Tinción con safranina-O: un método para visualizar la integridad estructural y la celularidad del cartílago

Para la tinción del cartílago, comience con una sección de cartílago fijada en formol e incrustada en parafina de un ratón sacrificado.

Primero, sumerja la muestra en el sustituto del xileno, un agente de limpieza no peligroso que elimina la cera de parafina y expone el tejido deshidratado. A continuación, trate la muestra con concentraciones decrecientes de etanol para rehidratar el tejido para su posterior tinción.

Ahora, tiñe la muestra con hematoxilina de hierro de Weigert, una tinción orgánica que contiene iones ferrosos, e incube brevemente. Las moléculas de hematoxilina forman complejos con iones ferrosos y penetran en la célula. Los iones ferrosos actúan como mordiente y facilitan la unión de la hematoxilina a los ácidos nucleicos, impartiéndoles un color azul.

Luego, trate la muestra con el tinte verde rápido, una contratinción que se une al tejido conectivo e imparte un color verde. A continuación, trate la muestra con una solución de ácido acético para estabilizar las moléculas de colorante. Por último, tiña la muestra con safranina-naranja -un colorante catiónico- e incuba.

Las moléculas de safranina cargadas positivamente migran hacia los proteoglicanos cargados negati