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Técnicas biológicas
0 vistas • 2:50 min • July 8th, 2025
El epitelio de las trompas de Falopio comprende células secretoras que producen líquido rico en nutrientes y células ciliadas que impulsan el óvulo bañado en líquido hacia el útero. Los cambios morfológicos y la pérdida funcional en las células tubáricas se asocian con el cáncer de trompas de Falopio.
Para visualizar la morfología tubárica, tome un portaobjetos untado de tejido y sumérjalo en etanol para corregir sus características citológicas. Enjuague el portaobjetos con agua para eliminar el exceso de fijador.
Ahora, sumerja el portaobjetos en hematoxilina, un tinte catiónico que se une al ADN cargado negativamente, tiñendo el núcleo de azul. Enjuague el portaobjetos con agua seguido de etanol para evitar manchas excesivas.
A continuación, sumerja el portaobjetos en el tinte Eosin Azure, una solución policroma de marrón de Bismarck, Eosina Y y verde rápido mezclados con ácido fosfotúngstico. El marrón de Bismarck precipita ácido fosfotúngstico, un mordiente utilizado por la eosina Y, y el verde rápido para teñir diferencialmente las células tubáricas no cancerosas y las células cancerosas metabólicamente activas.
Repita el paso de enjuague con agua y alcohol. Por último, sumerja el portaobjetos en xileno, un agente limpiador que elimina el exceso de componentes de la mancha. Posteriormente, monte el portaobjetos y visualícelo bajo un microscopio.
El epitelio normal de las trompas de Falopio aparece como una capa organizada de células teñidas de azul claro, ciliadas y secretoras. Por el contrario, las células malignas en el epitelio aparecen como grupos de células con núcleos oscuros.
Antes de teñir las células, cargue el vial de muestra en un procesador automatizado para la preparación de portaobjetos. Cuando los portaobjetos estén listos, sumerja las muestras en etanol al 95%, 10 veces, durante 1 segundo por inmersión, seguido de 10 inmersiones en agua, durante 1 segundo por inmersión.
A continuación, sumerja los portaobjetos en hematoxilina durante 10 a 60 segundos, seguido de un segundo lavado con agua y etanol. Después de la última inmersión en etanol, sumerja los portaobjetos en Eosin Azure durante 1 a 3 minutos, seguido de otro enjuague con etanol de agua. Luego, sumerja los portaobjetos en xileno; hasta que las muestras se vuelvan claras.