Tinción de gotas lipídicas de enocitos larvales de Drosophila: una técnica para la evaluación de la acumulación de gotas lipídicas en condiciones normales y estresadas utilizando un colorante a base de BODIPY

Los enocitos larvales de Drosophila son células especializadas que se adhieren en forma de grupos discretos en la superficie basal de la epidermis lateral, la capa superficial de la piel. Estos enocitos están involucrados principalmente en el metabolismo de los lípidos.

Durante la inanición, estos enocitos acumulan un exceso de gotas de lípidos. Cada gota consta de un núcleo hidrofóbico de lípidos neutros, como triglicéridos, y ésteres de colesterol, rodeado por una monocapa de fosfolípidos.

Para visualizar las gotas de lípidos, tome una sección disecada de la epidermis larvaria de Drosophila con enocitos adheridos. Tratar con un tampón de fijación que contenga paraformaldehído para reticular las proteínas celulares como las proteasas y preservar la integridad estructural de los enocitos. Retire el tampón de fijación. Incubar con un tinte fluorescente a base de BODIPY en la oscuridad para evitar el fotoblanqueo.

Durante la incubación, el colorante no polar se difunde a través de la membrana celular de los enocitos y atraviesa la monocapa que rodea las gotas de lípidos. La hidrofobicidad de las moléculas de colorante permite su movimiento hacia el núcleo no polar de las gotas de líp