Tinción TTC de cortes de tejido cerebral de rata: un procedimiento de tinción para diferenciar el tejido viable y necrótico en cortes de tejido después de una lesión por isquemia-reperfusión

Durante la isquemia cerebral, el flujo sanguíneo alterado al cerebro reduce el suministro de oxígeno y nutrientes al tejido, causando daño cerebral. Después de una isquemia breve, a medida que se restablece el flujo sanguíneo al cerebro, la reperfusión con un mayor suministro de oxígeno da como resultado una sobreproducción de especies de iones reactivos, lo que lleva a un daño tisular oxidativo, conocido como lesión por isquemia-reperfusión.

Para evaluar el daño cerebral después de una lesión por isquemia-reperfusión en un modelo de rata, primero se recolecta el cerebro de rata. Enjuague en un tampón frío para eliminar los desechos y la sangre. Seccionar el cerebro para obtener cortes coronales del grosor deseado. Transfiera con cuidado las rodajas a una bandeja que contenga tampón, con las superficies anteriores hacia arriba, para su posterior tinción.

Agregue una solución de cloruro de trifenil tetrazolio tibio, TTC, un tinte redox soluble en agua, sobre las rodajas de cerebro. Incube en condiciones de oscuridad, ya que TTC es sensible a la luz. TTC ingresa a las células dentro de la sección de tejido.

En las células vivas, la enzima succinato deshidrogenasa mitocondrial activa