Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Técnicas biológicas
0 visualizaciones • 3:59 min. • July 8th, 2025
Para la administración de ADN plasmídico basado en electroporación en células neuronales primarias, comience con una suspensión de células en medios de electroporación adecuados. Agregue ADN plasmídico que codifica proteínas fluorescentes para preparar la mezcla de electroporación.
Transfiera suavemente la mezcla de electroporación a una cubeta de electroporación, evitando burbujas de aire que podrían afectar negativamente la eficiencia de la electroporación. Transfiera la cubeta al soporte de la cubeta del electroporador; Establezca los parámetros de electroporación. Iniciar la electroporación.
Los pulsos eléctricos cortos de alto voltaje aplicados a través de la membrana celular causan una acumulación de carga diferencial a ambos lados de la membrana, aumentando el potencial transmembrana, el voltaje a través de la membrana celular.
Cuando el potencial transmembrana inducido excede el potencial de ruptura de la bicapa lipídica, la bicapa lipídica se desestabiliza con el cambio de configuración localizado, formando poros hidrófilos transitorios en la membrana celular. Los poros con un tamaño adecuado proporcionan una vía para que el ADN plasmídico ingrese al citoplasma celular.
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