Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Técnicas biológicas
0 visualizaciones • 3:50 min. • July 8th, 2025
Para la tinción negativa de virus envueltos, comience con la suspensión viral deseada. Incube los virus con glutaraldehído, un fijador químico. Tras la penetración, el glutaraldehído reticula las proteínas virales y los ácidos nucleicos, inactivando los virus y preservando la morfología, lo que facilita el manejo seguro de los virus. Transfiera esta mezcla a un plato de varios pocillos.
Conecte rejillas de microscopía electrónica de transmisión, TEM, que contienen cápsulas a una pipeta a través de un acoplador. Con la pipeta, aspire la mezcla fijadora de virus en la cápsula. Incube el conjunto de pipetas para que los virus se adsorban en las superficies de la rejilla.
Retire la mezcla. Lave la cápsula, eliminando los virus y fijadores no adherentes. Pipetea una solución de acetato de uranilo, un tinte a base de metales pesados, en la cápsula. Incubar para permitir que la mancha entre en contacto con los virus.
Los iones de uranilo se unen a glicoproteínas de membrana y fosfolípidos específicos en las superficies virales. Los iones pueden penetrar en los virus y unirse a las proteínas de la nucleocápside que encierran el genoma. Esta unión induce la agregación y deposición de iones
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