Tinción de secciones de tejido: un procedimiento de tinción para visualizar cartílago y huesos en secciones de embriones de ratón congelados

Para visualizar las regiones de cartílago y hueso en una sección de tejido, comience con un portaobjetos de vidrio que lleve una sección delgada de tejido de embrión de ratón congelado de interés.

Descongele brevemente la criosección y sumérjala en una concentración de etanol adecuada para eliminar el medio de crio-inclusión. El paso de eliminación ayuda a evitar el aflojamiento del medio, que de otro modo podría afectar la visualización del tejido durante la tinción. Además, el etanol fija el tejido, manteniendo la morfología e integridad del tejido.

A continuación, pipetee una solución de violeta de cresilo sobre el tejido. La violeta de cresil, un colorante básico cargado positivamente, se une a restos polianiónicos como los proteoglicanos en la matriz del tejido cartilaginoso. Mientras que, en tejidos mineralizados como los huesos, reacciona con grupos cargados negativamente, como los grupos fosfato en la matriz ósea.

Al ser un tinte metacromático, el violeta de cresilo tiñe diferentes regiones del tejido en colores diferentes del tinte natural en función de su interacción con diferentes componentes químicos dentro de esas regiones.

Ahora, lave el pañuelo en una concentración d