Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Técnicas biológicas
0 visualizaciones • 5:33 min. • July 8th, 2025
Comience con un volumen óptimo de perlas de oro, vehículos de administración de genes biológicamente inertes y no tóxicos, en un tubo de microcentrífuga. Luego, agregue agentes catiónicos: espermidina y cloruro de calcio, seguidos de los fragmentos de ADN deseados a las cuentas de oro. Mueva suavemente el tubo e incube.
El cloruro de calcio se une a los fragmentos de ADN y facilita su recubrimiento sobre las perlas de oro a través de los residuos de espermidina. A continuación, centrifugar y eliminar el disolvente. Vuelva a suspender las perlas recubiertas de ADN en etanol. Pipetea suavemente las perlas en un disco macroportador estéril. Déjalo secar.
Configure un aparato de pistola genética biolítica que comprende un tubo de aceleración de gas helio y una cámara de bombardeo con un disco de ruptura y una pantalla de parada en sus respectivas ranuras. A continuación, invierta el disco macroportador y cárguelo debajo del disco de ruptura.
A continuación, coloque las células huésped objetivo cultivadas en un medio sólido adecuado suplementado con sorbitol, un estabilizador osmótico para mejorar la eficiencia de transformación. Una vez que la configuración esté lista, dispara la pisto
Vea la transcripción completa y acceda a miles de videos científicos