Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Técnicas biológicas
0 visualizaciones • 4:15 min. • July 8th, 2025
Los glicosaminoglicanos sulfatados como los sulfatos de heparán, HS, son polisacáridos sulfatados, lineales y cargados negativamente de longitudes de cadena variable, unidos a proteínas de la superficie celular.
Para estimar HS de diferentes longitudes aisladas del tejido pulmonar de ratón, comience con el ensamblaje del casete de gel. Llénelo parcialmente con una solución de acrilamida-bisacrilamida altamente concentrada, incluidos los agentes catalizadores: persulfato de amonio y tetra-metil-etilendiamina. Cubra con agua para evitar el contacto con el aire, lo que puede inhibir la polimerización. Incubar.
Los agentes catalizadores inducen la polimerización de la acrilamida-bisacrilamida, formando un gel de resolución de poros pequeños. Deseche el agua. Agregue una solución de acrilamida-bisacrilamida baja concentración con agentes catalizadores. Inserte un peine de gel para crear pozos. La solución polimeriza, formando un gel de apilamiento de poros grandes.
Cargue las cámaras del tanque de electroforesis con un tampón de funcionamiento para una conductividad eléctrica óptima durante la electroforesis.
Disuelva la mezcla de HS en un tampón de carga que contenga colorante de segui
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