Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Técnicas biológicas
0 visualizaciones • 3:02 min. • July 8th, 2025
Para transducir células huésped con ARN que contenga vectores retrovirales, tome un tubo que contenga vectores empaquetados en medios adecuados. Cada vector contiene una cápside viral, que contiene el complemento de ARN del transgén que se integrará en el genoma del huésped e importantes enzimas virales. Una bicapa lipídica rodea la cápside para facilitar la entrada en la célula huésped.
Agregue los vectores en presencia de un reactivo de transfección adecuado al pocillo de una placa de cultivo que contenga la suspensión de la célula huésped. Cubre el plato. Centrífuga a baja velocidad para permitir la transducción de espín. Esto acerca el vector viral a la superficie de la célula huésped, aumentando la eficiencia de la transducción.
Simultáneamente, los policationes en el reactivo de transfección neutralizan las cargas negativas en el virus y la célula huésped, promoviendo la adsorción viral en las células diana.
En consecuencia, los receptores en la superficie del virus facilitan su fusión con la membrana del huésped. La cápside viral ingresa a la célula y se rompe, liberando ARN transgénico y enzimas virales en su citoplasma.
Dentro del citoplasma, la transcriptasa inversa viral
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