

Ahora, transfiera el callo a un medio de infiltración de Agrobacterium que contenga acetosiringona, un quimioatrayente para Agrobacterium. A continuación, agregue un cultivo de Agrobacterium genéticamente modificado al medio e incube brevemente.

Las moléculas de acetosiringona activan la proteína receptora celular - VirA - en la membrana de Agrobacterium, lo que media aún más la fosforilación de una proteína activadora transcripcional - VirG. El VirG fosforilado se mueve hacia el plásmido auxiliar y activa la transcripción de una cascada de genes