Tinción de rojo del Nilo: una técnica para detectar y cuantificar lípidos neutros intracelulares en algas

Las algas son organismos fotosintéticos acuáticos que producen una variedad de lípidos, de los cuales los lípidos neutros son esenciales para la producción de biodiesel.

Para detectar y cuantificar lípidos neutros, mezcle un volumen óptimo de suspensión de algas y etanol en un pocillo de placa de microtitulación negra. La pared celular y la membrana de las algas, que evitan que penetren la mayoría de las manchas, se vuelven permeables cuando se exponen al etanol. A continuación, combine el etanol con un colorante fluorescente soluble en lípidos: rojo Nilo. Agregue esta mezcla al pozo que contiene algas.

Coloque la placa de microtitulación en un espectrofotómetro. Establezca un programa que asegure la incubación con agitación intermitente para facilitar la interacción entre el tinte y las algas.

Como el rojo Nilo es hidrofóbico, no puede atravesar fácilmente el citoplasma. Los disolventes como el etanol, cuando se combinan con el rojo del Nilo, movilizan el tinte y lo ayudan a llegar a los cuerpos lipídicos dispersos en el citoplasma. El rojo Nilo penetra entonces en los cuerpos lipídicos y se solubiliza allí, tiñendo así los lípidos.

Las células deficientes en lípidos aparecen como