Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Técnicas biológicas
0 visualizaciones • 2:19 min. • July 8th, 2025
La celulosa es un polímero no ramificado de unidades β-glucosa unidas por un enlace β-1→4 y dispuestas en paralelo a través de enlaces de hidrógeno intermoleculares.
La celulosa sirve como el principal componente estructural de la pared celular de la planta, proporcionando forma y rigidez a las células y facilitando el crecimiento y desarrollo de las plantas. La proporción de celulosa dentro de la pared celular varía significativamente a lo largo de la planta, según el tipo de célula y la etapa de crecimiento.
Para visualizar la deposición de celulosa en el tallo, tome secciones transversales delgadas de secciones de tallo incrustadas en agarosa.
Agregue el tinte fluorescente rojo Congo e incube las secciones.
Las moléculas de rojo Congo ingresan a la pared celular y forman enlaces de hidrógeno con los grupos hidroxilo de la celulosa, por lo que se adsorben en el polímero. Esto imparte un color rojo a la epidermis, la corteza y la médula.
Las moléculas de colorante también se difunden dentro de las complejas paredes celulares del xilema y las fibras interfasciculares, cruzando la barrera rígida de la lignina, impartiendo así un color rojo a estos tejidos también.
Ahora, enjuague las secciones con agua para eliminar el exceso de mancha. Transfiera las secciones a un portaobjetos de microscopio y coloque un cubreobjetos.
Cuando se visualizan bajo un microscopio de fluorescencia, la epidermis, la corteza, la médula central, el xilema y las fibras interfasciculares aparecen rojas, correspondientes a su contenido de celulosa.
Para la tinción de rojo Congo, transfiera las secciones del tallo a un tubo de microcentrífuga y agregue 1 mililitro de la solución de rojo Congo al 0,5%. Pipetee suavemente la solución de rojo Congo al 0,5% hacia arriba y hacia abajo, sin alterar las secciones, antes de incubar y lavar las secciones como se describe en el protocolo de texto. Pipetea suavemente las secciones en una punta de pipeta cortada y en un portaobjetos de microscopio, luego cúbrelas con un cubreobjetos. Observe las muestras en el portaobjetos del microscopio bajo excitación de luz azul utilizando un filtro de emisión de 560 nanómetros.